人工粘性末端的连接5突出末端 5 AATTC ECoR I 5 GATCC BamH I CTTAA 5 CCTAG 5 Klenow 补平 Klenow 补平 GAATT 5 AATTC GGATC CTTAA 5 TTAAG CCTAG 5 TdT dGTP Tat dcTP GAATTGGGGGG AATTC GATCC GGATCCCCCCC TTAA GGGGGGTTAAG CCCCCCCTAGG CCTAG 退火 T4-DNA ligase BamHI BamH I GAATTGGGGGGGATCC GGATCCCCCCCAATTC CTTAACCCCCCCTAGG CCTAGGGGGGGTTAAG GAATTGGGGGGGATCC GGATCCCCCCCAATTC CTTAACCCCCCCTAG CCTAGGGGGGGTTAAG人工粘性末端的连接 人工粘性末端的连接 5‘突出末端 5' G CCTAG GATCC G 5' G 5' CTTAA 5' 5' 5' AATTC G T4-DNA ligase T4-DNA ligase 5' 5' Klenow Klenow 补平补平 Klenow Klenow 补平补平 5' GGATC CCTAG 5' GATCC CTAG G 5' GAATT CTTAA 5' 5' 5' AATTC TTAA G TdT TdT dGTP dGTP TdT TdT dCTP dCTP GAATTGGGGGG CTTAA AATTC GGGGGGTTAA G GGATCCCCCCC CCTAG GATCC CCCCCCCTAG G GAATTGGGGGGGATCC CTTAACCCCCCCTAG G GGATCCCCCCCAATTC CCTAGGGGGGGTTAA G 5' 5' GAATTGGGGGGGATCC CTTAACCCCCCCTAG G GGATCCCCCCCAATTC CCTAGGGGGGGTTAA G 退火退火 BamH I BamH I EcoR I EcoR I BamH I BamH I BamH I BamH I