在人和动物周血中，存在形态不同功能各的多种血细。它们是红细陶、拉细胞、单核细跑、热巴细及血小板。其生命亦各不 同，如人红细胞生命周期约120天，粒细约20一62小时，血小板约为510天，单核细存在于 50天，存在于周国血者可超过20 胞的动态平衡异常。 可使血 和质量发生改变，将会引店 ,即造血干细 第一节造血干细胞的特性 一造血干细胞的起源 造血干细胞(hemopoietic stemcll,HSC)是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，它不是组织固定细胞，可存在于造血组织及血液 中，造血干细抱在人胚胎2周时可出现于卵黄囊，第4周开始转移至胚肝，好娠3个月后，骨髓开始造血，出生后骨髓成为干细胞的主要来源。 在选血组织中，所占比例甚少，如在小鼠母髓中105核细胞中的有10个，在脚中103有核细跑中只有0.2个， 二、造血干细胞的形态 干细胞是一种嗜碱性独核细胞，其大小约为8仙m,呈图形，胞核为圈形或肾形，胞核校大，具有2个核仁，染色质细质而分散，抱浆呈浅蓝 色不带颗粒，在形态上与小淋巴细胞极其相似，但淋巴细胞体积较小，染色质浓染，核仁不明显且有细跑器。因此很难用形态学识别干细胞， 井与其它独核细抱相区别。 造血干细陶可包括三级分化水平，即多能干细跑(pleuripotent stem cell),定向干细跑(Committed stem cell)及其成熟的子代细 关于对造血干细胞的功能分析，长期以来仅限于对小鼠干细胞的研究，而对人干细胞的存在只是来自间接证据，因为不能在人体内进行如 鼠体内的功能分析法，0年代以来，由于建立了新的体外细胞培养技术，大大促进了对人干细胞的直接研究 三、造血干细胞的表面标志 究由清血组民中造血干国脂在形态学方面无法与黄它单喷区到。而藏量少，这为造血干的分调院化井对汽功能分行和分化@ 大困难 术的进 ,流式细抱仪(CS)的应用，以及对小和人选血干细胞表面标志的研究 取得了很大进展，为选 了条件 (heae多rmg8 lutinin,.WGA)Visseer等发现小鼠骨随中造血干细胞对WGA有高亲和性. 利用这 特性，应用FAC 即可自骨髓中Lm-WGA+细泡群中分离造血干细胞也获得良好结 也有学者发现正常小鼠骨随细胞中，也能表达低密度Ty1抗原(Ty山， 上述标志组合，即自骨髓Thy-1,Lin,WGA+细胞群 中，分离造血干细组 可用于对透血细胞的功能分析 干细胞抗原(stemcellantigen-1,Sca)有学者制备一种抗原前T细胞杂交的单克隆抗体，用这种单抗检出的抗原分子称为干细抗 原-1(Sca-l） ,其后有人自骨中Thy-1o、Ln-,Sca1+细胞群中，可分离纯人造血干细 基因(ck)最近证明造血干细跑与ckt基因密切相关.。Ck可编码一种穿膜酪氨酸激砖受体分子。 应用单克降抗体证明此分子 可存在于造血干细购膜上，其后证明它的配体分子是造血干细孢因子((stem cell facor,SCF)·它是信号传导分子，对造血干细胞的分化具有 重要作用。目前，小多能干细跑表面分子标志可视为Ty1Io、WGA+、c-ki+,Lin cki分子可高频率表达于多能干细抱表面，但骨髓中cki+细抱可分化为各种血细胞，而陶腺中ck细胞可分化为淋巴细，不能分化为随 系细胞，所以胸腺内ck+细泡，可能是淋巴样干细胞（表71）， 表7-1鞠腺及骨髓中ckt+细胞分化机制 4.CD34对人体适血干细抱表面标志的研究，是用单克隆抗体CD34证明的。CD34单克隆抗体检测的抗原即为CD34分子.自人骨髓细胞 中应用FACS可分离纯化CD34+细泡群，如与造血因子共同体外培养可获得含有各种血细胞的混合集落，所以CD34+细跑为骨髓中造血干细 跑，CD34抗原可视为骨髓造血细孢标志之一， 第二节造血干细胞的分化 一、多能干细胞 多能干细孢是由T和MeCulloch等在60年代初，应用牌集落形成细孢定量法，首先在小息体内证明的.他们给经射线照射的小鼠输入同系 鼠骨髓细胞，在10一14天后在脾内形成可见的 节，它 是由单一 骨酷细胞发育分化 成的细跑集幕，称之为脾集落形成单位(在人和动物周围血中，存在形态不同、功能各异的多种血细胞。它们是红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞及血小板。其生命亦各不 同，如人红细胞生命周期约120天，粒细胞约20～62小时，血小板约为5～10天，单核细胞存在于骨髓者约为50天，存在于周围血者可超过200 天，而淋巴细胞可存活数月至数年。