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(4)酚酞指示剂:称取0.1g酚酞,溶于250ml70%乙醇中 (5)6mol /LHCI (6)6mol /LNaOH 3.材料 食用面粉。 四、操作步骤 1.制作葡萄糖标准曲线 取7支25ml刻度试管,编号,按下表操作。 管号 操作项目 3 4 萄萄糖标准液(m 0020406081012 蒸馆水(ml 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 3,5二硝基水扬酸ml 各15 将各管摇匀,在沸水浴中加热5mi,取出后立即冷却至室温,再以蒸馏水定 容至25ml,混匀。在540m波长下,用0号管调零,分别读取1~6号管的吸光 度。以吸光度为纵坐标, 葡萄糖毫克数为横坐标 绘制标准曲线, 2.样品中还原糖和总精含量的测定 (1)样品中还原糖的提取:准确称取3g食用面粉,放在100ml三角瓶中, 先以少量蒸馏水调成糊状,然后加50ml蒸馏水,搅匀,置于50℃恒温水浴中保 温20min,使还原谢浸出。离心或过滤,用20ml蒸馏水洗残渣,再离心或过滤 将两次离心的上清液或滤液全部收集在100ml的容量瓶中,用燕馏水定容至刻度, 混匀,作为还原糖待测液 (2)样品中总糖的水解和提取:准确称取1g食用面粉,放在100ml的三角 瓶中,加入10ml6mol/LHCI及15ml蒸馏水,置于沸水浴中加热水解30min。 取1一2滴水解液于白瓷板上,加1滴碘一碘化钾溶液,检查水解是否完全。如已 水解完全,则不显蓝色。待三角瓶中的水解液冷却后,加入1滴酚酞指示剂,以 6mol/LN0H中和至微红色,过滤,再用少 量蒸馏水冲洗三角瓶及滤纸,将滤液 全部收集在100ml的容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,混匀。精确吸取10ml定容 过的水解液,移入另一100ml的容量瓶中,以水稀释定容,混匀,作为总糖待测 液。 (3)显色和比色,取4支25ml刻度试管,编号,按下表所示的量操作。 还原糖测定管号 号 总糖测定管号 (1) (2) 11 还原糖待测液(ml) 0 葡萄糖标准液(m) 0 1 蒸馏水(ml 0 0 11 3,5.二硝基水扬酸ml 1.5 1.5 151.5 其余操作均与制作葡萄糖标准曲线时相同。 五、结果处理(4)酚酞指示剂:称取 0.1g 酚酞,溶于 250ml 70%乙醇中。 (5)6mol/L HCl。 (6)6mol/L NaOH。 3.材料 食用面粉。 四、操作步骤 1.制作葡萄糖标准曲线 取 7 支 25ml 刻度试管,编号,按下表操作。 操作项目 管 号 0 1 2 3 4 5 6 葡萄糖标准液(ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 蒸馏水(ml) 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 3,5-二硝基水扬酸(ml) 各 1.5 将各管摇匀,在沸水浴中加热 5min,取出后立即冷却至室温,再以蒸馏水定 容至 25ml,混匀。在 540nm 波长下,用 0 号管调零,分别读取 1~6 号管的吸光 度。以吸光度为纵坐标,葡萄糖毫克数为横坐标,绘制标准曲线。 2.样品中还原糖和总精含量的测定 (1)样品中还原糖的提取:准确称取 3g 食用面粉,放在 100ml 三角瓶中, 先以少量蒸馏水调成糊状,然后加 50ml 蒸馏水,搅匀,置于 50℃恒温水浴中保 温 20min,使还原糖浸出。离心或过滤,用 20ml 蒸馏水洗残渣,再离心或过滤, 将两次离心的上清液或滤液全部收集在 100ml 的容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度, 混匀,作为还原糖待测液。 (2)样品中总糖的水解和提取:准确称取 1g 食用面粉,放在 100ml 的三角 瓶中,加入 10ml 6mol/L HCI 及 15ml 蒸馏水,置于沸水浴中加热水解 30min。 取 1—2 滴水解液于白瓷板上,加 1 滴碘一碘化钾溶液,检查水解是否完全。如已 水解完全,则不显蓝色。待三角瓶中的水解液冷却后,加入 1 滴酚酞指示剂,以 6mol/L NaOH 中和至微红色,过滤,再用少量蒸馏水冲洗三角瓶及滤纸,将滤液 全部收集在 100ml 的容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,混匀。精确吸取 10ml 定容 过的水解液,移入另一 100ml 的容量瓶中,以水稀释定容,混匀,作为总糖待测 液。 (3)显色和比色,取 4 支 25ml 刻度试管,编号,按下表所示的量操作。 管 号 还原糖测定管号 总糖测定管号 (1) (2) I II 还原糖待测液(ml) 1 1 0 0 葡萄糖标准液(ml) 0 0 1 1 蒸馏水(ml) 0 0 1 1 3,5-二硝基水扬酸(ml) 1.5 1.5 1.5 1.5 其余操作均与制作葡萄糖标准曲线时相同。 五、结果处理
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