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、组织(细胞)标本的制备 (一)细胞标本的取材 1.体细胞取材方法 (1)印片法:主要用于从活组织检査标本和手术切除标本中获取细胞。首 先将标本剖开,最大程度暴露组织病变区,然后将载玻片轻压于病变组织区,吸 附脱落的细胞 (2)穿刺取样涂片法:用细针穿刺从实质性器官(如肝、肾、脾、淋巴结 软组织、骨髓)的病变区吸取病变区的体液,然后进行涂片 (3)体液沉淀涂片法:主要适用于胸水、腹水、尿液、脑脊液等含细胞较 少的标本,先通过离心获取细胞沉淀,经适当稀释后再进行涂片。 2.培养细胞取材方法 (1)细胞爬片法:适合于贴壁生长的培养细胞。将干净(消毒处理)的盖 玻片放置入培养液中,细胞便会自然贴附在其上。 (2)涂片法:适合于悬浮生长的培养细胞。直接取悬浮生长的培养细胞或 通过离心收集细胞,再经适当的洗涤和稀释后进行涂片。 3.组织材料的获取主要通过组织切片技术获得。根据包埋剂的不同可分 为:冰冻切片、石蜡切片、塑料切片、超薄切片、碳腊切片等类型。 (二)细胞和组织的固定 固定的目的是为了更好地将细胞和组织的原有形态结构及成分保留下来,让 蛋白质变性,使内源性消化酶失活。对免疫组化而言,可用的固定剂种类多样, 性能也不尽相同,在使用时应注意考虑不同固定剂对抗原的影响,防止抗原的弥 散以及活性的丢失。 常见的固定剂有醛类(如10%的中性缓冲福尔马林,4%的多聚甲醛等)、 非醛类(如碳化二亚胺、对苯醌等)、丙酮及醇类固定剂。常见的固定方法有浸 入法和灌注法等。 三、免疫荧光细胞化学技术 免疫荧光细胞化学技术是利用抗原与抗体可发生特异性结合的原理,先将已 知的抗原或抗体标记上荧光素,进而再利用这种荧光抗体(或抗原)去检查细胞 或组织内的相应抗原(或抗体)。根据检测目的以及待检物的不同特点,免疫荧二、组织(细胞)标本的制备 (一)细胞标本的取材 1.体细胞取材方法 (1)印片法:主要用于从活组织检查标本和手术切除标本中获取细胞。首 先将标本剖开,最大程度暴露组织病变区,然后将载玻片轻压于病变组织区,吸 附脱落的细胞。 (2)穿刺取样涂片法:用细针穿刺从实质性器官(如肝、肾、脾、淋巴结、 软组织、骨髓)的病变区吸取病变区的体液,然后进行涂片。 (3)体液沉淀涂片法:主要适用于胸水、腹水、尿液、脑脊液等含细胞较 少的标本,先通过离心获取细胞沉淀,经适当稀释后再进行涂片。 2.培养细胞取材方法 (1)细胞爬片法:适合于贴壁生长的培养细胞。将干净(消毒处理)的盖 玻片放置入培养液中,细胞便会自然贴附在其上。 (2)涂片法:适合于悬浮生长的培养细胞。直接取悬浮生长的培养细胞或 通过离心收集细胞,再经适当的洗涤和稀释后进行涂片。 3.组织材料的获取 主要通过组织切片技术获得。根据包埋剂的不同可分 为:冰冻切片、石蜡切片、塑料切片、超薄切片、碳腊切片等类型。 (二)细胞和组织的固定 固定的目的是为了更好地将细胞和组织的原有形态结构及成分保留下来,让 蛋白质变性,使内源性消化酶失活。对免疫组化而言,可用的固定剂种类多样, 性能也不尽相同,在使用时应注意考虑不同固定剂对抗原的影响,防止抗原的弥 散以及活性的丢失。 常见的固定剂有醛类(如 10%的中性缓冲福尔马林,4%的多聚甲醛等)、 非醛类(如碳化二亚胺、对苯醌等)、丙酮及醇类固定剂。常见的固定方法有浸 入法和灌注法等。 三、免疫荧光细胞化学技术 免疫荧光细胞化学技术是利用抗原与抗体可发生特异性结合的原理,先将已 知的抗原或抗体标记上荧光素,进而再利用这种荧光抗体(或抗原)去检查细胞 或组织内的相应抗原(或抗体)。根据检测目的以及待检物的不同特点,免疫荧
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