第二篇细胞的遗传物质 第一章细胞内核酸的提取 人类基因组计划的完成以及后基因组学研究的不断深入,标志着现代医 学的发展已逐步进入“基因组医学”的时代。疾病分子机制的研究也将为包 括疾病的分子诊断、分子治疗在内容的“分子医学”的发展提供动力。 核酸是遗传信息以及基因表达的物质基础,是重要的生物信息分子,也是 分子生物学研究的主要对象。它与生命的正常活动,如种族遗传、生长等有密 切联系;它与生命的异常活动,如肿瘤的发生、放射损伤以及抗癌、抗病毒药 物的作用机理等也有密切的关系。因此,核酸是现代生命科学体系中重点研究 的课题之一。核酸分为DNA和RNA两大类。核酸的提取是分子生物学实验 技术中基本的操作之 第一节真核细胞基因组DNA的分离与纯化 DNA主要在细胞核内,核外也有少量称为核外基因的线粒体DNA等。真 核细胞的DNA分子比原核生物的DNA分子大得多,并且以核蛋白体形式存 在于细胞中。真核细胞基因组DNA提取的主要步骤包括裂解和纯化两大步骤 裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程,纯化则是去除体系中的其它 成分,如蛋白质、多糖、脂类及其它不需要的核酸(RNA)等生物大分子的 过程 裂解 细胞破碎的手段常为超声波、组织匀浆、液氮破碎以及包埋组织的超薄切 片等方法。为了获得大量完整的DNA,一般采用裂解液等温和的方法破碎细 胞 裂解液一般都含有去污剂(如SDS、 Triton X-100、NP-40、 Tween20等) 和盐(如Tris、EDTA、NaCl等)。去污剂的作用是通过使蛋白质变性,破坏 膜结构及去除与核酸相连接的蛋白质,从而实现核酸游离在裂解体系中。盐的 作用,一方面提供一个合适的裂解环境(如Tri),另一方面可抑制核酸酶在1 第二篇 细胞的遗传物质 第一章 细胞内核酸的提取 人类基因组计划的完成以及后基因组学研究的不断深入，标志着现代医 学的发展已逐步进入“基因组医学”的时代。疾病分子机制的研究也将为包 括疾病的分子诊断、分子治疗在内容的“分子医学”的发展提供动力。 核酸是遗传信息以及基因表达的物质基础，是重要的生物信息分子,也是 分子生物学研究的主要对象。它与生命的正常活动，如种族遗传、生长等有密 切联系；它与生命的异常活动，如肿瘤的发生、放射损伤以及抗癌、抗病毒药 物的作用机理等也有密切的关系。因此，核酸是现代生命科学体系中重点研究 的课题之一。核酸分为 DNA 和 RNA 两大类。核酸的提取是分子生物学实验 技术中基本的操作之一， 第一节 真核细胞基因组 DNA 的分离与纯化 DNA 主要在细胞核内，核外也有少量称为核外基因的线粒体 DNA 等。真 核细胞的 DNA 分子比原核生物的 DNA 分子大得多，并且以核蛋白体形式存 在于细胞中。真核细胞基因组 DNA 提取的主要步骤包括裂解和纯化两大步骤。 裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程，纯化则是去除体系中的其它 成分，如蛋白质、多糖、脂类及其它不需要的核酸（RNA）等生物大分子的 过程。 一、裂解 细胞破碎的手段常为超声波、组织匀浆、液氮破碎以及包埋组织的超薄切 片等方法。为了获得大量完整的 DNA，一般采用裂解液等温和的方法破碎细 胞。 裂解液一般都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐 (如 Tris、EDTA、NaCl 等)。去污剂的作用是通过使蛋白质变性，破坏 膜结构及去除与核酸相连接的蛋白质，从而实现核酸游离在裂解体系中。盐的 作用，一方面提供一个合适的裂解环境 (如 Tris)，另一方面可抑制核酸酶在