绪论 组织学是研究正常机体微细结构的科学,胚胎学是研究人体出生前发生、发展过程及其 发育机理的科学,属于形态学科。实习课是整个教学过程的重要环节,通过学生动手操作, 观察切片、电镜照片、模型、标本、幻灯片及观看录像,验证和巩固理论知识,加深对所学 知识的理解,增强形态概念;培养在实践中发现问题、分析问题和解决问题的能力,逐步树 立尊重客观事实的科学态度 一、目的要求 1、掌握显微镜的使用和维护, 2、掌握实习报告的书写格式 3、熟悉切片的制作过程。 二、内容方法 (一)光学显微镜的构造与使用方法 1.构造(见图) 目镜固定哪钉 转换器 载物台 聚光镜孔径光栏杆 蓝滤色镜 滤色镜座 集光镜 2.使用方法 (1)取放显微镜:一手握镜臂,一手托住镜座,轻置于实验台上。 (2)对光:将低倍物镜对准聚光器中心,双眼观察目镜,轻调两目镜筒间的距离,看到一 个明亮的圆形视野即可
绪 论 组织学是研究正常机体微细结构的科学，胚胎学是研究人体出生前发生、发展过程及其 发育机理的科学，属于形态学科。实习课是整个教学过程的重要环节，通过学生动手操作， 观察切片、电镜照片、模型、标本、幻灯片及观看录像，验证和巩固理论知识，加深对所学 知识的理解，增强形态概念；培养在实践中发现问题、分析问题和解决问题的能力，逐步树 立尊重客观事实的科学态度。 一、目的要求 1、掌握显微镜的使用和维护。 2、掌握实习报告的书写格式。 3、熟悉切片的制作过程。 二、内容方法 （一）光学显微镜的构造与使用方法 1.构造（见图） 2.使用方法 （1）取放显微镜：一手握镜臂，一手托住镜座，轻置于实验台上。 （2）对光：将低倍物镜对准聚光器中心，双眼观察目镜，轻调两目镜筒间的距离，看到一 个明亮的圆形视野即可
(3)放置标本:取出标本,先肉眼观察组织的外形、大小及颜色,置切片于载物台上(盖 玻片朝上),用切片夹固定。调整切片位置使标本对准聚光器中心,以便进行观察 (4)低倍镜观察:转动粗螺旋使低倍镜头距标本0.5cm左右,转动粗螺旋移动载物台,直 到视野内图像清晰为止 (5)高倍镜观察:在低倍镜下把要观察的部分移至视野中央,转换高倍镜头,调节细螺旋 至图像清晰为止。 (6)油镜的使用:使用油镜时,光线要强。将高倍镜下要观察的结构移到视野中央,移开 高倍镜,取香柏油滴于通光孔中央的切片上,转换油镜,使镜头浸于油滴中,缓慢转动细螺 旋至物像清晰。 (⑦)观察后的处理:取下切片,下移载物台,移开物镜头,关闭电源开关。 (二)石蜡切片制作过程(示教) 1取材与固定:从人或动物新鲜尸体(6小时内)上取下组织块(0.5cm3)投入固定液中 (10%福尔马林, Bouin氏固定液等),固定6~24小时,使组织、细胞的蛋白质变性凝固, 以防止细胞自溶或细菌分解。 2.脱水、透明:用升梯度酒精逐渐脱去组织块中的水份。在不同浓度酒精内的时间长短, 则视组织块大小而定。再将组织块置于透明剂(常用二甲苯)中,以替换出组织中的酒精 3.浸蜡包埋:组织标本依次在(60℃的温箱内)软蜡和硬蜡中各浸泡1~2小时。待石蜡 完全浸入组织后,放入已溶化的石蜡容器内。 4.切片与贴片:将蜡块切成厚约5~8μm左右,放入加热的水中使组织展平,再贴到载 玻片上,放恒温箱(37℃~45℃)中烘干 5.脱蜡:组织切片经二甲苯脱蜡两次后,在下降梯度酒精中去除二甲苯,再进入蒸馏水 中稍洗方可染色。 6染色:常用HE染色,以增加组织细胞各部分结构的色彩差异,利于观察 (1)切片放入苏木精溶液中染色数分钟,自来水流洗 (2)0.5~1%盐酸酒精分色数秒至几十秒钟,经自来水浸泡40分钟 (3)入90%酒精中脱水10分钟。 (4)再入伊红染色液染色2~3分钟。 7脱水透明:用升梯度酒精脱水:二甲苯透明 8封固:在标本上滴加中性树胶,加一盖玻片封固,贴上标签,晾干保存。 四、观察切片的注意事项
