二、立论依据 (包括项目的研究意义、国内外研究现状分析,并附主要参考文献及出处) 对基础研究,着重结合国际科学发展趋势,论述项目的科学意义 对应用基础研究,着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问题,论 述其应用前景 先天性巨结肠症( Hirschsprung' s disease,HD)是小儿外科领域内的一种常见性疾病 发病率为12000-1/5000对HD临床及基础研究一直是小儿外科研究的热点之一。此疾 的发生是由于多种原因使胚胎期神经嵴细胞在消化道移行受阻,结肠壁肌间神经节细胞缺 如,病变结肠痉挛收缩,肠内容物排出受阻,近端肠管继发性扩张形成巨结肠,影响儿童 健康成长。自发现HD的病因以来,HD的治疗主要依靠手术切除远端无神经节细胞段,手 术方式较多,由于各种术式固有缺陷,目前仍存在各种并发症,影响HD患儿术后恢复 寻求更为有效及安全的针对HD的治疗方法,一直是国内外小儿外科工作者努力的方向 在临床及科研工作中我们注意到细胞疗法( cell therapy)近年来已成为治疗多种疾 新策略,在替代,修复或加强受损的组织或器官的生物学功能方面有巨大作用。细胞 法中应用的靶细胞之一,神经干细胞,目前己成为研究热点。传统的发生生物学认为人 神经细胞一经受损就永远不能再生新的神经元。然而随着神经干细胞的发现,受损神经细 胞不能恢复的观点正在发生变化。神经干细胞是一种终身具有自我更新能力的细胞,其子 细胞能分化产生神经系统的各类细胞,干细胞通过不对称分裂产生一个祖细胞和另一个 细胞,祖细胞具有有限的自我更新能力,并自发分化产生成神经元细胞和成胶质细胞等, 从而生成神经元及神经胶质细胞。已有研究表明神经干细胞具有潜在多向分化能力,能在 定条件下定向分化,具有较强的增殖能力,移植入成体神经组织后易于存活,目前神经 干细胞在损伤神经组织,细胞的修复方面己显示出良好的应用前景21 HD病因为胚胎早期神经嵴细胞移行受阻的结果,以往我们对HD的研究中也发现HD 病变肠段不仅存在神经节细胞异常,神经胶质细胞也表现出异常,进一步支持了HD病因 系胚胎早期神经嵴细胞移行异常的结果。对于这种病变肠段无神经节的异常神经支配可否 通过神经干细胞进行移植修复呢?结论是肯定的, Natara jan等在体外实验中观察到正 常鼠的神经嵴细胞可在体外修复培养中的RETK突变鼠(一种田D动物模型)病变肠段神经 支配,且前瞻性地指出了神经嵴细胞移植可能成为今后先天性巨结肠症的治疗手段 目前的问题是在临床实践中诊断的HD患儿均在出生后,此刻神经嵴细胞分化成熟二、立论依据 （包括项目的研究意义、国内外研究现状分析，并附主要参考文献及出处） 对基础研究，着重结合国际科学发展趋势，论述项目的科学意义； 对应用基础研究，着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问题，论 述其应用前景。 先天性巨结肠症（Hirschsprung’s disease，HD）是小儿外科领域内的一种常见性疾病， 发病率为 1/2000~1/5000。对 HD 临床及基础研究一直是小儿外科研究的热点之一。此疾病 的发生是由于多种原因使胚胎期神经嵴细胞在消化道移行受阻，结肠壁肌间神经节细胞缺 如，病变结肠痉挛收缩，肠内容物排出受阻，近端肠管继发性扩张形成巨结肠，影响儿童 健康成长。自发现 HD 的病因以来，HD 的治疗主要依靠手术切除远端无神经节细胞段，手 术方式较多，由于各种术式固有缺陷，目前仍存在各种并发症，影响 HD 患儿术后恢复［１］。 寻求更为有效及安全的针对 HD 的治疗方法，一直是国内外小儿外科工作者努力的方向。 在临床及科研工作中我们注意到细胞疗法（cell therapy）近年来已成为治疗多种疾病 的新策略，在替代，修复或加强受损的组织或器官的生物学功能方面有巨大作用。细胞疗 法中应用的靶细胞之一，神经干细胞，目前已成为研究热点。传统的发生生物学认为人体 神经细胞一经受损就永远不能再生新的神经元。然而随着神经干细胞的发现，受损神经细 胞不能恢复的观点正在发生变化。神经干细胞是一种终身具有自我更新能力的细胞，其子 细胞能分化产生神经系统的各类细胞，干细胞通过不对称分裂产生一个祖细胞和另一个干 细胞，祖细胞具有有限的自我更新能力，并自发分化产生成神经元细胞和成胶质细胞等， 从而生成神经元及神经胶质细胞。已有研究表明神经干细胞具有潜在多向分化能力，能在 一定条件下定向分化，具有较强的增殖能力，移植入成体神经组织后易于存活，目前神经 干细胞在损伤神经组织，细胞的修复方面已显示出良好的应用前景[2]。 HD 病因为胚胎早期神经嵴细胞移行受阻的结果，以往我们对 HD 的研究中也发现 HD 病变肠段不仅存在神经节细胞异常，神经胶质细胞也表现出异常，进一步支持了 HD 病因 系胚胎早期神经嵴细胞移行异常的结果。对于这种病变肠段无神经节的异常神经支配可否 通过神经干细胞进行移植修复呢？ 结论是肯定的，Natarajan 等在体外实验中观察到正 常鼠的神经嵴细胞可在体外修复培养中的RET.K–突变鼠(一种HD动物模型)病变肠段神经 支配，且前瞻性地指出了神经嵴细胞移植可能成为今后先天性巨结肠症的治疗手段[3] 。 目前的问题是在临床实践中诊断的 HD 患儿均在出生后，此刻神经嵴细胞分化成熟， －3-1－