3.向孔内滴加1:2,1:4,1:8,1:16,1:32稀释的参考血清及 l:10稀释的待检血清,每孔10微升,此时加入的抗原液面应与琼脂板 平,不得外溢。 4.已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时 5.测定各孔形成的沉淀环直径(mm),用参考血清各稀释度测定值绘出 标准曲线,再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量 (2)双向琼脂扩散试验 材料: 1.诊断血清:兔抗人血清 2.待测血清:人血清 3.阴性对照血清 4.其它:生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等 方法: 1.取一清洁载玻片,倾注3.5-40毫升加热熔化的1%食盐琼脂制成 琼脂板 2.凝固后,用直径3毫米打孔器,孔间距为5毫米。孔的排列方式如 图2所示 图2双向琼脂扩散原抗体孔位量示意图 3.用微量进样器于中央孔加抗体,于周围孔加各种抗原。加样时勿使 样品外溢或在边缘残存小气泡,以免影响扩散结果。 4.加样后的琼脂板收入湿盒内置37℃温箱中扩散24-48小时7 3．向孔内滴加 1：2，1：4，1：8，1：16，1：32 稀释的参考血清及 1：10 稀释的待检血清，每孔 10 微升，此时加入的抗原液面应与琼脂板一 平，不得外溢。 4．已经加样的免疫琼脂板置湿盒中 37℃温箱扩散 24 小时。 5．测定各孔形成的沉淀环直径(mm),用参考血清各稀释度测定值绘出 标准曲线，再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。 （2） 双向琼脂扩散试验 材料： 1．诊断血清：兔抗人血清 2．待测血清：人血清 3．阴性对照血清 4．其它：生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等。 方法： 1．取一清洁载玻片，倾注 3.5—4.0 毫升加热熔化的 1%食盐琼脂制成 琼脂板。 2．凝固后，用直径 3 毫米打孔器，孔间距为 5 毫米。孔的排列方式如 图 2 所示。 图 2 双向琼脂扩散原抗体孔位置示意图 3．用微量进样器于中央孔加抗体，于周围孔加各种抗原。加样时勿使 样品外溢或在边缘残存小气泡，以免影响扩散结果。 4．加样后的琼脂板收入湿盒内置 37℃温箱中扩散 24—48 小时