期 黄洪敏等:鱼类免疫增强剂的研究现状与进展 555 Yoshida等报道了虹鳟口服EF203后,能刺激白细胞的被认为有明显的免疫刺激作用159 活力,如增强吞噬作用和化学发光反应,并能增加对链球 植物提取物许多植物提取物同样具有免疫刺激作 菌的抵抗力。 Sakai等发现虹鳟在接种鲑肾杆菌用如甘草皂苷是一种糖基化的皂甙,它能通过免疫调节 ( Remi bacterium salmoninarum疫苗的同时使用FF203,虽然途径而发挥抗炎症、抗肿瘤的活性。 Edahiro等报道了青 血清凝集抗体滴度没有增加,但吞噬细胞的吞噬作用明甘口服甘草皂苷后能增加对格氏乳球菌的抵抗力∞), 显加强,头肾白细胞的NBT反应也更活跃,在抗鲑肾杆菌Jang等报道了虹鳟巨噬细胞和淋巴细胞经甘草皂苷处 感染方面,其存活率有明显提高。 理后,能分别增强其呼吸爆发水平和增生应答水平。伴 微生物菌体微生物菌体除了可以作为疫苗进行鱼刀豆球蛋白A( concanavalin a,ConA)是一种具有T细胞 类病害免疫防治外,还可作为免疫增强剂发挥作用,如鳗丝裂原活性的凝集素,研究表明,它与植物凝集素PHA 弧菌就已作为一种重要的免疫增强剂应用于鮭鱼养殖生样,不仅能促进虹鳟、鲤等T淋巴细胞的增殖分化,同时 产。研究显示,该菌通过注射、口服、浸泡等途径给药都还能活化巨噬细胞,并诱导白细胞产生巨噬细胞活化因 有效果。 Sakai等发现虹鳟经鳗弧菌溶液浸泡后,能增子町。此外还有研究显示,虹鳟口服大豆蛋白后,能增 强其对链球菌感染的抵抗力; Norquist等报道了减毒鳗强其白细胞的活力;虹鳟经植物皂甙QuA浸泡后,能 弧菌可使虹鳟对杀蛙气单胞菌有抵抗作用。除了鳗弧菌增强其对鲁氏耶尔森菌的杀菌力;在青甘中,口服QulA 外,有报道认为虹鳟、斑点叉尾鲴金鲷注射或口服冻干皂甙后能增加白细胞的迁移率,罗非鱼、草鱼 的酿酒酵母和假丝酵母( Candida utilis)后,能同时增强体( Ctenopharyngodon dellis)饲喂大麦葡聚糖、云芝多糖后能 液和细胞免疫应答,增加对病菌的抵抗力。此外,提高对嗜水气单胞菌的抵抗力。最近, Candan等6还 rodriguez等还研究了3种不同的卷枝毛霉菌(Mor研究了饲喂几种医用植物如姜( Zingiber ficinale)、荨麻 circinelloides)对金鲷的免疫刺增强性,发现饲喂含有冻干 Urtica dioica)、槲寄生( iscum albun)提取物对鱼类免疫 卷枝毛霉菌的饲料后,能增强鱼体血清溶菌酶的活力、白系统的影响,发现这几种饲料添加剂都能增强巨嗜细胞 细胞吞噬作用和细胞毒活性。 呼吸爆发反应,虹鳟饲喂1%的姜粉水提物,3周后能显 狭盐无色杆菌( Achromobacter stenohalis)是从海水中分著增加鱼体的非特异免疫应答。 离的一种G·细菌, kawahara等发现白斑红点鲑2.4营养因子类免疫增强剂 ( Salvelinus leucomaenis)注射灭活的该种细菌后能增强头 维生素C、E、A等不仅是鱼类正常生长最基本的组 肾细胞的化学发光反应,活化补体成分,增强对杀蛙气单分,也能增强鱼类的特异和非特异性免疫应答。 Cuesta 胞菌的抵抗力21。