理论上基因工程菌载荷外源性基因，培养过程细胞大量合成外源性产物，其负 荷大于质粒丢失菌株，故基因工程菌株比生长速率 μ 通常较质拉丢失菌株小，当然 亦有变化不大者。根据以上方程计算结果，Fn 变化情况如图 7-20 所示。 由图 7-20 可知．假定 P＝1%，当 α＝0 时，表明质粒丢失菌株不能生长，培养 处于最理想的稳定状态，亦为质粒最稳定状态，此时 Fn 接近于 1.0；但在无选择压 力下，α 值越大，Fn 越低，即质粒稳定性越差。 在基因工程细胞的连续培养方式中，若无选择压力，迪常不能得到恒定的稳定 状态。而在有选择压力下，则可获得稳定状态。但是培养基也与质粒稳定性有关， 采用天然培养基培产时质粒稳定件较用合成培养基为高，在天然培养基中即使无选 择压力亦可保持质粒的稳定性，因此，用天然培养基进行连续培养是获得质粒稳定 性的良好方法。 3，表达效率及质粒拷贝数控制 在基因工程细胞培养工程中，表达效率与质粒拷贝数有关。在质粒稳定基础上， 应尽可能提高细胞内质粒拷贝数。在工业生产中易于操作的方法是在培养的不同阶 段，采用不同培养温度达到提高拷贝数目的，在前培养阶段采用低温，以减少细胞 负荷，此时拷贝数较低，而比生长速率升高，在主培养中途升高温度，质粒拷贝数 增加，目的基因产量提高。如图 7-21 所示，在 25℃下，培养含有穿梭质粒 pCP3 的 E．coli C600/pCI857 至浊度为 5。再将培养温度提高至 37℃，则质粒拷贝数增加