unit-speen,CFU-S),集落数与输入的细胞数成正比，它可分化发育为红细胞、粒细胞及巨核细抱。CFU-S长期以来用体内集落法进行检测， 在70年代后Johnson和etcalf等应用鼠胎肝细抱体外培养法，证明具有CFUS性质的干细抱可在体外培养成功，这是在研究干细胞方法学 上的重大改进. 其后，Haral等用小鼠骨菌细胞在甲基纤维素中加入红细陶生成素(erythropon,EPO)及脾细胞培养上清，进行体外培养，可形成含有 红细胞.巨核细胞以及巨磁细胞的集落，称为混合集幕形成单位(CFU-Mix)·其后，小林登等在8O年代用人骨髓细跑亦报告CFU-Mx培养成 功。即由多能干细胞可进一步分化为定向髓系多能干细鸭及淋巴系干细胞。淋巴系干细胞是T和B细胞的共同相先细胞，但目前尚不能用脾集落 实验证明其存在， 二、单能干细胞 单能干细胞是一类具有向特定细胞系分化能力的干细胞，也称为相细弛(pr0 genitor),如进行体内移植不能形成脾集落，但在一定造血因 子的存在下，可在体外培养并形成细胞集落，称为代表外培养集落，称为体外培养集落形成单位(colony forming unit-culture,CFUC),因此 它与多能干细胞不同，它可包括分化为红细胞的红系干细胞，可分化为粒细胞和单核细胞的粒、单核细胞干细胞系及可分化为血小板的巨核干 细陶系 1.红系干细胞应用骨髓细跑加甲基纤维素在大量EPO存在下，进行体外培养可产生大型红细跑集落，可含有1000个以上的细胞，形成如 爆发火花样的售落，称此干细胞为爆式红细胞集落形成细跑(rs it-erythoid,BFU-E),如用小剂量EPO则产生小型集落，由8-50个细胞 组成，称此干细胞为红细孢系集落形成细胞(colony forming unit-.E,CFU-E)BFU-E是更早期的红系干细胞，而CFU-E则为较晚期的红系干细 胞 2。粒细胞单核细胞系干细胞此系细跑在功能上与BFUE或CFUE属同级干细胞。应用软琼脂法将骨髓细跑进行体外培养，在集落利激因 子(CFS)存在下，可产生粒细跑和单核细胞集落，称此集落形成细胞为体外培养集落形成细胞(colony formingunti,culture,.CFU.C)将 CFU.C进行体内移植不能产生牌集落，所以CFU.D不有CFU.S的特性，仅具有前驱细跑和前单核细跑的特征. 3.巨核干细胞系亦称巨核细胞集落形成细胞(colonyformin 0Cvte,CFU一M,Metcalf及其分泌的细胞因子和细胞外基质 (extra-cellular matrix,ECM)组成，因此对造血干细孢发育分化过程的体外研究，有很大同限性，它不一定能真实反映体内情况，分析实验结 果时，必须注意这种局限性。目前仍有很多关于造血干细胞发育分化的问题有待阐明， 表72血细跑的分化与成熟 多能定干纽 的定向干组 成子代细的 红细 髓系干细胞 跑/单核细胞 多能干细韵 淋巴系干细胞 前驱T细胞 T细跑 十@ 一@t a 图71造血干细狗分化与造血因子 第三节造血干细胞与淋巴细胞的发生 直到60年代W等建立了放射诱导染色体标记技术 unit-spleen,CFU-S）。集落数与输入的细胞数成正比，它可分化发育为红细胞、粒细胞及巨核细胞。CFU-S长期以来用体内集落法进行检测。 在70年代后Johnson和Metcalf等应用鼠胎肝细胞体外培养法，证明具有CFU-S性质的干细胞可在体外培养成功，这是在研究干细胞方法学 上的重大改进。 其后，Haral等用小鼠骨髓细胞在甲基纤维素中加入红细胞生成素（erythropoietin,EPO）及脾细胞培养上清，进行体外培养，可形成含有 红细胞、巨核细胞以及巨噬细胞的集落，称为混合集落形成单位（CFU-Mix）。其后，小林登等在80年代用人骨髓细胞亦报告CFU-Mix培养成 功。即由多能干细胞可进一步分化为定向髓系多能干细胞及淋巴系干细胞。淋巴系干细胞是T和B细胞的共同祖先细胞，但目前尚不能用脾集落 实验证明其存在。 二、单能干细胞 单能干细胞是一类具有向特定细胞系分化能力的干细胞，也称为祖细胞（progenitor）。如进行体内移植不能形成脾集落，但在一定造血因 子的存在下，可在体外培养并形成细胞集落，称为代表外培养集落，称为体外培养集落形成单位（colony forming unit-culture,CFU-C），因此 它与多能干细胞不同，它可包括分化为红细胞的红系干细胞，可分化为粒细胞和单核细胞的粒、单核细胞干细胞系及可分化为血小板的巨核干 细胞系。 1．红系干细胞应用骨髓细胞加甲基纤维素在大量EPO存在下，进行体外培养可产生大型红细胞集落，可含有1000个以上的细胞，形成如 爆发火花样的集落，称此干细胞为爆式红细胞集落形成细胞（burstunit-erythoid ,BFU-E）。如用小剂量EPO则产生小型集落，由8～50个细胞 组成，称此干细胞为红细胞系集落形成细胞（colony forming unit-E,CFU-E）BFU-E是更早期的红系干细胞，而CFU-E则为较晚期的红系干细 胞。 2．粒细胞-单核细胞系干细胞 此系细胞在功能上与BFU-E或CFU-E属同级干细胞。应用软琼脂法将骨髓细胞进行体外培养，在集落刺激因 子（CFS）存在下，可产生粒细胞和单核细胞集落，称此集落形成细胞为体外培养集落形成细胞（colonyformingunti-culture,CFU-C）。将 CFU-C进行体内移植不能产生脾集落，所以CFU-D不具有CFU-S的特性，仅具有前驱细胞和前驱单核细胞的特征。 3．巨核干细胞系亦称巨核细胞集落形成细胞（colonyforming unti-megakaryocyte,CFU-M），Metcalf及其分泌的细胞因子和细胞外基质 （extra-cellular matrix,ECM）组成，因此对造血干细胞发育分化过程的体外研究，有很大局限性，它不一定能真实反映体内情况，分析实验结 果时，必须注意这种局限性。目前仍有很多关于造血干细胞发育分化的问题有待阐明。 表7-2 血细胞的分化与成熟 多能干细胞 多能定向干细胞 单能定向干细胞 成熟子代细胞 髓系干细胞 红系干细胞 粒、单核系干细胞 巨核干细胞 红细胞 粒细胞/单核细胞 血小板 淋巴系干细胞 前驱B细胞 前驱T细胞 B细胞 T细胞 图7－1 造血干细胞分化与造血因子 第三节 造血干细胞与淋巴细胞的发生 由于用脾集落法未能证明淋巴细胞的发生，所以造血干细胞与淋巴细胞在发生学的关系，直到60年代Wu等建立了放射诱导染色体标记技术 后才逐步得到阐明