丁酸梭菌( stridium butyricum)已在等l在这方面做了大量研究,先后报道了维生素E能增 医学临床上用来预防人类肠道内微生物菌落的紊乱,如强金鲷的NCC活力,维生素C能增强金鲷的NCC活力和 Young等3报道了该菌能刺激人巨噬细胞和NK细胞活血清溶菌酶活力,金鲷口服150~300mg*g‘'的醋酸 化,增强抗念珠菌的感染。研究显示,它在鱼类中也有免维生素A,能增强头肾NcC活力、吞噬细胞呼吸爆发和白 疫调节作用,如 Sakai等发现虹鳟口服丁酸梭菌后能通细胞的髓过氧化物酶活性,而腹腔注射醋酸维生素A则 过对白细胞的活化(包括吞噬作用的增强和超氧阴离子对金鲷有毒性作用m,。 Alerton等口l报道了改变食物 量的增加)而增强对弧菌病的抵抗力。此外,灭活的乳酪中维生素E的含量能调节肠道白细胞的吞噬功能,说明 分枝杆菌( Mycobacterium butyricum)常被作为弗氏完全佐剂维生素E更多的是在局部发生作用,特别是在肠道吞噬 成分之一,用于增强鱼体的免疫应答和疫苗的效力。 细胞的粘膜非淋巴样防御中起重要作用。除了上述维生 2.3动植物来源的免疫增强剂 素外,Amar等还报道了类胡萝卜素和虾黄素能提高虹 动物提取物研究显示,一些无脊椎动物的提取物鳟的体液和细胞免疫应答水平,包括血清的补体成分和 也有免疫刺激作用,如海产被囊类动物中的加勒比海海溶菌酶活力、细胞吞噬作用和细胞毒效应。类葫萝卜素 鞘( Edteinascida turbinata)的提取物Ee和皱纹盘鲍在与其它维生素如A,C,E联合使用时,还能表现出更高 Haliotis discus hanna)的水提物H中的一种糖蛋白组分的免疫刺激作用。此外,其它营养成分如脂类微量元素 己被证明能在体外促进人肿瘤细胞的死亡,并抑制体内等也能影响鱼体的免疫应答水平。 肿瘤的生长。 Davis等1发现,Ee和hk在鱼类中也有25生物活性因子类免疫增强剂 免疫调节作用,如美洲鳗( Anguilla rostrata,)和虹鳟分别注 激素Kita等的研究表明,在鱼类中外源生长激 射E和e后,能增强吞噬细胞和Nκ细胞活性,在嗜素(GH)和催乳素(PR)能直接影响鱼类淋巴细胞、巨噬 水气单胞菌和鳗弧菌的胁迫下存活率有明显增加。此细胞和NK细胞活性,如GH对淋巴细胞有丝裂原的活 外,一种萤火鱿( Watasenia scintillans)的提取物,也被证实性,并能活化NK细胞。 Narnaware等证实在高盐和低 能刺激虹鳟巨噬细胞活性,促进淋巴母细胞转化为淋巴盐环境中,PL均能提高银鲷(Sυssω加σ血液中的淋巴 细胞。鱼类蛋白水解物中的酸肽成分在大西洋鲑中也细胞数目,鱼体注射PR能引起白细胞的分裂增殖,在体 94-2008ChinaAcademicjOUmalElectronicPublishingHouseAllrightsreservedhttp://www.cnki.netYoshida 等[46 ]报道了虹鳟口服 EF203 后 ,能刺激白细胞的 活力 ,如增强吞噬作用和化学发光反应 ,并能增加对链球 菌的 抵 抗 力。Sakai 等[47 ] 发 现 虹 鳟 在 接 种 鲑 肾 杆 菌 ( Renibacterium salmoninarum) 疫苗的同时使用 EF203 ,虽然 血清凝集抗体滴度没有增加 ,但吞噬细胞的吞噬作用明 显加强 ,头肾白细胞的 NBT 反应也更活跃 ,在抗鲑肾杆菌 感染方面 ,其存活率有明显提高。 