要观察 3—5 个视野内的细胞生长状况，然后加以综合分析判断。 十十：细胞占瓶壁有效面积的 25—75％以内具新生细胞。 十十十：细胞占瓶壁有效面积的 75—95％具新生细胞。细胞排列致密。但仍有空隙。 十十十十：细胞占瓶壁 95％以上，细胞已长满或接近长满单层，细胞致密，透明度好。 从十十一十十十十为细胞的对数增长期(或称为指数增长期)。 D．维持期：当细胞形成良好单层后，细胞的生长与分裂都减缓，并逐渐停止生长，这 种现象被称为细胞生长的接触抑制。此时细胞界限逐渐模糊，细胞内颗粒逐渐增多，且透明 度降低，立体感较差。由于代谢产物的不断积累，维持液逐渐变酸。此时营养液已变为橙黄 色或黄色。 E．衰退期：由于溶液中营养的减少和日龄的增长，以及代谢产物的累积等因素，此时 细胞间可出现空隙，细胞中颗粒进一步增多，透明度更低，立体感很差。若将细胞经固定染 色处理后，可见细胞中有大而多的脂肪滴及液泡。最后，细胞皱缩，逐渐死亡，从瓶壁上脱 落下来。 五、思 考 题 1．简述细胞传代培养的操作程序及注意乡项。 3．细胞培养获得成功的关键要素是什么? 3．简述体外培养细胞的形态特征及其生长阶段。 实验二 植物细胞组织培养 一．实验目的 植物细胞和组织培养的技术性强，要求无菌操作，通过本实验可初步掌握常规的组织 培养技术，加深对无菌操作的了解。 二．实验原理