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(2)脂质体的应用 ◆研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质: ◆脂质体中裹入DNA可用于基因转移 ◆在临床治疗中,脂质体作为药物或酶等载体 三膜蛋白(membrane protein) 1.基本类型 〔1)外在(外周)膜蛋白(extrinsic/peripheral membrane proteins): 水溶性蛋白,靠离子键或其它弱键与膜内表面的蛋白质分子或脂分子极 生头部非共价结合 ,易分离 (2)内在(整合)膜蛋白((intrinsic/integral membrane proteins)。 水不溶性蛋白,形成跨膜螺旋,与膜结合紧密,需用去垢剂使膜崩解后 才可分离 (3)脂质错定蛋白(lipid-anchored roteins) 通过磷脂或脂肪酸错定,共价结合 2. 内在膜蛋白与膜 结合 的 〔1)膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。 〔2)跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形 成离子键,或带负电的氨基酸残基通过C2+、Mg2+等阳离子与带负电 的磷脂极性头相互作用。 (3)某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子 插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力,还有少数蛋白与 糖脂共价结合。 3.外在膜蛋白与膜脂结合的方式 4:去本折是端亲水、另一端疏水的两性小分子是分离与研究膜蛋白的觉 用试剂。 (2)离子型去垢剂(SDS)和非离子型去垢剂(TritonX-100) SDS:CH3- -(CH2)- -0503- -Na TritonX-100: C(CHs)- CH C(CK 0 —CH—CHOl。-H 四、确定膜蛋白方向的实验程序 (experimental protocal to determine the derection of membrane protein) 1.胰酶消化法〔2〕脂质体的应用 ◆研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质; ◆脂质体中裹入 DNA 可用于基因转移; ◆在临床治疗中,脂质体作为药物或酶等载体 三 膜蛋白(membrane protein) 1.基本类型 〔1〕外在(外周)膜蛋白(extrinsic/peripheral membrane proteins ); 水溶性蛋白,靠离子键或其它弱键与膜内表面的蛋白质分子或脂分子极 性头部非共价结合,易分离。 〔2〕内在(整合)膜蛋白(intrinsic/ integral membrane proteins)。 水不溶性蛋白,形成跨膜螺旋,与膜结合紧密,需用去垢剂使膜崩解后 才可分离。 〔3〕脂质锚定蛋白(lipid-anchored proteins) 通过磷脂或脂肪酸锚定,共价结合 2.内在膜蛋白与膜脂结合的方式 〔1〕膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。 〔2〕跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形 成离子键,或带负电的氨基酸残基通过 Ca2+、Mg2+等阳离子与带负电 的磷脂极性头相互作用。 〔3〕某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子, 插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力,还有少数蛋白与 糖脂共价结合。 3.外在膜蛋白与膜脂结合的方式 4.去垢剂(detergent) 〔1〕去垢剂是一端亲水、另一端疏水的两性小分子,是分离与研究膜蛋白的常 用试剂。 〔2〕离子型去垢剂(SDS)和非离子型去垢剂(Triton X-100) SDS: CH3——(CH2)11——OSO3——Na+ TritonX-100: C(CH3)3——CH2——C(CH2)————O——(CH2)2——O——[CH2——CH2O]n——H 四、确定膜蛋白方向的实验程序 (experimental protocal to determine the derection of membrane protein) 1.胰酶消化法 10
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