微生物菌体 微生物菌体除了可以作为疫苗进行鱼 类病害免疫防治外 ,还可作为免疫增强剂发挥作用 ,如鳗 弧菌就已作为一种重要的免疫增强剂应用于鲑鱼养殖生 产。研究显示 ,该菌通过注射、口服、浸泡等途径给药都 有效果。Sakai 等[48 ]发现虹鳟经鳗弧菌溶液浸泡后 ,能增 强其对链球菌感染的抵抗力; Norqvist 等[49 ]报道了减毒鳗 弧菌可使虹鳟对杀蛙气单胞菌有抵抗作用。除了鳗弧菌 外 ,有报道认为虹鳟、斑点叉尾 、金鲷注射或口服冻干 的酿酒酵母和假丝酵母 (Candida utilis) 后 ,能同时增强体 液和细胞免疫应答 ,增加对病菌的抵抗力[50 - 52 ] 。此外 , Rodríguez 等[53 ]还研究了 3 种不同的卷枝毛霉菌 ( Mucor circinelloides) 对金鲷的免疫刺增强性 ,发现饲喂含有冻干 卷枝毛霉菌的饲料后 ,能增强鱼体血清溶菌酶的活力、白 细胞吞噬作用和细胞毒活性。 狭盐无色杆菌( Achromobacter stenohalis) 是从海水中分 离的 一 种 G - 细 菌 , Kawahara[54 ] 等 发 现 白 斑 红 点 鲑 (Salvelinus leucomaenis) 注射灭活的该种细菌后能增强头 肾细胞的化学发光反应 ,活化补体成分 ,增强对杀蛙气单 胞菌的抵抗力[22 ] 。丁酸梭菌 (Clostridium butyricum) 已在 医学临床上用来预防人类肠道内微生物菌落的紊乱 ,如 Young 等[55 ]报道了该菌能刺激人巨噬细胞和 N K 细胞活 化 ,增强抗念珠菌的感染。研究显示 ,它在鱼类中也有免 疫调节作用 ,如 Sakai 等[56 ]发现虹鳟口服丁酸梭菌后能通 过对白细胞的活化 (包括吞噬作用的增强和超氧阴离子 量的增加) 而增强对弧菌病的抵抗力。此外 ,灭活的乳酪 分枝杆菌( Mycobacterium butyricum) 常被作为弗氏完全佐剂 成分之一 ,用于增强鱼体的免疫应答和疫苗的效力。 2. 3 动植物来源的免疫增强剂 动物提取物 研究显示 ,一些无脊椎动物的提取物 也有免疫刺激作用 ,如海产被囊类动物中的加勒比海海 鞘 ( Ecteinascida turbinata ) 的 提 取 物 Ete 和 皱 纹 盘 鲍 ( Haliotis discus hannai) 的水提物 Hde 中的一种糖蛋白组分 已被证明能在体外促进人肿瘤细胞的死亡 ,并抑制体内 肿瘤的生长。Davis 等[57 ]发现 , Ete 和 Hde 在鱼类中也有 免疫调节作用 ,如美洲鳗 ( Anguilla rostrata) 和虹鳟分别注 射 Ete 和 Hde 后 ,能增强吞噬细胞和 N K 细胞活性 ,在嗜 水气单胞菌和鳗弧菌的胁迫下存活率有明显增加。此 外 ,一种萤火鱿 ( Watasenia scintillans) 的提取物 ,也被证实 能刺激虹鳟巨噬细胞活性 ,促进淋巴母细胞转化为淋巴 细胞[58 ] 。鱼类蛋白水解物中的酸肽成分在大西洋鲑中也 被认为有明显的免疫刺激作用[59 ] 。 植物提取物 许多植物提取物同样具有免疫刺激作 用 ,如甘草皂苷是一种糖基化的皂甙 ,它能通过免疫调节 途径而发挥抗炎症、抗肿瘤的活性。