附：凯式定氮法测定食品中蛋白质的含量原理、步骤及注意事项 一、[实验原理] 蛋白质是含氨的有机化合物，食品样品与硫酸和催化剂一同加热 消化，使蛋白质分解，分解产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱 化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再以硫酸或盐酸标准溶液滴定。根 据酸的消化量求得样品中的含氮量，再乘以蛋白质换算系数，即为蛋 白质的含量。 二、[操作步骤] 1.消化：精密称取大豆样品1.0g左右，放入干燥的250ml消化 管中，加入0.4gCuS04、7gK2S04、10 ml H2S(04。先200C炭化，待池 沫停止后提高温度到400℃，加热至液体沸腾，待瓶内液体呈蓝绿色透 明后，再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水，移入100ml容量瓶中， 用少量水洗涤消化管2一3次，洗液合并于容量瓶中定容。 2.蒸馏：连接凯氏定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至23处 加甲基红指示剂数滴及数ml硫酸，保持水呈酸性。加入数粒玻璃珠以 防暴沸，调节火力加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 3.吸收：向吸收瓶内加入2gL硼酸溶液20ml及混合指示剂2滴， 并使冷凝管下端插入液面以下，吸取10ml样品消化稀释液由进样口进 入反应室，并以10ml水洗涤进样口使其流入反应室内，将400 g/LNaOH 溶液10ml倒入进样口，立即夹紧螺旋夹，并加入少量蒸馏水，密封进 样口。当蒸汽通入反应室时，准确计时，反应产生的氨气通过冷凝管 进入吸收瓶，蒸馏5min,移动吸收瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸 馏1min,然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下吸收瓶。 停止加热，使反应室内的液体进入汽水分离器，打开进样口的螺旋夹 将汽水分离器的液体放出。再向反应室内加入蒸馏水，夹紧螺旋夹， 再次进行加热至水蒸汽放出，停止加热，使反应室内的水进入汽水分 离器，进行洗涤。 4.滴定：用0.025molL硫酸标准溶液滴定吸收液至灰色。 5.计算： X=cV×14×5.71/m X为样品中蛋白质的含量，%：c为硫酸标准溶液的浓度， moL:V为样品消化液消耗硫酸标准溶液的体积，ml:m为样品的厨 量，g2 附：凯式定氮法测定食品中蛋白质的含量原理、步骤及注意事项 一、[实验原理] 蛋白质是含氮的有机化合物，食品样品与硫酸和催化剂一同加热 消化，使蛋白质分解，分解产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱 化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再以硫酸或盐酸标准溶液滴定。根 据酸的消化量求得样品中的含氮量，再乘以蛋白质换算系数，即为蛋 白质的含量。 二、[操作步骤] 1．消化：精密称取大豆样品 1.0g 左右，放入干燥的 250 ml 消化 管中，加入 0.4g CuSO4、7g K2SO4、10ml H2SO4。先 200℃炭化，待泡 沫停止后提高温度到 400℃，加热至液体沸腾，待瓶内液体呈蓝绿色透 明后，再继续加热 0.5h。冷却后加入 20ml 水，移入 100ml 容量瓶中， 用少量水洗涤消化管 2～3 次，洗液合并于容量瓶中定容。 2．蒸馏：连接凯氏定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至 2/3 处， 加甲基红指示剂数滴及数 ml 硫酸，保持水呈酸性。加入数粒玻璃珠以 防暴沸，调节火力加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 3．吸收：向吸收瓶内加入 2g/L 硼酸溶液 20ml 及混合指示剂 2 滴， 并使冷凝管下端插入液面以下，吸取 10ml 样品消化稀释液由进样口进 入反应室，并以 10ml水洗涤进样口使其流入反应室内，将 400g/L NaOH 溶液 10ml 倒入进样口，立即夹紧螺旋夹，并加入少量蒸馏水，密封进 样口。当蒸汽通入反应室时，准确计时，反应产生的氨气通过冷凝管 进入吸收瓶，蒸馏 5min，移动吸收瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸 馏 1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下吸收瓶。 停止加热，使反应室内的液体进入汽水分离器，打开进样口的螺旋夹， 将汽水分离器的液体放出。再向反应室内加入蒸馏水，夹紧螺旋夹， 再次进行加热至水蒸汽放出，停止加热，使反应室内的水进入汽水分 离器，进行洗涤。 4．滴定：用 0.025mol/L 硫酸标准溶液滴定吸收液至灰色。 5．计算： X＝cV×14×5.71/m X 为样品中蛋白质的含量，％；c 为硫酸标准溶液的浓度， mol/L；V 为样品消化液消耗硫酸标准溶液的体积，ml；m 为样品的质 量，g