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还有一些值得注意的问题: 4.关于引物 (1)引物的长度。引物的长度要求不一,如模版是单 一的载体和单一的插入片段,可以选用较短的插入片段两 侧的载体序列作为引物,一些常用载体有现成的引物商品, 可以购买。对于复杂的基因库,或反转录产物,为提高引 物的特异性,建议采用较长的引物。具体可以参见RACE PCR介绍。 (2)引物的CG与AT的比例。可能的话,建议1:1 左右。 (3)引物的计算机设计参见本书RTPCR介绍。 5.关于酶。一些实验反复失败,竟然会与酶的质量问 题有关。因此,我们建议购买那些经常从事PCR实验的实 验室所经常使用品牌及其供应商的PCR酶
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