（3）放置标本：取出标本，先肉眼观察组织的外形、大小及颜色，置切片于载物台上（盖 玻片朝上），用切片夹固定。调整切片位置使标本对准聚光器中心，以便进行观察。 （4）低倍镜观察：转动粗螺旋使低倍镜头距标本 0.5cm 左右，转动粗螺旋移动载物台，直 到视野内图像清晰为止。 （5）高倍镜观察：在低倍镜下把要观察的部分移至视野中央，转换高倍镜头，调节细螺旋 至图像清晰为止。 （6）油镜的使用：使用油镜时，光线要强。将高倍镜下要观察的结构移到视野中央，移开 高倍镜，取香柏油滴于通光孔中央的切片上，转换油镜，使镜头浸于油滴中，缓慢转动细螺 旋至物像清晰。 （7）观察后的处理：取下切片，下移载物台，移开物镜头，关闭电源开关。 （二）石蜡切片制作过程(示教) 1.取材与固定：从人或动物新鲜尸体（6 小时内）上取下组织块(0.5cm3 )投入固定液中 (10％福尔马林，Bouin 氏固定液等), 固定 6～24 小时，使组织、细胞的蛋白质变性凝固， 以防止细胞自溶或细菌分解。 2.脱水、透明：用升梯度酒精逐渐脱去组织块中的水份。在不同浓度酒精内的时间长短， 则视组织块大小而定。再将组织块置于透明剂(常用二甲苯)中，以替换出组织中的酒精。 3.浸蜡包埋：组织标本依次在(60℃的温箱内)软蜡和硬蜡中各浸泡 1～2 小时。待石蜡 完全浸入组织后，放入已溶化的石蜡容器内。 4.切片与贴片：将蜡块切成厚约 5～8μm 左右，放入加热的水中使组织展平，再贴到载 玻片上，放恒温箱(37℃～45℃)中烘干。 5.脱蜡：组织切片经二甲苯脱蜡两次后，在下降梯度酒精中去除二甲苯，再进入蒸馏水 中稍洗方可染色。 6.染色：常用 HE 染色，以增加组织细胞各部分结构的色彩差异，利于观察。 （1）切片放入苏木精溶液中染色数分钟，自来水流洗； （2）0.5～1%盐酸酒精分色数秒至几十秒钟，经自来水浸泡 40 分钟； （3）入 90％酒精中脱水 10 分钟。 （4）再入伊红染色液染色 2～3 分钟。 7.脱水透明：用升梯度酒精脱水；二甲苯透明。 8.封固：在标本上滴加中性树胶，加一盖玻片封固，贴上标签，晾干保存。 四、观察切片的注意事项
1.养成由肉眼到低倍,再到高倍,系统观察标本的习惯。观察时要注意进行比较,在掌 握组织、细胞光镜结构的基础上,可结合观察电镜照片,并联系机能融会贯通深入理解。 2.识别人工假象:由于固定及其他原因,组织细胞出现某些并非原有的结构,称人工 假象。如组织破碎、裂开、折叠,切片刀不锋利留下的挂痕,染料沉积等 3.注意平面与立体的关系(见图1,图2,图3)、形态与功能的关系、动态与静态的 关系、理论与实践的关系。 图1鸡蛋的各种断面 图2管状器官断面 图3弓形管状断面 五、实习报告书写格式
1.养成由肉眼到低倍，再到高倍，系统观察标本的习惯。观察时要注意进行比较，在掌 握组织、细胞光镜结构的基础上，可结合观察电镜照片，并联系机能融会贯通深入理解。 2．识别人工假象：由于固定及其他原因，组织细胞出现某些并非原有的结构，称人工 假象。如组织破碎、裂开、折叠，切片刀不锋利留下的挂痕，染料沉积等。 3. 注意平面与立体的关系（见图 1，图 2，图 3）、形态与功能的关系、动态与静态的 关系、理论与实践的关系。 图 1 鸡蛋的各种断面 图 2 管状器官断面 图 3 弓形管状断面 五、实习报告书写格式
组织学实习报告是绘制切片中的组织结构图。通过绘图可了解学生实习效果。绘图方式 很多,主要注意以下几点,仅供参考。 1.准备好红、蓝铅笔、图画本、橡皮、小尺等。 2.根据需要低倍或高倍观察,选择典型结构视野。 3.章节内容居中,所绘图大小约占整个页面的1/2~2/3,居中,在其右侧留出注字的 部位 4.用彩色笔涂色,注意颜色深浅、形态、位置、大小比例等,能较真实地反映该结构的 形态特点、轮廓及其各部分的相互关系。 5.绘好图后,标注图中各结构。要求线条平直,字迹工整。在图右下方注明所绘图结构 的名称、染色方法及放大倍数(日镜×物镜)、时间
组织学实习报告是绘制切片中的组织结构图。通过绘图可了解学生实习效果。绘图方式 很多，主要注意以下几点，仅供参考。 1.准备好红、蓝铅笔、图画本、橡皮、小尺等。 2.根据需要低倍或高倍观察，选择典型结构视野。 3.章节内容居中，所绘图大小约占整个页面的 1/2~2/3，居中，在其右侧留出注字的 部位。 4.用彩色笔涂色，注意颜色深浅、形态、位置、大小比例等，能较真实地反映该结构的 形态特点、轮廓及其各部分的相互关系。 5.绘好图后，标注图中各结构。要求线条平直，字迹工整。在图右下方注明所绘图结构 的名称、染色方法及放大倍数(目镜×物镜)、时间
