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际操作中多在缓冲液体系中进行。 六、激活剂对酶促反应速度的影响 凡是能提高酶活性的物质,都称激活剂(activator),其中大部分是离子或简单的有 机化合物。激活剂按分子大小可分为三类: (一)无机离子 有阳离子,如K 、Na、Mg2、Zm2、Fe2、Ca2等,其中Mg2是多种激酶及合成 的激活剂 也有阴离 状得的 粉 是韩的 二)中等大 的有机分子 某些还原剂, 如半胱氨酸、还原型谷胱甘肽、抗坏血酸等能激活某些酶,使含巯基 酶中被氧化的二疏键还原成巯基,从而提高酶活性,如木瓜蛋白酶及D-3磷酸甘油醛脱 氢酶。 三)具有蛋白质性质的大分子 这类激活剂专指可对某些无活性的酶原起作用的酶。 激活作用 活性的酶原 有活性的酶 在酶的提取或纯化过程中,酶会因为金属离子激活剂丢失或活性基团巯基被氧化而 活性降低,因此要注意补充金属离子激活剂或加入巯基乙醇等还原剂,使酶恢复活性。 七、抑制剂对酶促反应速度的影响 抑制剂(inhibitor)是指能使酶的必需基团或酶活性部位中的基团的化学性质改变而 降低酶的催化活性,甚至使酶催化活性完全丧失的物质。 抑制剂只能使酶的催化活性降低或丧失,而不引起酶蛋白变性的作用称为抑制作用 。醇蛋白变性而引起酶活力丧失的作用称为变性作用,又称失活作用。所 不的 抑制剂 可逆的 子的活性中心的 比较车的共健拥结用为不制作用 个键相结 不能用 透 恢复酶活性。 常见的不可逆抑制剂有:有机磷化合物,如二异丙基氟磷酸(DIFP)、1605、敌百 虫,它们都能与胰凝乳蛋白酶或乙酰胆碱酯酶活性中心处的丝氨酸残基上的羟基以共价 健牢固结合,因而抑制酶活性。DFP是第二次世界大战中使用过的毒气,它与酶分子的 反应可表示为: 115115 激活作用 际操作中多在缓冲液体系中进行。 六、激活剂对酶促反应速度的影响 凡是能提高酶活性的物质,都称激活剂(activator),其中大部分是离子或简单的有 机化合物。激活剂按分子大小可分为三类: (一)无机离子 有阳离子,如K +、Na +、Mg 2+、Zn 2+、Fe 2+、Ca 2+等,其中Mg 2+是多种激酶及合成酶 的激活剂。也有阴离子,如经透析获得的唾液淀粉酶活性不高,加入Cl -离子后则活性增 高,故Cl -是唾液淀粉酶的激活剂。而金属离子作为激活剂的作用:一是作为酶的辅因子, 是酶的组成成分,在分离提纯中常被丢失;二是在酶与底物的结合中起桥梁作用。 (二)中等大小的有机分子 某些还原剂,如半胱氨酸、还原型谷胱甘肽、抗坏血酸等能激活某些酶,使含巯基 酶中被氧化的二硫键还原成巯基,从而提高酶活性,如木瓜蛋白酶及D-3-磷酸甘油醛脱 氢酶。 (三)具有蛋白质性质的大分子 这类激活剂专指可对某些无活性的酶原起作用的酶。 活性的酶原 有活性的酶 在酶的提取或纯化过程中,酶会因为金属离子激活剂丢失或活性基团巯基被氧化而 活性降低,因此要注意补充金属离子激活剂或加入巯基乙醇等还原剂,使酶恢复活性。 七、抑制剂对酶促反应速度的影响 抑制剂(inhibitor)是指能使酶的必需基团或酶活性部位中的基团的化学性质改变而 降低酶的催化活性,甚至使酶催化活性完全丧失的物质。 抑制剂只能使酶的催化活性降低或丧失,而不引起酶蛋白变性的作用称为抑制作用 (inhibition)。酶蛋白变性而引起酶活力丧失的作用称为变性作用,又称失活作用。所 以抑制作用与变性作用是不同的。 根据抑制剂与酶的作用方式可将抑制作用分为可逆的与不可逆的两大类。 (一)不可逆的抑制作用 抑制剂与酶的结合是一不可逆反应。抑制剂与酶分子的活性中心的某些必需基团以 比较牢固的共价键相结合,这种结合不能用简单的透析、超滤等物理方法解除抑制剂而 恢复酶活性。这种抑制作用称为不可逆抑制作用(irreversible inhibition)。 常见的不可逆抑制剂有:有机磷化合物,如二异丙基氟磷酸(DIFP)、1605、敌百 虫,它们都能与胰凝乳蛋白酶或乙酰胆碱酯酶活性中心处的丝氨酸残基上的羟基以共价 键牢固结合,因而抑制酶活性。DIFP是第二次世界大战中使用过的毒气,它与酶分子的 反应可表示为:
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