质一般不变性,且不同的蛋白质可以用不同浓度的盐沉淀出来,称作分段盐析。盐析法是对 蛋白质进行粗分离的常用方法 (二)填充题 1两性,负,正:2.7.59:3.297:4苯丙氨酸,酪氨酸,色氨酸,色氨酸:5.16% 625;6.-N,H:7.甲硫氨酸,丝氨酸,脯氨酸,甘氨酸;8.肽,排列顺序;9 氢键;10.螺旋轴,3.6,0.54,0.15,100:11.分子,净电荷:12.长,大;13.血红 素,增加,正协同效应,下降,Bohr效应:14.破坏,不变,下降,丧失;15.水化层, 双电层:16.糖基:17.2,2,二硫,2;18减少,增加;19疏水,亲水;20.赖氨酸 精氨酸 (三)选择题 1.(A)色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在280nm的摩尔消光系数分别为5500,540,120 显然色氨酸的光吸收最大。由于大多数蛋白质中含酪氨酸的量比色氨酸多,蛋白质在280nm 处的光吸收主要来源于酪氨酸。肽键在215nm处具有最大的光吸收,胱氨酸中的二硫键在 240nm处只有微弱的光吸收。半胱氨酸中的硫原子在这一波长范围内无明显光吸收 2.(E)谷氨酸和天冬氨酸含有两个羧基,而不是含有两个氨基。其它选项的叙述均是 正确的 3.(E)在pH7时,赖氨酸的R基上的-N带有正电荷,缬氨酸和甘氨酸的R基不含 可解离的基团,半胱氨酸的-SH和酪氨酸的-OH在pH7时不可能解离,因而不会带电荷。 4.(C)α-螺旋是蛋白质常见的、最典型的一种结构元件。而丝心蛋白没有α-螺旋结 构。羊毛、猪毛、鸟毛等蛋白质几乎全是α-螺旋结构,不存在β-折叠。不少蛋白质没有四 级结构,但所有的蛋白质都具有三级结构。 5.(D)组氨酸咪唑基的pKa为60,最接近于生理pH值。 6.(D)Arg是碱性氨基酸,其等电点pl=12(pKx+pK3)=1/2(9.02+12.48) 7.(A,B,C)肽键的部分双键性质防止了肽键的自由旋转。肽键通常有反式构型,并 且比CN单键短。 8.(C)典型的α螺旋是3.613。表示每圈螺旋包含3.6个氨基酸残基,氢键所封闭的环 有13个原子 9.(D)a螺旋的构象是相当稳定的,这是因为所有氨基酸残基军参与了链内氢键的形 成 10.(D)维持蛋白质三级结构最主要的作用力是疏水作用力,二硫键是一种很强的共价 键,但蛋白质形成特定的空间结构,最主要的作用力是氨基酸残基侧链的疏水相互作用 1l.(C)血红蛋白与氧的结合有正协同效应,所以氧合曲线呈S形 12.(C)蛋白质的二级结构如α螺旋,β折叠,β转角等均是由氢键维持的 13.(B,E)肽键和二硫键属于共价键,氢键、盐键、疏水键、范德华力属于次级键。 14.(A)有些有三级结构的蛋白质没有催化功能 15.(C)在pH60的条件下,pl为7.5的蛋白质带正电荷,向负极移动 16.(A)凝胶过滤时,分子体积最大的蛋白质最先被洗脱,蛋白质的带电状况和吸附 作用对洗脱速度影响不大 17.(C)氨基酸与阳离子交换树脂作用力的大小次序是碱性氨基酸》中性氨基酸〉酸性氨 基酸。溶液的pH高于等电点时氨基酸带正电,低于等电点时氨基酸带负电。选项中Arg(pl 为1076)所带正电荷最多,与交换树脂亲和力最强,后被洗脱。Asp(pl为2.7)所带负 电荷最多,与交换树脂亲和力最弱,先被洗脱。 18.(D)低温盐折沉淀的蛋白质不会变性,题中列出的其它方法沉淀的蛋白质均会变性质一般不变性，且不同的蛋白质可以用不同浓度的盐沉淀出来，称作分段盐析。盐析法是对 蛋白质进行粗分离的常用方法。 （二）填充题 1.两性，负，正； 2. 7.59； 3. 