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(3)放置标本:取出标本,先肉眼观察组织的外形、大小及颜色,置切片于载物台上(盖 玻片朝上),用切片夹固定。调整切片位置使标本对准聚光器中心,以便进行观察 (4)低倍镜观察:转动粗螺旋使低倍镜头距标本0.5cm左右,转动粗螺旋移动载物台,直 到视野内图像清晰为止 (5)高倍镜观察:在低倍镜下把要观察的部分移至视野中央,转换高倍镜头,调节细螺旋 至图像清晰为止。 (6)油镜的使用:使用油镜时,光线要强。将高倍镜下要观察的结构移到视野中央,移开 高倍镜,取香柏油滴于通光孔中央的切片上,转换油镜,使镜头浸于油滴中,缓慢转动细螺 旋至物像清晰。 (⑦)观察后的处理:取下切片,下移载物台,移开物镜头,关闭电源开关。 (二)石蜡切片制作过程(示教) 1取材与固定:从人或动物新鲜尸体(6小时内)上取下组织块(0.5cm3)投入固定液中 (10%福尔马林, Bouin氏固定液等),固定6~24小时,使组织、细胞的蛋白质变性凝固, 以防止细胞自溶或细菌分解。 2.脱水、透明:用升梯度酒精逐渐脱去组织块中的水份。在不同浓度酒精内的时间长短, 则视组织块大小而定。再将组织块置于透明剂(常用二甲苯)中,以替换出组织中的酒精 3.浸蜡包埋:组织标本依次在(60℃的温箱内)软蜡和硬蜡中各浸泡1~2小时。待石蜡 完全浸入组织后,放入已溶化的石蜡容器内。 4.切片与贴片:将蜡块切成厚约5~8μm左右,放入加热的水中使组织展平,再贴到载 玻片上,放恒温箱(37℃~45℃)中烘干 5.脱蜡:组织切片经二甲苯脱蜡两次后,在下降梯度酒精中去除二甲苯,再进入蒸馏水 中稍洗方可染色。 6染色:常用HE染色,以增加组织细胞各部分结构的色彩差异,利于观察 (1)切片放入苏木精溶液中染色数分钟,自来水流洗 (2)0.5~1%盐酸酒精分色数秒至几十秒钟,经自来水浸泡40分钟 (3)入90%酒精中脱水10分钟。 (4)再入伊红染色液染色2~3分钟。 7脱水透明:用升梯度酒精脱水:二甲苯透明 8封固:在标本上滴加中性树胶,加一盖玻片封固,贴上标签,晾干保存。 四、观察切片的注意事项(3)放置标本:取出标本,先肉眼观察组织的外形、大小及颜色,置切片于载物台上(盖 玻片朝上),用切片夹固定。调整切片位置使标本对准聚光器中心,以便进行观察。 (4)低倍镜观察:转动粗螺旋使低倍镜头距标本 0.5cm 左右,转动粗螺旋移动载物台,直 到视野内图像清晰为止。 (5)高倍镜观察:在低倍镜下把要观察的部分移至视野中央,转换高倍镜头,调节细螺旋 至图像清晰为止。 (6)油镜的使用:使用油镜时,光线要强。将高倍镜下要观察的结构移到视野中央,移开 高倍镜,取香柏油滴于通光孔中央的切片上,转换油镜,使镜头浸于油滴中,缓慢转动细螺 旋至物像清晰。 (7)观察后的处理:取下切片,下移载物台,移开物镜头,关闭电源开关。 (二)石蜡切片制作过程(示教) 1.取材与固定:从人或动物新鲜尸体(6 小时内)上取下组织块(0.5cm3 )投入固定液中 (10%福尔马林,Bouin 氏固定液等), 固定 6~24 小时,使组织、细胞的蛋白质变性凝固, 以防止细胞自溶或细菌分解。 2.脱水、透明:用升梯度酒精逐渐脱去组织块中的水份。在不同浓度酒精内的时间长短, 则视组织块大小而定。再将组织块置于透明剂(常用二甲苯)中,以替换出组织中的酒精。 3.浸蜡包埋:组织标本依次在(60℃的温箱内)软蜡和硬蜡中各浸泡 1~2 小时。待石蜡 完全浸入组织后,放入已溶化的石蜡容器内。 4.切片与贴片:将蜡块切成厚约 5~8μm 左右,放入加热的水中使组织展平,再贴到载 玻片上,放恒温箱(37℃~45℃)中烘干。 5.脱蜡:组织切片经二甲苯脱蜡两次后,在下降梯度酒精中去除二甲苯,再进入蒸馏水 中稍洗方可染色。 6.染色:常用 HE 染色,以增加组织细胞各部分结构的色彩差异,利于观察。 (1)切片放入苏木精溶液中染色数分钟,自来水流洗; (2)0.5~1%盐酸酒精分色数秒至几十秒钟,经自来水浸泡 40 分钟; (3)入 90%酒精中脱水 10 分钟。 (4)再入伊红染色液染色 2~3 分钟。 7.脱水透明:用升梯度酒精脱水;二甲苯透明。 8.封固:在标本上滴加中性树胶,加一盖玻片封固,贴上标签,晾干保存。 四、观察切片的注意事项
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