注意事项 PCR的常见问题主要有： 1.没有PCR产物。其主要可能有PCR反应的有关试 剂缺乏，循环次数不够，退火温度太高，引物设计不好， 模版不够，模版质量差，变性温度过高或过低，变性时间 过长或过短，链延伸时间过短，Taq酶数量不够或质量不行， Mg过低，dNTP过少，模版C/G过于丰富，等等。 2.PCR产物不纯，见多条条带产物。其主要可能有 循环次数太多，退火温度过低，引物设计不合理，污染等。 其中，引物设计不合理的可能性最大。 3.PCR产物前后一片，拖带。其主要可能有循环次 数太多，退火温度太低，链延伸时间过长，模版质量差， 模版过多，污染，Taq酶数量过多，Mg"过多，等等