(analysis method for cell composition) 离心分离技术(techniqe 用途 分离细胞 与生物大分子及其 速离心：分离密度不同的细胞 组分2密度梯度离心：精细组分或生物大分子的分离. 二、细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法 (the manifestation method of the nuclear acid,protein,sugar,enzyme, Linid etc in the ce11) ◆原理： 显色剂与所检测物质中一些特殊基团特异性结合的特征 通过显色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞 中的分布和含量 Feulgen staining 三、 特异蛋白抗原的定位与定性 1。 ation and qualitify of special antige) 1.免疫荧光技术： 快速、灵敏、有特异性，但其分辨率有限 (I)蛋白电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹反应(Western-Blot) (2)免疫电镜技术！ 2.免疫铁蛋白技术 免疫酶标技 4.免疫胶体金技术 ◆应用：通过对分泌蛋白的定位，可以确定某种蛋白的分泌动态；胞内酶 的研究：膜蛋白的定位与骨架蛋白的定位等 四、 细胞内特异核酸的定位与定性 cation qualitify special nuclear acid) 1.光镜水平的原位杂交技术（同位素标记或荧光素标记的探针 2.电镜水平的原位杂交技术（生物素标记的探针与抗生物素抗体相连的胶体金 标记结合) 3.PCR技术 五 射自显影技术 .原 里及应 用 ()利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量 研究： (②)实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。 2步摩. 前体物掺入细胞（标记 持续标记和脉冲标记 一放射自显影 六、 定量细胞化学分析技术(cytochemical analysis technique) 1.细胞显微分光光度术(Microspectrophotometry) 利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收，测定这些物质（如核酸与蛋白 质等)在细胞内的含最。句括：紫外光显微分光光府定法：可见光显微分 光光度测定法 2.流式细胞仪(F1 ow Cytometry） ◆主要应用： 用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量：测定细胞群体中 （analysis method for cell composition） 一、 离心分离技术(technique of concentration) 用途：分离细胞器与生物大分子及其复合物⒈差速离心：分离密度不同的细胞 组分⒉密度梯度离心：精细组分或生物大分子的分离. 二、细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法 (the manifestation method of the nuclear acid,protein,sugar,enzyme, Lipid etc.in the cell) ◆原理：利用一些显色剂与所检测物质中一些特殊基团特异性结合的特征， 通过显色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞 中的分布和含量。 Feulgen Staining 三、 特异蛋白抗原的定位与定性 (location and qualitify of special antige) 1.免疫荧光技术： 快速、灵敏、有特异性，但其分辨率有限 ⑴蛋白电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹反应(Western-Blot) ⑵免疫电镜技术： 2.免疫铁蛋白技术 3.免疫酶标技术 4.免疫胶体金技术 ◆ 应用：通过对分泌蛋白的定位，可以确定某种蛋白的分泌动态；胞内酶 的研究；膜蛋白的定位与骨架蛋白的定位等 四、 细胞内特异核酸的定位与定性 (location and qualitify of special nuclear acid) 1.光镜水平的原位杂交技术（同位素标记或荧光素标记的探针） 2.电镜水平的原位杂交技术（生物素标记的探针与抗生物素抗体相连的胶体金 标记结合） 3.PCR 技术 五、 放射自显影技术 1.原理及应用： ⑴利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量 研究； ⑵实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。 2 步骤： 前体物掺入细胞（标记：持续标记和脉冲标记）——放射自显影 六、 定量细胞化学分析技术(cytochemical analysis technique) 1.细胞显微分光光度术（Microspectrophotometry） 利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收，测定这些物质（如核酸与蛋白 质等）在细胞内的含量。包括：紫外光显微分光光度测定法；可见光显微分 光光度测定法。 2.流式细胞仪（Flow Cytometry） ◆主要应用： 用于定量测定细胞中的 DNA、RNA 或某一特异蛋白的含量；测定细胞群体中 7