肟和反应产瓜氨酸的呈色反应测定酶活;乳酸脱氢酶同工酶(SLDH同工酶)用醋酸纤维 薄膜电泳法。 蛋白质的定:血浆总蛋白用双缩脲法:白蛋白用溴甲酚绿法。 尿素氮用二乙酰一肟法 胆固醇用邻苯二甲醛查接暴色法。 t值检验人工感染用感染组与对照组两样本均数差异的显著性涮验公式;白然感染用 样木均数与总体均数差异的感著性测验公式、总体均数采用作者建立的血液正常值。 结 映盱实质细胞损害的血清酶类。 实验选择了反映旰实质细胞损伤铰为敏感的谷丙转氨、异柠檬酸脱氢酶、碱性磷酸 酶、鸟氨酸氨甲酰移换酶和乳酸脱氢酶同工酶等5种酶类·检测结果见表1、?。从表中 显可见谷丙转氨酶、异柠檬酸脱氢酶活性,经人工感染4天后取样检查就有增高趋势.直至 发展期时这两种酶活性增高愈加明显。而碱性磷酸酶活性增高只在发展期病鱼血清中显示, 且增高的幅度小于30金一阿氏单位。鸟氨酸氨甲酰移换酶也显示了在发展明病鱼血清中有变 化,而其变化是酶活性降低。 血清乳酸脱氢酶同工酶(SLDH)的枪测结果是正常草鱼种此酶谱型是5条区带,酶相 对活性顺序是SLDH-1<SLDH-2<SLDH3<SLDH-4<SLDH-5,而病鱼在潜伏期 和发展期的SLDH同工酶的相对活性出现紊乱,并且在部分病鱼的电泳SLDH同工酶谱靠阴 极位置明显多出一条区带,我们称为SLDH-6。病鱼在潜伏期和发展期的SLDH同工酶的 相对活性顺序是SLDH-1>SLDH2>SLDH-3>5LDH-5>5LDH-4>SLDH-6。 二、反映肝实质细胞损害的血浆总蛋白、血清白蛋白、尿素氮和胆固醇 实验检测了血浆总蛋白、血清白蛋白、尿素氮和总胆固醇,结果列于表3。 队表中可见经人工感染病毒后的病鱼,无论是潜伏期和发展期,其含量均显示明显减少 (P值<0001)的病理变化。在自然感染出血病病毒发展期病鱼血清中,血清白蛋白的含量 减少(P值<0.01);血清尿素氮的含量无论在人工感染或自然感染病鱼中均呈现明显的病 理变化,其含量减少(P值<0001)在潜伏期和发展期都明显可见;血清胆固醇浓度减少 (P值<0.001)仅只在自然感染发展期病鱼体内发生。 讨论 肝脏是物质代谢最重要的器官,对于肌体内的蛋白质、脂肪、酶等合成、分解和贮存具 有非常重要的作用。当草鱼出血病病毒侵犯鱼体时,肝脏的结构和功能必将受到不同程度的 影响,临床上可应用各种生化检查方法来测知其受损的情况作辅助诊断。 芦全章等(1985)对此病曾作了系统的组织病理研究,通过形态病变的观察,说明了病 毒侵袭鱼体后使肝细胞肿大变化,随着病情的进展,循环及代谢障碍可导致组织坏死;作者 1987)对患出血病病鱼进行了系统的血液病理研究,已从检测的血液参数中,对肝、肾功 能失调的机理有所闸明。本研究中选择检测的血液指标是为了推测病毒侵袭鱼体后,造成肝 细胞损伤、坏死,导致肝功能代谢失调的机琿。肟和反应产物_瓜氨酸舸 色反应测定酶活力} 薄 膜 电泳 法 蛋 白 磺 的弼 定： 血 浆 总 蛋 白甩 双 缩 脉 法 ， 乳酸脱 氧酶同 1=酶(sIDltMI酶 )用醋酸纤维 自蛋白用澡甲酚绿 法。 尿 素 氨 用 二 乙酰 一肟 法。 ’ 胆 固 醇用 邻 苯 二 甲 醛 耋接 色 法 t值检 验 人工感染 用感染组与对照组两样本均数差异 的 显著性 测验 公 式 J 自然感染用 样本均数与总体均数差异的砬著性潮验公式，总体均数采用作 者 建 立的l吡液正常值。 