Edahiro 等报道了青 甘口服甘草皂苷后能增加对格氏乳球菌的抵抗力[60 ] 。 Jang 等[61 ]报道了虹鳟巨噬细胞和淋巴细胞经甘草皂苷处 理后 ,能分别增强其呼吸爆发水平和增生应答水平。伴 刀豆球蛋白 A (concanavalin A , Con A) 是一种具有 T 细胞 丝裂原活性的凝集素 ,研究表明 ,它与植物凝集素 PHA 一 样 ,不仅能促进虹鳟、鲤等 T 淋巴细胞的增殖分化 ,同时 还能活化巨噬细胞 ,并诱导白细胞产生巨噬细胞活化因 子[62 ,63 ] 。此外还有研究显示 ,虹鳟口服大豆蛋白后 ,能增 强其白细胞的活力[64 ] ;虹鳟经植物皂甙 Quil A 浸泡后 ,能 增强其对鲁氏耶尔森菌的杀菌力;在青甘中 ,口服 Quil A 皂甙 后 能 增 加 白 细 胞 的 迁 移 率[65 ] ; 罗 非 鱼、草 鱼 ( Ctenocpharyngodon idellus) 饲喂大麦葡聚糖、云芝多糖后能 提高对嗜水气单胞菌的抵抗力[66 ] 。最近 , Candan 等[67 ]还 研究了饲喂几种医用植物如姜 ( Zingiber officinale) 、荨麻 ( Urtica dioica) 、槲寄生 ( Viscum album) 提取物对鱼类免疫 系统的影响 ,发现这几种饲料添加剂都能增强巨嗜细胞 呼吸爆发反应 ,虹鳟饲喂 1 % 的姜粉水提物 , 3 周后能显 著增加鱼体的非特异免疫应答。 2. 4 营养因子类免疫增强剂 维生素 C、E、A 等不仅是鱼类正常生长最基本的组 分 ,也能增强鱼类的特异和非特异性免疫应答。Cuesta 等[68 ]在这方面做了大量研究 ,先后报道了维生素 E 能增 强金鲷的 NCC 活力 ,维生素 C 能增强金鲷的 NCC 活力和 血清溶菌酶活力[69 ] ,金鲷口服 150～300 mg·kg - 1的醋酸 维生素 A ,能增强头肾 NCC 活力、吞噬细胞呼吸爆发和白 细胞的髓过氧化物酶活性 ,而腹腔注射醋酸维生素 A 则 对金鲷有毒性作用[70 ,71 ] 。Clerton 等[72 ] 报道了改变食物 中维生素 E 的含量能调节肠道白细胞的吞噬功能 ,说明 维生素 E 更多的是在局部发生作用 ,特别是在肠道吞噬 细胞的粘膜非淋巴样防御中起重要作用。除了上述维生 素外 ,Amar 等[73 ]还报道了类胡萝卜素和虾黄素能提高虹 鳟的体液和细胞免疫应答水平 ,包括血清的补体成分和 溶菌酶活力、细胞吞噬作用和细胞毒效应。类葫萝卜素 在与其它维生素如 A , C , E 联合使用时 ,还能表现出更高 的免疫刺激作用。此外 ,其它营养成分如脂类、微量元素 等也能影响鱼体的免疫应答水平。 2. 5 生物活性因子类免疫增强剂 激素 Kajita 等[74 ]的研究表明 ,在鱼类中外源生长激 素(GH) 和催乳素 ( PRL) 能直接影响鱼类淋巴细胞、巨噬 细胞和 N K 细胞活性 ,如 GH 对淋巴细胞有丝裂原的活 性 ,并能活化 N K 细胞。Narnaware 等[75 ]证实在高盐和低 盐环境中 , PRL 均能提高银鲷( Sparus sarba) 血液中的淋巴 细胞数目 ,鱼体注射 PRL 能引起白细胞的分裂增殖 ,在体 4 期 黄洪敏等 :鱼类免疫增强剂的研究现状与进展 555