59 实训三、稻米中久效磷残留量的检测（气相色谱法） 一、目的 1、了解稻米中久效磷残留量的测定原理。 2、学会气相色谱仪的使用方法。 二、原理 久效磷属有机磷化合物，在富氢焰上燃烧时会以氢磷氧形式放射出特征光， 采用磷型火焰光度检测器检测特异性极强。稻米样品中久效磷采用丙酮作为提 取剂进行索氏提取，石油醚液液分配净化，二氯甲烷萃取，浓缩后气相色谱磷 型火焰光度检测器检测。 三、仪器与试剂 气相色谱仪，磷型火焰光度检测器，索氏抽提器，旋转蒸发器。 久效磷标准储备液：准确称取久效磷标准品，用无水乙醇配成浓度约 1mg/ml。 久效磷标准使用液：根据所用仪器的灵敏度将久效磷标准储备液用无水乙 醇稀释至适宜浓度。 丙酮、石油醚、二氯甲烷、无水乙醇、氯化钠、无水硫酸钠。 四、实验步骤 1、提取 称取约 40g 粉碎稻米样品，置于索氏抽提器滤纸筒中，加入 100ml 丙酮， 于 67～69℃水浴回流提取 6h，提取液经 50℃水浴旋转蒸发器上浓缩并定容至 3～5ml，待净化。 2、净化 待净化提取液倒入 250ml 的分液漏斗中，加入 100ml 的 1%硫酸钠溶液，混 匀，用石油醚(每次 25ml）分 4 次洗，弃去石油醚层。加入 25ml 饱和氯化钠溶 液，再用二氯甲烷（每次 25ml）萃取 4 次，合并二氯甲烷层，于 40℃的水浴旋 转蒸发器上浓缩近干，用无水乙醇溶解并定容至 0.5ml，待气相色谱分析。 3、检测 （1）色谱柱 玻璃柱，内径 3mm，长 1m，内装 40g/L OV-210/chromosorbWAWD-MCS(80～100 目)。 （2）温度 柱温 185℃，气化室和检测器温度 240℃。 （3）气体流速 载气：氮气 100ml/min；空气：200ml/min；氢气：150ml/min。 注意事项： 1．国际上多用乙腈作为有机磷农药的提取试剂及分配净化试剂，如 AOAC， FDA 等采取与有机氯农药提取净化大致相同的方法来提取，净化有机磷农药， 即用乙腈或石油醚提取，用乙腈/水分配或乙腈/石油醚分配等方法净化。但乙 腈毒性大，价格贵，且不易购买，故本法采用二氯甲烷提取，并在提取时根据 样品性状加适量无水 Na2SO4、中性氧化铝、活性炭以脱水、脱油、脱色，基本 上一次完成提取、净化的目的。另有用各种吸附柱（如弗罗里矽土柱、活性炭 等）或用扫集共蒸馏方法净化。59 实训三、稻米中久效磷残留量的检测（气相色谱法） 一、目的 1、了解稻米中久效磷残留量的测定原理。 2、学会气相色谱仪的使用方法。 二、原理 久效磷属有机磷化合物，在富氢焰上燃烧时会以氢磷氧形式放射出特征光， 采用磷型火焰光度检测器检测特异性极强。稻米样品中久效磷采用丙酮作为提 取剂进行索氏提取，石油醚液液分配净化，二氯甲烷萃取，浓缩后气相色谱磷 型火焰光度检测器检测。 三、仪器与试剂 气相色谱仪，磷型火焰光度检测器，索氏抽提器，旋转蒸发器。 久效磷标准储备液：准确称取久效磷标准品，用无水乙醇配成浓度约 1mg/ml。 久效磷标准使用液：根据所用仪器的灵敏度将久效磷标准储备液用无水乙 醇稀释至适宜浓度。 丙酮、石油醚、二氯甲烷、无水乙醇、氯化钠、无水硫酸钠。 四、实验步骤 1、提取 称取约 40g 粉碎稻米样品，置于索氏抽提器滤纸筒中，加入 100ml 丙酮， 于 67～69℃水浴回流提取 6h，提取液经 50℃水浴旋转蒸发器上浓缩并定容至 3～5ml，待净化。 2、净化 待净化提取液倒入 250ml 的分液漏斗中，加入 100ml 的 1%硫酸钠溶液，混 匀，用石油醚(每次 25ml）分 4 次洗，弃去石油醚层。加入 25ml 饱和氯化钠溶 液，再用二氯甲烷（每次 25ml）萃取 4 次，合并二氯甲烷层，于 40℃的水浴旋 转蒸发器上浓缩近干，用无水乙醇溶解并定容至 0.5ml，待气相色谱分析。 3、检测 （1）色谱柱 玻璃柱，内径 3mm，长 1m，内装 40g/L OV-210/chromosorbWAWD-MCS(80～100 目)。 （2）温度 柱温 185℃，气化室和检测器温度 240℃。 （3）气体流速 载气：氮气 100ml/min；空气：200ml/min；氢气：150ml/min。 注意事项： 1．国际上多用乙腈作为有机磷农药的提取试剂及分配净化试剂，如 AOAC， FDA 等采取与有机氯农药提取净化大致相同的方法来提取，净化有机磷农药， 即用乙腈或石油醚提取，用乙腈/水分配或乙腈/石油醚分配等方法净化。但乙 腈毒性大，价格贵，且不易购买，故本法采用二氯甲烷提取，并在提取时根据 样品性状加适量无水 Na2SO4、中性氧化铝、活性炭以脱水、脱油、脱色，基本 上一次完成提取、净化的目的。另有用各种吸附柱（如弗罗里矽土柱、活性炭 等）或用扫集共蒸馏方法净化