这些血细胞可不断死亡与新生以维持血细胞的动态平衡异常，可使血细胞数量和质量发生改变，将会引起 名种血液病或免疫性疾病。各种血细胞都起源于共同的祖先细胞，即造血干细胞。 第一节 造血干细胞的特性 一、造血干细胞的起源 造血干细胞（hemopoietic stem cell,HSC）是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，它不是组织固定细胞，可存在于造血组织及血液 中。造血干细胞在人胚胎2周时可出现于卵黄囊，第4周开始转移至胚肝，妊娠5个月后，骨髓开始造血，出生后骨髓成为干细胞的主要来源。 在造血组织中，所占比例甚少，如在小鼠骨髓中105核细胞中的有10个，在脾中105有核细胞中只有0.2个。 二、造血干细胞的形态 干细胞是一种嗜碱性独核细胞，其大小约为8μm，呈圆形，胞核为圆形或肾形，胞核较大，具有2个核仁，染色质细质而分散，胞浆呈浅蓝 色不带颗粒，在形态上与小淋巴细胞极其相似，但淋巴细胞体积较小，染色质浓染，核仁不明显且有细胞器。因此很难用形态学识别干细胞， 并与其它独核细胞相区别。 造血干细胞可包括三级分化水平，即多能干细胞（pleuripotent stem cell），定向干细胞（Committed stem cell）及其成熟的子代细 胞。 关于对造血干细胞的功能分析，长期以来仅限于对小鼠干细胞的研究，而对人干细胞的存在只是来自间接证据，因为不能在人体内进行如 鼠体内的功能分析法。70年代以来，由于建立了新的体外细胞培养技术，大大促进了对人干细胞的直接研究。 三、造血干细胞的表面标志 由于造血组织中造血干细胞在形态学方面无法与其它单核细胞区别，而且数量极少，这为造血干细胞的分离纯化并对其功能分析和分化的 研究造成极大困难。 近年来由于单克隆抗体技术的进步，流式细胞仪（FACS）的应用，以及对小鼠和人造血干细胞表面标志的研究，取得了很大进展，为造血 细胞的分离纯化及鉴定创造了条件。 1．Thy-1与丝裂原（wheat germ agglutinin,WGA）Visseer等发现小鼠骨髓中造血干细胞对WGA有高亲和性。利用这一特性，应用FACS 自骨髓中分离造血干细胞应及核系Mac-1等谱系抗原与WGA反应性相结合，即可自骨髓中Lin-/WGA+细胞群中分离造血干细胞，也获得良好结 果。 也有学者发现正常小鼠骨髓细胞中，也能表达低密度Thy-1抗原（Thy-11。）。如与上述标志组合，即自骨髓Thy-11。Lin-,WGA+细胞群 中，分离造血干细胞，可用于对造血细胞的功能分析。 2．干细胞抗原（stemcellantigen-1,Sca-1） 有学者制备一种抗原前T细胞杂交瘤的单克隆抗体，用这种单抗检出的抗原分子称为干细胞抗 原-1（Sca-1）。其后有人自骨髓中Thy-1Io、Lin-、Sca-1+细胞群中，可分离纯人造血干细胞。 3．原癌基因（c-kit） 最近证明造血干细胞与c-kit基因密切相关。C-kit可编码一种穿膜酪氨酸激酶受体分子。应用单克隆抗体证明此分子 可存在于造血干细胞膜上，其后证明它的配体分子是造血干细胞因子（stem cell factor,SCF）。它是信号传导分子，对造血干细胞的分化具有 重要作用。目前，小鼠多能干细胞表面分子标志可视为Thy-1Io、WGA+、c-kit+、Lin-。 c-kit分子可高频率表达于多能干细胞表面,但骨髓中c-kit+细胞可分化为各种血细胞，而胸腺中c-kit细胞可分化为淋巴细胞，不能分化为髓 系细胞，所以胸腺内c-kit+细胞，可能是淋巴样干细胞（表7-1）。 表7-1 胸腺及骨髓中c-kit+细胞分化机制 胸腺c-kit 骨髓c-kit 粒细胞系 － + 单核细胞系 － + 红细胞系 － + T细胞 + + B细胞 + + 4．CD34 对人体造血干细胞表面标志的研究，是用单克隆抗体CD34证明的。CD34单克隆抗体检测的抗原即为CD34分子。自人骨髓细胞 中应用FACS可分离纯化CD34+细胞群，如与造血因子共同体外培养可获得含有各种血细胞的混合集落，所以CD34+细胞为骨髓中造血干细 胞，CD34抗原可视为骨髓造血细胞标志之一。 第二节 造血干细胞的分化 一、多能干细胞 多能干细胞是由Till和McCulloch等在60年代初，应用脾集落形成细胞定量法，首先在小鼠体内证明的。他们给经射线照射的小鼠输入同系 鼠骨髓细胞，在10～14天后在脾内形成可见的结节，它是由单一骨髓细胞发育分化而成的细胞集落，称之为脾集落形成单位（colony forming