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机体被微生物感染后,先产生【gM抗体,然后产生IgG抗体。经过一段时间,IgM抗体量逐渐减少 而消失,而1gG抗体可长期存在,在疾病痊愈后可持续数年之久。 IgM抗体一般为保护性抗体具有免疫性。因此IgM抗体的测定,对某些传染病如甲型肝炎有较高的 临床诊断价值。右图为为甲型肝炎病人血清中IgG抗体和IgM抗体出现的时间和水平 1.3抗原抗体反应 1.3.1可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为: Ag+Ab→Ag·Ab 抗体的亲和力(affinity)是抗原抗体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示: K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab] Ag·A仙的解离程度与K值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合, 两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法 来提纯抗原或抗体。在抗血清中,特异性的IgG抗体仅占总IgG中的极小部分。用亲和层析法提取 的特异性抗体,称为亲和层析纯抗体,应用于免疫测定中可得到更好的效果。 1.3.2最适比例 在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物(沉淀)的量见图1-4。曲线的高蜂部分是抗 原抗体比例最合适的范围,称为等价带(zone of equivalence)。在等价带前后分别为抗体过剩带 和抗原过剩带。如果抗原或抗体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象(zo phenomenon)。抗体过量称为前带(prezone),抗原地过量称为后带(postzone)。在用免疫学方法 测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗体量,否则测得的量会小于实际含量,其至出现假阴性。 1.3.3特异性 抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结 构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。例如乙肝病毒中的表面抗原 (BsAg)、e抗原(BeAg)和核心抗体(BcAg),随来源于同一病毒,但仅与其相应的抗体结合, 而不与另外两种抗体反应。抗原抗体反应的这种特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物 (例如血清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。 但是这种特异性也不是绝对的。假使两种化合物有者部分相同的结构,在抗原抗体反应中可出现交 叉反应。例如:绒毛膜促性腺激素(hCG)和黄体生成激素(LH)均由a和B两个亚单位组成,其 结构的不同处在B亚单位,而两者的á亚单位是同类的。用hCG免疫动物所得的抗血清中含有抗机体被微生物感染后,先产生 IgM 抗体,然后产生 IgG 抗体。经过一段时间,IgM 抗体量逐渐减少 而消失,而 IgG 抗体可长期存在,在疾病痊愈后可持续数年之久。 IgM 抗体一般为保护性抗体具有免疫性。因此 IgM 抗体的测定,对某些传染病如甲型肝炎有较高的 临床诊断价值。右图为为甲型肝炎病人血清中 IgG 抗体和 IgM 抗体出现的时间和水平。 1.3 抗原抗体反应 1.3.1 可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为: Ag+Ab→Ag·Ab 抗体的亲和力(affinity)是抗原抗体间的固有结合力,可以用平衡常数 K 表示: K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab] Ag·Ab 的解离程度与 K 值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合, 两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法 来提纯抗原或抗体。在抗血清中,特异性的 IgG 抗体仅占总 IgG 中的极小部分。用亲和层析法提取 的特异性抗体,称为亲和层析纯抗体,应用于免疫测定中可得到更好的效果。 1.3.2 最适比例 在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物(沉淀)的量见图 1-4。曲线的高峰部分是抗 原抗体比例最合适的范围,称为等价带(zone of equivalence)。在等价带前后分别为抗体过剩带 和抗原过剩带。如果抗原或抗体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象(zone phenomenon)。抗体过量称为前带(prezone),抗原地过量称为后带(postzone)。在用免疫学方法 测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。 1.3.3 特异性 抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结 构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。例如乙肝病毒中的表面抗原 (HBsAg)、e 抗原(HBeAg)和核心抗体(HBcAg),随来源于同一病毒,但仅与其相应的抗体结合, 而不与另外两种抗体反应。抗原抗体反应的这种特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物 (例如血清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。 但是这种特异性也不是绝对的。假使两种化合物有着部分相同的结构,在抗原抗体反应中可出现交 叉反应。例如:绒毛膜促性腺激素(hCG)和黄体生成激素(LH)均由 α 和 β 两个亚单位组成,其 结构的不同处在 β 亚单位,而两者的 α 亚单位是同类的。用 hCG 免疫动物所得的抗血清中含有抗
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