556 水产学报 外PRL还能活化吞噬细胞的活力;Yada等报道了PRL格的鱼体21。但值得注意的是,免疫刺激剂的效力与给 或GH在调节gM含量中也起重要作用,他们还发现PRL药途径有关,如腹腔注射和口服醋酸维生素A对金鲷免 和GH能阻止由氢化可的松引起的免疫抑制,恢复鱼类特疫系统的影响不同,口服可以提高鱼体的免疫应答,而腹 异免疫功能。在激素中,前阿黑皮素的N端肽链(N腔注射则对鱼体有毒性。免疫增强剂的使用时机对鱼 terminal peptides of proopiomelanocortin,NPp是由前阿黑皮体的免疫效果也很关键,由于免疫增强剂可使因压抑而 素经翻译后加工而成的,在体外和体内实验中NPP都能导致的免疫抑制恢复,所以为了减少因发病而造成的损 增强虹鳟和鲤巨噬细胞的吞噬活力,增加超氧阴离子的失,免疫刺激剂一般应在鱼体发病前使用,但是有些免疫 产量N。另外, Watanaki等还报道了β.内啡呔能增增强剂如Be的有效给药时机却比较特殊,表现为在鱼体 加虹鳟白细胞的吞噬作用;Kele等则发现用含有折仑感染后再注射,则免疫抵抗力有所增强,而在感染前或感 诺( verano)激素的饲料饲喂虹鳟后,能显著增强非特异性染同时使用,反而没有保护作用。此外,口服使用免疫 免疫活力。 增强剂虽然是有效的方法,然而长期服用的影响仍不清 细胞因子细胞因子是一类具有特定生物学功能的楚,有研究显示长期口服使用免疫增强剂,反而会降低免 多肽或糖蛋白,近年来对鱼类细胞因子的研究己取得较疫应答反应,这可能是鱼体中存在一种对免疫刺激剂的 BL-2-8JHN、INF、NKF、TGF等已先后被鉴定和要研究每一种免疫增强剂的最有效免疫时期M。同样, 克隆,在这些细胞因子中,已有部分因子被证实是有效的免疫增强剂的效果并不都依赖于其剂量,有些免疫增强 免疫增强剂,可用于病害的免疫防治,如 Kwang等报道了剂在高剂量条件下,不仅不会增强其免疫效果,反而还会 鱼类Ⅱ-1B可在鲤和黑鲈( Dicentrarchus labrax)中作为免疫抑制免疫反应9。另一方面,对免疫增强剂的副作用还 佐剂,黑鲈幼鱼腹腔注射鳗弧菌血清1型、2型疫苗和黑有待深入研究,有实验显示,当鱼体产卵时,免疫系统会 鲈Ⅱ-1B后,能增加特异性抗弧菌抗体的产量,增强血清被性激素所抑制,尽管使用免疫增强剂可以使受性激素 抗体应答围,1。 Peddie等报道了1B在体外能引起抑制的免疫系统恢复过来,但它们可能会因此而扰乱鱼 虹鳟头肾白细胞的迁移。作者实验室在研究草鱼干扰素体的性成熟和其它与产卵有关的基本功能 的功能时发现,鱼类干扰素不仅具有抗病毒活性,而且还 目前,对鱼类疾病的控制主要有3种方法,即化学疗 具有增强巨噬细胞杀菌活性,调节淋巴细胞增殖分化等法疫苗接种和使用免疫增强剂。化学药物治疗虽是主 功能,说明其可作为一种免疫增强剂而得到应用。 要的鱼病防治方法,但化学药剂和抗生素的大量使用往 以预示,随着鱼类免疫细胞因子的相继发现和研究的不往会导致药物残留和耐药性的产生,污染水环境,对人们 断深入,它们必将为鱼类病害防治开辟新的途径,发挥越的健康造成潜在威胁。疫苗虽然可以成为控制鱼类疾病 来越重要的作用。 最直接有效的方法,但是目前疫苗的开发和广泛应用也 乳铁蛋白乳铁蛋白具有很多重要的生物学功能,存在一定的困难,而且由于免疫反应具有特异性,一种疫 如抗菌活性铁元素吸收的调控、巨噬细胞的生长促进作苗只能特异性地预防相应的某种疾病所以实际作用也 用,也有报道认为它能调节巨噬细胞、中性粒细胞的超氧非常有限。免疫增强剂则能弥补化学治疗法和疫苗法的 阴离子活性,如 Sakai等报道了虹鳟口服牛乳铁蛋白后 不足,虽然免疫增强剂也存在一些问题,但仍被认为是 能增加巨噬细胞超氧阴离子的产量,大大增强对鳗弧菌种比化学疗法更安全、比疫苗法有更广泛效力的防治方 的抵抗力,对链球菌属的某些种的抵抗力也有增加181。 法。如果将疫苗和免疫增强剂联合使用,将能增加疫苗 Kakura等发现真鲷口服牛乳铁蛋白后,能增加血液中的效力。