6.退火温度。通常按照检索到的文献或试剂盒提供的 方法，可以确定退火温度。但是，时常会碰到两条引物的 Tm值不一致，或PCR反复调整仍不见改善，此时可以考 虑Touch Down PCR的方法，具体参见本书RACE PCR介 绍。 7.CG丰富的DNA模版往往不容易扩增。对此，可 以采用DMSO(DIMETHYL SULFOXIDE),用量为PCR 反应总容积的1/10。比如将4ul的DMSO加入36ul的PCR 反应液，使总容积达40ul。 8.MgC2。通常PCR buffer中含有MgCL2,但是由于 一些不清楚的原因，有时仍嫌不足，此时可以适当增加 MgCl2的浓度