2.97； 4.苯丙氨酸，酪氨酸，色氨酸，色氨酸； 5. 16%， 6.25； 6. + − NH3 ，H+； 7. 甲硫氨酸，丝氨酸，脯氨酸，甘氨酸； 8. 肽，排列顺序； 9. 氢键； 10. 螺旋轴，3.6，0.54，0.15，100； 11. 分子，净电荷； 12.长，大； 13. 血红 素，增加，正协同效应，下降，Bohr 效应； 14. 破坏，不变，下降，丧失； 15. 水化层， 双电层；16. 糖基；17. 2，2，二硫，2； 18.减少，增加； 19.疏水，亲水； 20. 赖氨酸， 精氨酸； （三）选择题 1.（A）色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在 280nm 的摩尔消光系数分别为 5 500，540，120， 显然色氨酸的光吸收最大。由于大多数蛋白质中含酪氨酸的量比色氨酸多，蛋白质在 280nm 处的光吸收主要来源于酪氨酸。肽键在 215nm 处具有最大的光吸收，胱氨酸中的二硫键在 240nm 处只有微弱的光吸收。半胱氨酸中的硫原子在这一波长范围内无明显光吸收。 2.（E）谷氨酸和天冬氨酸含有两个羧基，而不是含有两个氨基。其它选项的叙述均是 正确的。 3.（E）在 pH7 时，赖氨酸的 R 基上的 + − NH3 带有正电荷，缬氨酸和甘氨酸的 R 基不含 可解离的基团，半胱氨酸的-SH 和酪氨酸的-OH 在 pH7 时不可能解离，因而不会带电荷。 4.（C） α-螺旋是蛋白质常见的、最典型的一种结构元件。而丝心蛋白没有α-螺旋结 构。羊毛、猪毛、鸟毛等蛋白质几乎全是α-螺旋结构，不存在β-折叠。不少蛋白质没有四 级结构，但所有的蛋白质都具有三级结构。 5.（D）组氨酸咪唑基的  pK 为 6.0，最接近于生理 pH 值。 6.（D）Arg 是碱性氨基酸，其等电点 pI=1/2（pK2+ pK3） =1/2（9.02+12.48） 7.（A，B，C）肽键的部分双键性质防止了肽键的自由旋转。肽键通常有反式构型，并 且比 C-N 单键短。 8.（C）典型的  螺旋是 3.613。表示每圈螺旋包含 3.6 个氨基酸残基，氢键所封闭的环 有 13 个原子。 9.（D）α螺旋的构象是相当稳定的，这是因为所有氨基酸残基军参与了链内氢键的形 成。 10.（D）维持蛋白质三级结构最主要的作用力是疏水作用力，二硫键是一种很强的共价 键，但蛋白质形成特定的空间结构，最主要的作用力是氨基酸残基侧链的疏水相互作用。 11.（C）血红蛋白与氧的结合有正协同效应，所以氧合曲线呈 S 形。 12..（C）蛋白质的二级结构如  螺旋，  折叠，  转角等均是由氢键维持的。 13. (B，E) 肽键和二硫键属于共价键，氢键、盐键、疏水键、范德华力属于次级键。 14.（A）有些有三级结构的蛋白质没有催化功能。 15.（C）在 pH6.0 的条件下，pI 为 7.5 的蛋白质带正电荷，向负极移动。 16..（A）凝胶过滤时，分子体积最大的蛋白质最先被洗脱，蛋白质的带电状况和吸附 作用对洗脱速度影响不大。 17.（C) 氨基酸与阳离子交换树脂作用力的大小次序是碱性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨 基酸。溶液的 pH 高于等电点时氨基酸带正电，低于等电点时氨基酸带负电。选项中 Arg （pI 为 10.76）所带正电荷最多，与交换树脂亲和力最强，后被洗脱。A sp（pI 为 2.77）所带负 电荷最多，与交换树脂亲和力最弱，先被洗脱。 18.（D）低温盐折沉淀的蛋白质不会变性，题中列出的其它方法沉淀的蛋白质均会变性