目前,通过多来源、多途径的方式开发研制低 和淋巴细胞的数量,并能提高自身粘液的分泌,增 毒、高效、速效、长效的新型免疫增强剂已成为鱼类疾病 强对刺激隐核虫(Crypα canon means)的抵抗力 防治研究的主要趋势,而随着人们对鱼类免疫机制的更 深入全面的研究,鱼类免疫增强剂将会成为控制鱼类疾 3鱼类免疫增强剂的应用与展望 病,提高鱼体免疫力的极为有效的途径 疫增强剂在鱼体中的应用有注射法浸泡法和口 服法,在生产中以口服法最实用。虽然注射法效果较明 参考文献 显,但劳动强度大,耗时长,对鱼体会造成严重的应激刺 1]聂品.鱼类非特异性免疫研究新进展口]水产学报 激,幼鱼常不宜使用这种方法;浸泡法对鱼体所造成的应 1997,21(1):69-73 cytotoxIc 激性刺激较小,而且可同时处理多个鱼体,但在浸泡过程 cells a minrreview[J]. Dev Comp Immunol 26:141 中免疫刺激物是通过鳃和其他器官进入体内的,所以吸 收量较少,作用时间较短;口服法则不仅可以使鱼体所受[3] Mulero v, Esteban MA, Meseguer J,adl. Dietary intake ot 到的应激性刺激减少到最低程度,而且还适用于各种规 levamisole enhances the immune response and disease resistance od外 PRL 还能活化吞噬细胞的活力; Yada 等[76 ]报道了 PRL 或 GH 在调节 IgM 含量中也起重要作用 ,他们还发现 PRL 和 GH 能阻止由氢化可的松引起的免疫抑制 ,恢复鱼类特 异免疫功能[77 ] 。在激素中 ,前阿黑皮素的 N 端肽链 (N2 terminal peptides of proopiomelanocortin ,NPP) 是由前阿黑皮 素经翻译后加工而成的 ,在体外和体内实验中 , NPP 都能 增强虹鳟和鲤巨噬细胞的吞噬活力 ,增加超氧阴离子的 产量[78 ] 。另外 , Watanaki 等[79 ]还报道了β- 内啡呔能增 加虹鳟白细胞的吞噬作用; Kele 等[80 ]则发现用含有折仑 诺(zeranol) 激素的饲料饲喂虹鳟后 ,能显著增强非特异性 免疫活力。 细胞因子 细胞因子是一类具有特定生物学功能的 多肽或糖蛋白 ,近年来对鱼类细胞因子的研究已取得较 大进展 ,特别是一批免疫相关的细胞因子及其基因如 IL - 1β、IL22、IL28、IFN、TNF、N KEF、TGF 等已先后被鉴定和 克隆 ,在这些细胞因子中 ,已有部分因子被证实是有效的 免疫增强剂 ,可用于病害的免疫防治 ,如 Kwang 等报道了 鱼类 IL21β可在鲤和黑鲈( Dicentrarchus labrax) 中作为免疫 佐剂 ,黑鲈幼鱼腹腔注射鳗弧菌血清 1 型、2 型疫苗和黑 鲈 IL21β后 ,能增加特异性抗弧菌抗体的产量 ,增强血清 抗体应答[81 ,82 ] 。Peddie 等[83 ]报道了 IL21β在体外能引起 虹鳟头肾白细胞的迁移。作者实验室在研究草鱼干扰素 的功能时发现 ,鱼类干扰素不仅具有抗病毒活性 ,而且还 具有增强巨噬细胞杀菌活性 ,调节淋巴细胞增殖分化等 功能 ,说明其可作为一种免疫增强剂而得到应用[84 ] 。可 以预示 ,随着鱼类免疫细胞因子的相继发现和研究的不 断深入 ,它们必将为鱼类病害防治开辟新的途径 ,发挥越 来越重要的作用。 乳铁蛋白 乳铁蛋白具有很多重要的生物学功能 , 如抗菌活性、铁元素吸收的调控、巨噬细胞的生长促进作 用 ,也有报道认为它能调节巨噬细胞、中性粒细胞的超氧 阴离子活性 ,如 Sakai 等报道了虹鳟口服牛乳铁蛋白后 , 能增加巨噬细胞超氧阴离子的产量 ,大大增强对鳗弧菌 的抵抗力 ,对链球菌属的某些种的抵抗力也有增加[85 ] 。 