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12.何谓蛋白质变性作用?简述蛋白质复性的机理,并概要说明变性蛋白质 的特点,举例说明与实践的关系 13.试述蛋白质沉淀的类型、方法及其与实践的关系? 14.何谓双缩脲反应?有何用途? 15.简述几种蛋白质相对分子质量测定方法的原理? 16.解释下列名词:蛋白质、肽键、酰胺平面、肽链、末端、构象、疏水相 互作用、 α一螺旋、β一折迭、β-转角、变构蛋白、亚基、辅基、沉降系数S、GSH、 蛋白质系数、无规则卷曲、盐析、分段盐析、透析、超滤、稀有氨基酸、非蛋白 质氨基酸、 Sanger反应、 Edman反应、茚三酮反应。 17.总结蛋白质定量、定性分析的常用方法有那些? 18.分别指出下列酶能否水解与其对应排列的肽,如能,则指出其水解部位。 (1)Phe-Arg-Pro 胰蛋白酶 (2)Phe-Met-Leu 羧肽酶B (3)Ala-Gly-Phe 胰凝乳蛋白酶 (4)Pro-Arg-Met 胰蛋白酶 19.假定有 1mmol的五肽,酸水解生成2mmol谷氨酸, 1 mmol赖氨酸,没有 能够定量回收其它氨基酸。将原来的五肽用胰蛋白酶水解成两个肽段,在pH7.0 进行电泳,一个肽段移向阳极,另一个则移向阴极。用FDNB处理胰蛋白酶水解 的一个肽段,再用酸水解,生成DNP-谷氨酸。用胰凝乳蛋白酶处理原来五肽生 成两个肽段及游离谷氨酸。试从上述实验结果写出该五肽的氨基酸顺序 20.用下列哪种试剂最适合完成以下工作:溴化氰、尿素、β-巯基乙醇、胰 蛋白酶、过甲酸、丹磺酰氯(DNS-Cl)、6mol/L盐酸、茚三酮、苯异硫氰酸(异硫 氰酸苯酯)、胰凝乳蛋白酶 (1)测定一段小肽的氨基酸排列顺序 (2)鉴定小于10克肽的N端氨基酸 (3)使没有二硫键的蛋白质可逆变性。如有二硫键,应加何种试剂? (4)水解由芳香族氨基酸羧基形成的肽键 (5)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽键 (6)水解由碱性氨基酸羧基形成的肽键 1.扼要解释为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。 (1)在低pH时沉淀。 (②)当离子强度从零逐渐增加时,其溶解度开始增加,然后下降,最后出现沉 淀 (3)在一定的离子强度下,达到等电点pH值时,表现出最小的溶解度 (4)加热时沉淀。 (5)加入一种可和水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数,而导致溶解度 的减小。 (6)如果加入一种非极性强的溶剂,使介电常数大大地下降会导致变性 22.0.1mo/L的谷氨酸溶液处于它的等电点 (1)计算主要等电形式的的谷氨酸的近似浓度。 (2)计算完全质于化形式的谷氨酸的近似浓度。 (3)在溶液中甚至浓度小到几乎没有的,共有多少种形式12.何谓蛋白质变性作用?简述蛋白质复性的机理,并概要说明变性蛋白质 的特点,举例说明与实践的关系。 13.试述蛋白质沉淀的类型、方法及其与实践的关系? 14.何谓双缩脲反应?有何用途? 15.简述几种蛋白质相对分子质量测定方法的原理? 16.解释下列名词:蛋白质、肽键、酰胺平面、肽链、末端、构象、疏水相 互作用、 α-螺旋、β-折迭、β-转角、变构蛋白、亚基、辅基、沉降系数 S、GSH、 蛋白质系数、无规则卷曲、盐析、分段盐析、透析、超滤、稀有氨基酸、非蛋白 质氨基酸、Sanger 反应、Edman 反应、茚三酮反应。 17.总结蛋白质定量、定性分析的常用方法有那些? 18.分别指出下列酶能否水解与其对应排列的肽,如能,则指出其水解部位。 肽 酶 (1)Phe-Arg-Pro 胰蛋白酶 (2)Phe-Met-Leu 羧肽酶 B (3)Ala-Gly-Phe 胰凝乳蛋白酶 (4)Pro-Arg-Met 胰蛋白酶 19.假定有 1mmol 的五肽,酸水解生成 2mmol 谷氨酸,1mmol 赖氨酸,没有 能够定量回收其它氨基酸。将原来的五肽用胰蛋白酶水解成两个肽段,在 pH7.0 进行电泳,一个肽段移向阳极,另一个则移向阴极。用 FDNB 处理胰蛋白酶水解 的一个肽段,再用酸水解,生成 DNP-谷氨酸。用胰凝乳蛋白酶处理原来五肽生 成两个肽段及游离谷氨酸。试从上述实验结果写出该五肽的氨基酸顺序。 20.用下列哪种试剂最适合完成以下工作:溴化氰、尿素、β-巯基乙醇、胰 蛋白酶、过甲酸、丹磺酰氯(DNS-Cl)、6mol/L 盐酸、茚三酮、苯异硫氰酸(异硫 氰酸苯酯)、胰凝乳蛋白酶。 (1)测定一段小肽的氨基酸排列顺序 (2)鉴定小于 10-7克肽的 N-端氨基酸 (3)使没有二硫键的蛋白质可逆变性。如有二硫键,应加何种试剂? (4)水解由芳香族氨基酸羧基形成的肽键 (5)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽键 (6)水解由碱性氨基酸羧基形成的肽键 21.扼要解释为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。 (1)在低 pH 时沉淀。 (2)当离子强度从零逐渐增加时,其溶解度开始增加,然后下降,最后出现沉 淀。 (3)在一定的离子强度下,达到等电点 pH 值时,表现出最小的溶解度。 (4)加热时沉淀。 (5)加入一种可和水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数,而导致溶解度 的减小。 (6)如果加入一种非极性强的溶剂,使介电常数大大地下降会导致变性。 22.0.1mo1/L 的谷氨酸溶液处于它的等电点: (1)计算主要等电形式的的谷氨酸的近似浓度。 (2)计算完全质于化形式的谷氨酸的近似浓度。 (3)在溶液中甚至浓度小到几乎没有的,共有多少种形式?
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