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2.同位者标记法 五、光脱色恢复技术(fluorescence recovery after photobleaching.FRAP) 研究膜蛋白或膜脂流动性的基本实验技术之 根据荧光恢复的速度可推算出膜蛋白或膜脂扩散速度 六、分子生物学技术在膜蛋白研究上的应用 (application of moleculer biological technique on the research of membrane 七、生物膜结构特征((feature of bio-membrane)) 1 脂的 (1)膜脂的流动性 膜脂的流动性主要由脂分子本身的性质决定的,脂肪酸链越短,不饱和程 度越高膜脂的流动性越大。温度对膜脂的运动有明显的影响。在细南 和动物细胞中常通过增加不饱和脂防酸的含量来调节膜脂的相变温度 以维持膜脂的流动性。在动物细胞中,胆固醇对膜的流动性起重要的双 向调节作用。 (2)膜蛋白的流动 荧光抗体免疫标记实验 莫的流(atchin减成帽现象capping))元白的运动,也影响 (3)膜的流动性受多种因素影响: 其周围的 脂的流动。膜蛋白与膜脂分子的相互作用也是影响膜流动性 的重要因素 2.膜的不对称性 〔1)细胞质膜各部分的名称 (2)膜脂与糖脂的不对称性 ◆糖脂仅存在于质膜的S面,是完成其生理功能的结构基础 (3)膜蛋白与糖蛋白的不对称性 ◆膜蛋白的不对称性是指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确的方 向性: ◆糖蛋白糖残基均分布在质膜的ES面(GO+3HBH4 labeling): ◆膜蛋白的不对称性是生物膜完成复杂的在时间与空间上有序的各种 能的保证 八、细胞质膜的功能(function of cell membrane) 1.为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境: 2.选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排除,其中伴随若能量 的传递 3. 提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜传递 4。为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行: 5.介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接 6.质膜参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构 九、膜骨架与细胞表面的特化结构 (membrane skeleton and specific structure of cell surface) 细胞质膜常常与膜下结构(主要是细胞骨架系统)相互联系,协同作用, 并形成细胞表面的某些特化结构以完成特定的功能。 11 2.同位素标记法 五、光脱色恢复技术(fluorescence recovery after photobleaching, FRAP) 1.研究膜蛋白或膜脂流动性的基本实验技术之一。 2.程序:根据荧光恢复的速度可推算出膜蛋白或膜脂扩散速度。 六、分子生物学技术在膜蛋白研究上的应用 (application of moleculer biological technique on the research of membrane protein) 七、生物膜结构特征(structure feature of bio-membrane) 1.膜脂的流动性 〔1〕膜脂的流动性 膜脂的流动性主要由脂分子本身的性质决定的,脂肪酸链越短,不饱和程 度越高,膜脂的流动性越大。温度对膜脂的运动有明显的影响。在细菌 和动物细胞中常通过增加不饱和脂肪酸的含量来调节膜脂的相变温度 以维持膜脂的流动性。在动物细胞中,胆固醇对膜的流动性起重要的双 向调节作用。 〔2〕膜蛋白的流动 荧光抗体免疫标记实验 成斑现象(patching)或成帽现象(capping) 〔3〕膜的流动性受多种因素影响;细胞骨架不但影响膜蛋白的运动,也影响 其周围的膜脂的流动。膜蛋白与膜脂分子的相互作用也是影响膜流动性 的重要因素 2.膜的不对称性 〔1〕细胞质膜各部分的名称 〔2〕膜脂与糖脂的不对称性 ◆糖脂仅存在于质膜的 ES 面,是完成其生理功能的结构基础 〔3〕膜蛋白与糖蛋白的不对称性 ◆膜蛋白的不对称性是指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确的方 向性; ◆糖蛋白糖残基均分布在质膜的 ES 面(GO+3HBH4 labeling); ◆膜蛋白的不对称性是生物膜完成复杂的在时间与空间上有序的各种 生理功能的保证。 八、细胞质膜的功能(function of cell membrane) 1.为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境; 2.选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排除,其中伴随着能量 的传递; 3.提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜传递; 4.为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行; 5.介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接; 6.质膜参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构。 九、膜骨架与细胞表面的特化结构 (membrane skeleton and specific structure of cell surface) 细胞质膜常常与膜下结构(主要是细胞骨架系统)相互联系,协同作用, 并形成细胞表面的某些特化结构以完成特定的功能。 11
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