Kakura 等[86 ]发现真鲷口服牛乳铁蛋白后 ,能增加血液中 粒细胞和淋巴细胞的数量 ,并能提高自身粘液的分泌 ,增 强对刺激隐核虫( Cryptocaryon irritans) 的抵抗力。 3 鱼类免疫增强剂的应用与展望 免疫增强剂在鱼体中的应用有注射法、浸泡法和口 服法 ,在生产中以口服法最实用。虽然注射法效果较明 显 ,但劳动强度大 ,耗时长 ,对鱼体会造成严重的应激刺 激 ,幼鱼常不宜使用这种方法;浸泡法对鱼体所造成的应 激性刺激较小 ,而且可同时处理多个鱼体 ,但在浸泡过程 中免疫刺激物是通过鳃和其他器官进入体内的 ,所以吸 收量较少 ,作用时间较短;口服法则不仅可以使鱼体所受 到的应激性刺激减少到最低程度 ,而且还适用于各种规 格的鱼体[22 ] 。但值得注意的是 ,免疫刺激剂的效力与给 药途径有关 ,如腹腔注射和口服醋酸维生素 A 对金鲷免 疫系统的影响不同 ,口服可以提高鱼体的免疫应答 ,而腹 腔注射则对鱼体有毒性[70 ] 。免疫增强剂的使用时机对鱼 体的免疫效果也很关键 ,由于免疫增强剂可使因压抑而 导致的免疫抑制恢复 ,所以为了减少因发病而造成的损 失 ,免疫刺激剂一般应在鱼体发病前使用 ,但是有些免疫 增强剂如 Ete 的有效给药时机却比较特殊 ,表现为在鱼体 感染后再注射 ,则免疫抵抗力有所增强 ,而在感染前或感 染同时使用 ,反而没有保护作用[87 ] 。此外 ,口服使用免疫 增强剂虽然是有效的方法 ,然而长期服用的影响仍不清 楚 ,有研究显示长期口服使用免疫增强剂 ,反而会降低免 疫应答反应 ,这可能是鱼体中存在一种对免疫刺激剂的 负反馈系统 ,使得免疫水平回到初始的状态。所以有必 要研究每一种免疫增强剂的最有效免疫时期[88 ] 。同样 , 免疫增强剂的效果并不都依赖于其剂量 ,有些免疫增强 剂在高剂量条件下 ,不仅不会增强其免疫效果 ,反而还会 抑制免疫反应[19 ] 。另一方面 ,对免疫增强剂的副作用还 有待深入研究 ,有实验显示 ,当鱼体产卵时 ,免疫系统会 被性激素所抑制 ,尽管使用免疫增强剂可以使受性激素 抑制的免疫系统恢复过来 ,但它们可能会因此而扰乱鱼 体的性成熟和其它与产卵有关的基本功能[89 ] 。 目前 ,对鱼类疾病的控制主要有 3 种方法 ,即化学疗 法、疫苗接种和使用免疫增强剂。化学药物治疗虽是主 要的鱼病防治方法 ,但化学药剂和抗生素的大量使用往 往会导致药物残留和耐药性的产生 ,污染水环境 ,对人们 的健康造成潜在威胁。疫苗虽然可以成为控制鱼类疾病 最直接有效的方法 ,但是目前疫苗的开发和广泛应用也 存在一定的困难 ,而且由于免疫反应具有特异性 ,一种疫 苗只能特异性地预防相应的某种疾病 ,所以实际作用也 非常有限。免疫增强剂则能弥补化学治疗法和疫苗法的 不足 ,虽然免疫增强剂也存在一些问题 ,但仍被认为是一 种比化学疗法更安全、比疫苗法有更广泛效力的防治方 法。如果将疫苗和免疫增强剂联合使用 ,将能增加疫苗 的效力。目前 , 通过多来源、多途径的方式开发研制低 毒、高效、速效、长效的新型免疫增强剂已成为鱼类疾病 防治研究的主要趋势 ,而随着人们对鱼类免疫机制的更 深入全面的研究 ,鱼类免疫增强剂将会成为控制鱼类疾 病 ,提高鱼体免疫力的极为有效的途径。 参考文献 : [1 ] 聂 品. 鱼类非特异性免疫研究新进展[J ] . 水产学报 , 1997 , 21 (1) :69 - 73. [ 2 ] Shen L , Stuge T B , Zhou H , et al. Channel catfish cytotoxic cells :a mini2review [J ] . Dev Comp Immunol , 2002 , 26 :141 - 149. [3 ] Mulero V , Esteban M A , Meseguer J , et al. Dietary intake of levamisole enhances the immune response and disease resistance of 655 水 产 学 报 29 卷