结 果 一 ， 反 映 肝 实 质细 胞 损 害 的 血 清 酶 类 。 实验选择 了反映肝实 质细胞损伤较 为敏 感的 谷丙转氨酶、异柠 檬酸脱 氢 酶 ，碱性磷酸 酶 鸟氨酸氨甲酰 移换酶和乳酸脱 氢酶 同工酶 等 5种酶类 ，检 删结果见表 1、 2。从 表中明 显可见 谷丙转 氨酶 、异柠檬 酸脱 氢酶 活性，经人工感染 4天 后取样检查 就有 增高趋势 ，直至 发 展期时这两种酶 活性 增 高愈 加明显。而碱性磷酸酶活性 增 高只在发展期病鱼 血清中显示 ， 且增 高的幅度小于3O金一呵 氏单 位。 鸟氨 酸氨甲酰 移换酶也显示 了在发 展期病鱼皿清 中有 变 化 ，而其 变化是酶 活性降低 。 血 清乳 酸 脱 氧 酶 同 工 酶 (SLDH )的榆 测 结 果 是 正 常草 鱼 种 此酶 谱 型 是 5条 区带 。酶 相 对 活性 顺 序是 SLDH一1< SLDH一2<SLDH-3<SLDH一4< SLDH-5，而 病 鱼 在 潜 伏 期 和发展期的SLDH同工酶 的相 对活性 出现紊 乱，并 且在部分病 鱼的 电泳SLDH同工酶谱 靠阴 极 位置 明显 多 出一条区带，我们称 为SLDH一6。病鱼在潜伏期和 发展期 的 SLDH 同工酶 的 相 对 活 性 顺 序 是 SLDH—l> SLDH一2> SLDH一3> SLDH一5> SLDH～4> SLDH一6。 二、反映肝实质细胞损害 的 衄浆总噩 白、 血清 白蛋白，尿素氮和胆 固醇 实验检 测 了血浆总虽 白、 血清 自蛋 白、尿素氮 和总胆周醇，结果列于表 3。 从表中可见 经 ^、工感染病毒后 的病 鱼，无论是潜 伏期和发 展期 ，其含量 均显 示明显减少 (P值 <9．001)的病理变化。在 自然感染 出l血病病毒发 展期 病鱼血清 中，血清 白蛋 白的含 量 减少 (P值 <0．01)}血清 尿素氨 的含 量无论猩 人工感染或 自然感染病 鱼中均 呈现明显的病 弹 变化，其含 量减少 (P值 <0．001)在 潜 伏 朝和发展 期都 明显 可见 } 衄清胆 固醇浓度减 少 (P值 <0．00])仅只在 自然 感染 发展期病 鱼休 内发 生。 讨 论 肝脏是物质代谢摄重 要的器官，对于肌体内 的蛋 白质、脂肪，酶等合成，分解和 贮存 具 有非常重要 的作用 。 当草 鱼 出血病病毒侵犯鱼体时，肝 脏的结构和功能必将受 到不 同程度 的 影响，临床上可应用各种生化检查 方法来 铡 知其受损 的情 况作辅助诊断。 芦 全章等 (1985)对此病 曾作 了系统的组织病 理研 究，通 过形态病变的观察，说 明了病 毒 侵 袭 鱼 体 后 使 肝 细 胞 肿 大 变 化， 随着 病情 的 进 展 ， 循 环 及 代 谢 障 碍 可 导 致 组 织 坏 死 ， 作 者 (1987)对患 出血病 病鱼进行 了系统的 液病 理研究 ， 已从检 测的血液参数 中， 对肝、 肾功 能失词的机理有所 闸明。本研究 中选 择检 测的血液指标是为了推测病 毒侵袭鱼体后。造成肝 细胞损伤、坏死，导致肝 功能代谢 失调聃梳 理。 ‘ 2 维普资讯 http://www.cqvip.com