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CN键长0.149nm;C=N键长为0.127nm肽键介于两者之间。 多肽的命名:一含有完整羧基的氨基酸作为母体,其它无羧基的称为 酰基”例如 CH3-CH-CONH-CH-CONH-CH-COOH NH, CH2-C6Hs 丙氨酰甘氨酰苯丙氨酸 多肽结构测定和端基分析 氨基酸组成多肽分子是一排列组合问题 例如:A、B、C三种氨基酸可以组合成:ABC;BAC;CAB;ACB BCA:CBA等六种三肽化合物。 同理:四种氨基酸组成24种多肽;五种氨基酸组成120种多肽…… 多肽中氨基酸的顺序直接影响整个分子的性能,造成生物功能的巨大 变化,甚至影响生物个体的生存。因此要研究多肽的性能,首先要确定组 成它的氨基酸排列顺序。 如:胰岛素相对分子量为5734,测得氨基酸排列顺序用了10年时间。 般测定多肽中氨基酸的顺序如下: 多肽大小的测定(相对分子量):多肽是高分子化合物但它有固定 的相对的分子量。 2.氨基酸的定量分析:6mol/LHCl,105℃水解成氨基酸,然后用 氨基酸分析仪或气相色谱仪分析。 3.测定N端和C端 (1)N端的测定: (A)2,4一二硝基氟苯(DNFB)与NH反应(烃基化),再水解。 缺点,水解分离N-二硝基苄基氨基酸时,整个多肽也都水解成氨基酸了。 (B)异硫氰酸酯法:优点,除多肽的N端氨基酸外,其余肽链会保 留下来,可继续的进行N端的测定 (2)C端的测定 (A)羧肽酶水解法:羧肽酶只能将多肽中C端的氨基酸水解掉供测 定,其余的肽链保留下来,可连续不断的水解测定 (B)肼解法:除C端外其余的肽键都会发生肼解,故可测定C端 肽链的选择性裂解 相对分子量较大的多肽→裂解成小的碎片→测定碎片的顺序→从各 个碎片排列顺序上的重叠,重建整个肽链的顺序 例如:催产素一八肽化合物结构的测定(自学)P624~625。 §21-3蛋白质 蛋白质的分类 1、按蛋白质的形状分:纤维蛋白;丝蛋白;角蛋白;球蛋白;蛋清 蛋白:酪蛋白等。 2、按化学组成分:(A)单纯蛋白(水解最终得α一氨基酸); (B)结合蛋白(单纯蛋白+辅基)。 3、按功能来分:(A)活性蛋白(酶、激素、抗体、收缩蛋白……); (B)非活性蛋白(储存蛋白、结构蛋白……)。 二、蛋白质的结构 1、一级结构:蛋白质分子中,肽链上α一氨基酸的排列顺序。如:281 C—N 键长 0.149nm;C=N 键长为 0.127nm 肽键介于两者之间。 多肽的命名:一含有完整羧基的氨基酸作为母体,其它无羧基的称为 “酰基”例如: CH2 C6H5 CH3 CH CONH CH2 NH2 CONH CH COOH 丙氨酰甘氨酰苯丙氨酸 二、多肽结构测定和端基分析 氨基酸组成多肽分子是一排列组合问题。 例如:A、B、C 三种氨基酸可以组合成:ABC;BAC;CAB;ACB; BCA;CBA 等六种三肽化合物。 同理:四种氨基酸组成 24 种多肽;五种氨基酸组成 120 种多肽……。 多肽中氨基酸的顺序直接影响整个分子的性能,造成生物功能的巨大 变化,甚至影响生物个体的生存。因此要研究多肽的性能,首先要确定组 成它的氨基酸排列顺序。 如:胰岛素相对分子量为 5734,测得氨基酸排列顺序用了 10 年时间。 一般测定多肽中氨基酸的顺序如下: 1.多肽大小的测定(相对分子量):多肽是高分子化合物但它有固定 的相对的分子量。 2.氨基酸的定量分析:6mol / L HCl ,105℃水解成氨基酸,然后用 氨基酸分析仪或气相色谱仪分析。 3.测定 N 端和 C 端 (1)N 端的测定: (A)2,4-二硝基氟苯(DNFB)与 NH2 反应(烃基化),再水解。 缺点,水解分离 N-二硝基苄基氨基酸时,整个多肽也都水解成氨基酸了。 (B)异硫氰酸酯法:优点,除多肽的 N 端氨基酸外,其余肽链会保 留下来,可继续的进行 N 端的测定。 (2)C 端的测定: (A)羧肽酶水解法:羧肽酶只能将多肽中 C 端的氨基酸水解掉供测 定,其余的肽链保留下来,可连续不断的水解测定。 (B)肼解法:除 C 端外其余的肽键都会发生肼解,故可测定 C 端。 4.肽链的选择性裂解 相对分子量较大的多肽→裂解成小的碎片→测定碎片的顺序→从各 个碎片排列顺序上的重叠,重建整个肽链的顺序。 例如:催产素—八肽化合物结构的测定(自学)P624~625 。 §21-3 蛋白质 一、蛋白质的分类 1、按蛋白质的形状分:纤维蛋白;丝蛋白;角蛋白;球蛋白;蛋清 蛋白;酪蛋白等。 2、按化学组成分:(A)单纯蛋白(水解最终得 α-氨基酸); (B)结合蛋白(单纯蛋白+辅基)。 3、按功能来分:(A)活性蛋白(酶、激素、抗体、收缩蛋白……); (B)非活性蛋白(储存蛋白、结构蛋白……)。 二、蛋白质的结构 1、一级结构:蛋白质分子中,肽链上 α-氨基酸的排列顺序。如:
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