第三节氨基酸的分析分离 常用方法有电泳、层析，电泳见蛋白质分房 一、分配层析（掌握） 回顾分配定律：当一种溶质在两种给定的互不相溶的溶剂（两相）系统中溶解（分配） 时，在一定温度下，溶质在两相中的浓度比值为一常数 此常数称为分配系数 分配系数 Kd=CA/CB 浓度比值 有效分配系数 Ken-CA'VA/CB VB KdRy 总量比值 逆流分溶（配） 用分配定律通过分溶（相）把混合溶质分开的方法 例1设X的Kd=1000,Y的Kd1/1000,A溶剂密度小于B 在分液漏斗中，XY混合物溶于AB等量混合液，摇匀静分层，把下层B分流于第二 容器 则第一容器中 X1000份 YI份 第二容器中 X1份 Y1000份 XY基本分离 例2物质ZKd3,64份Z转移4次的分配过程及结果 动化过程见片40 上述过程中， 始终有一相一直留在原器血中(3相入称之为固定相 始终有一相移到+1器皿中(A相)，称之为流动相。 转移n次后第K(≤n)号器皿中某一物质的含量为 n!p(n-k+1)·q(k-1) Tn,k (n-k+1)(k-1)! P是某物质在固定相中的比例 q是某物质在流动相中的比例 把上述过程搞成一个连续的自动过程就是分配层系。 分配层析 用我体周定周定相并作为流动相支持物，流动相向前流动过程中，溶质在两相依分配系 数不断分配、流动，使得分配系数个不同的混合溶质彼此分开的方法。 载体 常用纤维素，淀粉、硅胶等 固定相常用水 通过氢键被载体固定 流动相常用与水不互溶的、与载体无亲和力的有机溶剂 按载体的状态，分柱层析 载体装干玻管中成柱状 薄层层村 玻板成片层 纸层「等 用滤纸作为载体，纤维素预制的薄层 具体操作方法见实验 二、离子交换层析（掌握）