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实验2薄层层析与柱层析 2.8.1薄层色谱 薄层色-谱(thin layer chromatography),常用TLC表示,是一种微量、快速 和简便的色谱方法,可用于分离混合物和精制化合物。它展开时间短(几十分钟 就可达到分离目的),分离效果高(可达到300~4000块理论塔板数),需要样 品少(几到几十微克甚至0.01山g)。如果将吸附层加厚,样品点成一条线时,又 可用作制备色谱,分离多达500mg的样品,用于精制样品。特别适用于挥发性 较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。 常用的薄层色谱有吸附色谱和分配色谱两类。一般能用硅胶或氧化铝薄层 色谱分开的物质,也能用硅胶或氧化铝柱色谱分开:凡能用硅藻土和纤维素作支 持剂的分配柱色谱能分开的物质,也可分别用硅藻土和纤维素薄层色谱展开,因 此薄层色谱常用作柱色谱的先导。 薄层色谱是在干净的玻璃板(10cm×3cm)上均匀地涂一层吸附剂或支持剂, 待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1c处 的起点线上,晾干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5 cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂, 或在紫外灯下显色。记录原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离,计算R值: 凡,-溶质的最高浓度中心至原点中心的距离 溶剂前沿至原点中心的距离 图1.2是二组分混合物展开后各组分的R值。良好的分离,R,值应在0.15~ 0.75之间,否则应更换展开剂重新展开。 溶剂前沿 02 01 样点 展开前 展开后 图2.1二组分混合物的TLC 33 实验 2 薄层层析与柱层析 2.8.1 薄层色谱 薄层色-谱(thin layer chromatography),常用 TLC 表示,是一种微量、快速 和简便的色谱方法,可用于分离混合物和精制化合物。它展开时间短(几十分钟 就可达到分离目的),分离效果高(可达到 300~4 000 块理论塔板数),需要样 品少(几到几十微克甚至 o.01 μ-g)。如果将吸附层加厚,样品点成一条线时,又 可用作制备色谱,分离多达 500 mg 的样品,用于精制样品。特别适用于挥发性 较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。 常用的薄层色谱有吸附色谱和分配色谱两类。一般能用硅胶或氧化铝薄层 色谱分开的物质,也能用硅胶或氧化铝柱色谱分开;凡能用硅藻土和纤维素作支 持剂的分配柱色谱能分开的物质,也可分别用硅藻土和纤维素薄层色谱展开,因 此薄层色谱常用作柱色谱的先导。 薄层色谱是在干净的玻璃板(10 cm×3 cm)上均匀地涂一层吸附剂或支持剂, 待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约 1 cm 处 的起点线上,晾干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为 0.5 cm。待展开剂前沿离顶端约 1 cm 附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂, 或在紫外灯下显色。记录原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离,计算 Rf 值: Rf  溶质的最高浓度中心至原点中心的距离 溶剂前沿至原点中心的距离 图 1.2 是二组分混合物展开后各组分的 Rf 值。良好的分离,Rf,值应在 0.15~ 0.75 之间,否则应更换展开剂重新展开。 图 2.1 二组分混合物的 TLC
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