离子两侧的pK值的平均值即为该氨基酸的值。 20种基本氨基酸，除组氨酸外，在生理pH值(pH值为7左右)下都没有明显的缓冲容 量。因为这些氨基酸的pk值都不在pH值7附近（表38，而缓冲容量只在接近pk值时才 显现出来。从表38和图32可见，组氨酸咪唑基的p.值为6.0，在pH值为7附近有明 显的缓冲作用。 1.吸收光谱 参与蛋白质组成的20种氨基酸，在可见光区域都没有光吸收，但在远紫外区域<220 nm均有光吸收。在近紫外区域(220~300nm)只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸收光的 能力。因为它们的R基含有苯环共轭双锭系统。酪氨酸的最大光吸收波长在275m,苯 丙氨酸的在257nm,色氨酸的在280nm。 蛋白质由于含有这些氨基酸，因此也有紫外吸收能力。 一般最大光吸收在波长280m 处，因此利用分光光度法能很方便地测定蛋白质的含量。但是在不同的蛋白质中这些氨基 酸的含量不同，所以它们的消光系数（或称吸收系数）是不完全一样的。 3.重要化学反应 氨基酸的化学反应主要是指它的α-氨基和α-羧基以及侧链上的功能团所参与的那些 反应。 皮巴亮高致出 NH2 OH R—CH-COOH+HNO2→R—CH-COOH+N2↑+H2O 在标准条件下测定生成的氮气体积，即可计算出氨基酸的量，用此方法反应很快，也 较为准确，是定量测定氨基酸的方法之一（此反应是Vanslyke氢基氮测定法的基础）。此 法还可用于蛋白质水解程度的测定。 这里值得注意的是生成的氮气)只有一半来自氨基酸。此外应该指出，除āNH外， 赖氨酸的e-NH也能与亚硝酸反应，但速度较慢。而a-NH2作用3~4min即完成反应。 (2)与2,4二硝基氯的反应在弱碱性溶液中，氨基酸的ā·氨基很容易与2， 4二硝基氟苯(DNFB)作用，生成稳定的黄色2,4二硝基苯基氨基酸（简写为DNP.氨 基酸)。 02N 〉F+N-d一OOH当虫0N -COOH HF NO2 NO, (DNFB) DNP氨基酸（黄色） 这个反应首先被英国的Sanger用来鉴定多肽或蛋白质的N末瑞氨基酸。 (3)与异疏氯酸苯酯反应在弱碱性条件下，氨基酸中的α氨基还可以与异硫氰酸 苯酯(PTC)反应，产生相应的苯氨基硫甲酰氨基酸(PTC氨基酸)。在无水酸中，PTC 氨基酸即环化为苯硫乙内酰脲(PTH),后者在酸中极稳定。 41 离子两侧的 pK1 值的平均值即为该氨基酸的 pI 值。 20 种基本氨基酸，除组氨酸外，在生理 pH 值(pH 值为 7 左右)下都没有明显的缓冲容 量。因为这些氨基酸的pK′值都不在 pH 值 7 附近(表 3-8)，而缓冲容量只在接近 pK′值时才 显现出来。从表 3-8 和图 3-2 可见，组氨酸咪唑基的 pK′R 值为 6.0，在 pH值为 7附近有明 显的缓冲作用。 1． 吸收光谱 参与蛋白质组成的 20 种氨基酸，在可见光区域都没有光吸收，但在远紫外区域(＜220 nm 均有光吸收。在近紫外区域(220～300 nm)只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸收光的 能力。因为它们的 R 基含有苯环共轭双键系统。酪氨酸的最大光吸收波长在 275 nm，苯 丙氨酸的在 257 nm，色氨酸的在 280 nm。 蛋白质由于含有这些氨基酸，因此也有紫外吸收能力。一般最大光吸收在波长 280 nm 处，因此利用分光光度法能很方便地测定蛋白质的含量。但是在不同的蛋白质中这些氨基 酸的含量不同，所以它们的消光系数（或称吸收系数）是不完全一样的。 3． 重要化学反应 氨基酸的化学反应主要是指它的-氨基和α-羧基以及侧链上的功能团所参与的那些 反应。 (1) 与亚硝酸反应 在室温下亚硝酸能与含游离α-氨基的氨基酸起反应，定量 地放出 氮气，氨基酸被氧化成羟酸(含亚氨基的脯氨酸则不能与亚硝酸反应)。其反应式如下： 在标准条件下测定生成的氮气体积，即可计算出氨基酸的量，用此方法反应很快，也 较为准确，是定量测定氨基酸的方法之一（此反应是 Vanslyke 氨基氮测定法的基础）。此 法还可用于蛋白质水解程度的测定。 这里值得注意的是生成的氮气(N2)只有一半来自氨基酸。此外应该指出，除α-NH2 外， 赖氨酸的ε-NH2也能与亚硝酸反应，但速度较慢。而α-NH2 作用 3～4min 即完成反应。 （2）与 2，4-二硝基氟苯的反应 在弱碱性溶液中，氨基酸的α- 氨基很容易与 2， 4-二硝基氟苯（DNFB）作用，生成稳定的黄色 2，4-二硝基苯基氨基酸（简写为 DNP-氨 基酸）。 F NO2 O2N CH COOH R N NO2 O2N H CH COOH R + H2N 弱碱中 + HF (DNFB) DNP-氨基酸（黄色） 这个反应首先被英国的 Sanger 用来鉴定多肽或蛋白质的 N 末端氨基酸。 （3）与异硫氰酸苯酯反应 在弱碱性条件下，氨基酸中的α-氨基还可以与异硫氰酸 苯酯（PITC）反应，产生相应的苯氨基硫甲酰氨基酸（PTC-氨基酸）。在无水酸中，PTC- 氨基酸即环化为苯硫乙内酰脲（PTH），后者在酸中极稳定。 R CH NH2 COOH R CH OH + HNO2 COOH+ N2 + H2O