荧光物质与溶剂或其它物质之间发生化学反应，或发生碰撞后使荧光强度下降或荧光效率下 降称为荧光猝灭。 使荧光强度降低的物质称为荧光猝灭剂 氧分子及产生重原子效应的溴化物、碘化物等都是常见的荧光猝灭剂 碰撞猝灭一M+激→M M+Q一M+Q+热 自熄灭一荧光物质发射的荧光被荧光物质的基态分子所吸收，即自吸收现象。 3荧光分析仪器 由光源、单色器、液池、检测器和记录系统五部分组成。 3.1光源：激发光源一般要求比吸收测量中的光源有更大的发射强度：适用波长范围宽 荧光计中，常使用卤钨灯作光源。荧光光度计中常用高压汞灯和氙弧灯。3.2单色器：荧 光计用滤光片作单色器，荧光计只能用于定量分析，不能获得光谱。大多数荧光光度计 一般采用两个光栅单色器，有较高的分辨率，能扫描图谱，既可获得激发光谱，又可获 得荧光光谱。第一单色器作用：分离出所需要的激发光，选择最佳激发波长，x,用此激 发光激发液池内的荧光物质入x.第二单色器作用：滤掉一些杂散光和杂质所发射的干扰 光，用来选择测定用的荧光波长入m。在选定的入em下测定荧光强度，定量分析。 3.3样品池：盛放测定溶液，通常是石英材料的方形池，四面都透光，只能用手拿棱或最 上边。 3.4检测器：把光信号转化成电信号，放大，直接转成荧光强度。荧光的强度一般较弱， 要求检测器有较高的灵敏度，荧光光度计采用光电倍增管。荧光分析比吸收光度法具有 高得多的灵敏度，是因为荧光强度与激发光强度成正比，提高激发光强度可大大提高荧 光强度。 3.5读出装置记录仪记录或打印机打印出结果，扫描激发光谱和发射光谱 4荧光分析法的应用 4.1无机化合物分析 单独的无机离子很少发荧光，大多数是利用无机离子与有机试剂形成有荧光 的络合物，目前采用有机试剂进行荧光分析的元素己近70种，其中较常见的元 素有铍、铝、硼、镓及某些稀土元素等。 能够同金属离子形成荧光络合物的有机试剂绝大多数是芳香族化合物。它们 通常含有两个或两个以上的官能团，能与金属离子形成五元或六元环的整合物。由于鳌 合物的形成，分子的刚性平面结构增大，使原来不发光或发光较弱的化合物转变为强荧 6 6 荧光物质与溶剂或其它物质之间发生化学反应，或发生碰撞后使荧光强度下降或荧光效率 f 下 降称为荧光猝灭。 使荧光强度降低的物质称为荧光猝灭剂 氧分子及产生重原子效应的溴化物、碘化物等都是常见的荧光猝灭剂 碰撞猝灭—— M + 激 → M* M* + Q → M + Q +热 自熄灭——荧光物质发射的荧光被荧光物质的基态分子所吸收，即自吸收现象。 3 荧光分析仪器 由光源、单色器、液池、检测器和记录系统五部分组成。 3.1 光源：激发光源一般要求比吸收测量中的光源有更大的发射强度；适用波长范围宽。 荧光计中，常使用卤钨灯作光源。荧光光度计中常用高压汞灯和氙弧灯。3.2 单色器：荧 光计用滤光片作单色器，荧光计只能用于定量分析，不能获得光谱。大多数荧光光度计 一般采用两个光栅单色器，有较高的分辨率，能扫描图谱，既可获得激发光谱，又可获 得荧光光谱。第一单色器作用：分离出所需要的激发光，选择最佳激发波长 ex，用此激 发光激发液池内的荧光物质 ex。第二单色器作用：滤掉一些杂散光和杂质所发射的干扰 光，用来选择测定用的荧光波长 em。 在选定的 em 下测定荧光强度，定量分析。 3.3 样品池：盛放测定溶液，通常是石英材料的方形池，四面都透光，只能用手拿棱或最 上边。 3.4 检测器：把光信号转化成电信号, 放大, 直接转成荧光强度。荧光的强度一般较弱， 要求检测器有较高的灵敏度，荧光光度计采用光电倍增管。荧光分析比吸收光度法具有 高得多的灵敏度，是因为荧光强度与激发光强度成正比，提高激发光强度可 大大提高荧 光强度。 3.5 读出装置 记录仪记录或打印机打印出结果，扫描激发光谱和发射光谱 4 荧光分析法的应用 4.1 无机化合物分析 单独的无机离子很少发荧光，大多数是利用无机离子与有机试剂形成有荧光 的络合物，目前采用有机试剂进行荧光分析的元素已近 70 种，其中较常见的元 素有铍、铝、硼、镓及某些稀土元素等。 能够同金属离子形成荧光络合物的有机试剂绝大多数是芳香族化合物。它们 通常含有两个或两个以上的官能团，能与金属离子形成五元或六元环的鳌合物。由于鳌 合物的形成，分子的刚性平面结构增大，使原来不发光或发光较弱的化合物转变为强荧