实验六 巴氏(Barr)小体检查 、目的 观察性染色体的特殊存在形式,学习X染色质的检查方法。 二、原理 巴代小体,亦称X染色质,目前认为在哺乳类动物中,正常雌性个体两条X染色体。在不分 裂的细胞中,只有一条X染色体活化,另一条固缩,固缩状态的X染色质能被碱性染料所深染。在 雄性个体中,性染色体为XY型,一般无固缩状态的X染色质,故检查不出,有人实验统计得出, 在雌性动物中,X染色质检出率为56-87%,雄性动物中为2-6%。 性染色质的位置大部分紧贴核膜,其形态常呈三角形、馒头形、少部分游离于核内呈园形 或椭园形,贴核膜的则是性染色质的侧面形态。 三、用具及药品 显微镜、镊子、染色缸、载玻片、酒精、快绿染液、猩红染液、牙签 四、实验方法 (一)猩红一块绿染色法: 1.取牙签在口腔两颊表面刮取口腔细胞,弃去第一次刮取的细胞用第二次刮取的健康细胞 在洁净的载玻片上轻轻地涂上一层。 2.将涂片立即放入95%的乙醇中,固定至少30分钟。 3.再浸入70%乙醇中2分钟。 4.在猩红染液中染色2分钟。 5.在50%乙醇中冲洗一次。 6.在固绿中染色1-4小时,分染过程中,每小时在低倍镜下检查一次分染情况。当细胞 质,园泡状核呈现为绿色,固缩核呈现红色为止。 7.用50%乙醇洗涤,并放置5分钟。 8.依次在70%、95%、100%的乙醇中各脱水2分钟。 9.二甲苯透明两次,每次2分钟。 10.中性树胶封片, 11.镜检:经猩红一快绿染色的标本,细胞质呈淡绿色或无色,细胞核呈绿色,一般染色 质颗粒呈绿色或蓝色,性染色质呈亮紫红色。 (二)硫堇紫染色法