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二)琼脂扩散试验 琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。 抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时,便出现可见的白色沉淀线 这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原 抗体存在时,便依各自扩散速度的差异,在适当部位形成独立的沉淀线, 因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散试验可根据抗原抗体反应的方 式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、 单向及双向火箭电泳试验。 (1)单向琼脂扩散试验 材料: 1.诊断血清(抗体:抗人lgG或lgA免疫血清) 2.待检血清(抗原):人血清 3.参考血清:全国统一人血清兔疫球蛋白参考血清(批号不同,免疫 球蛋白含量不同)。 4.其它:生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。 方法: 将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水 浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。 2.在免疫琼脂板上按一定距离(1.2-1.5厘米)打孔,见图1 ○○○ 图1单向琼脂扩散试验抗原孔位置示意图 l5孔加参考血清,6-7孔加待检血清 66 (二).琼脂扩散试验 琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。 抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时,便出现可见的白色沉淀线。 这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原 抗体存在时,便依各自扩散速度的差异,在适当部位形成独立的沉淀线, 因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散试验可根据抗原抗体反应的方 式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、 单向及双向火箭电泳试验。 (1) 单向琼脂扩散试验 材料: 1.诊断血清(抗体:抗人 IgG 或 IgA 免疫血清) 2.待检血清(抗原):人血清 3.参考血清:全国统一人血清免疫球蛋白参考血清(批号不同,免疫 球蛋白含量不同)。 4.其它:生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。 方法: 1.将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的 2%琼脂在 60℃水 浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。 2.在免疫琼脂板上按一定距离(1.2—1.5 厘米)打孔,见图 1。 图 1 单向琼脂扩散试验抗原孔位置示意图 1-5 孔加参考血清,6-7 孔加待检血清
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