电镜与光镜光路图比较电子显微镜的基本构造 2.主要电镜制样技术(1)负染色技术 负染色技术(Negative staining)与金属投影染色背景，衬托出样品的 精细结构(2)冰冻蚀刻技术 冰冻蚀刻技术(Freeze 。etching)(技术示意图)冰冻断裂与蚀刻复型 主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒和膜表面结构。 快速冷冻深度蚀刻技术(quick freeze deep etching)(3)超薄切片技术 超薄切片技术用于电镜观察的样本制备示意图（④）电镜三维重构技术 电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的具有重要应 用前景的一门新技术。电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁 振分析技术 日结△ ,是当前结构生 (Structural Biol 08y) 要研究生物大分子空间结构及其相互关系一 一的主要实验手段。 3.扫描电镜(Scanning electron microscope,SEM) 原理与应用： 电子“探针”扫描，激发样品表面放出二次电子，探测器收集二次电子成象。 C0,临界点干燥法防止引起样品变形的表面张力问题 三、扫描探针显微镜(Scanning Probe Microscope)扫描遂道显微镜(scanning tunneling microscope Scanning Probe Microscope,SPN(80年代发展起来的检测样品微观结构的 仪器)句括：S、AF、磁力显微、摩力微锫等 1.原理：扫描探针与样品接触或达到很近 离时，即产生彼此间相互作用力 如量子力学中的隧道效应（隧道电流）、原子间作用力、磁力、摩撟 力等，并在计算机显示出来，从而反映出样品表面形貌信息、电特性 或磁特性等。 2装置：扫描的压电陶瓷，逼近装置，电子学反馈控制系统和数据采集、处理、 示系 3特点：(1)可对晶体或非晶体成像，无需复杂计算，且分辨本领高。（侧分 辨率为0.1~0.2nm,纵分辨率可达0.01nm): (2)可实时得到样品表面三维图象，可测量厚度信息： (3)可在真空、大气、液体等多种条件下工作：非破坏性测量。 (4)可连续成像，进行动态观察 4用途：纳米生物学研究领域中的重要工具，在原子水平上揭示样本表面的结 构。 第二节细胞组分的分析方法电镜与光镜光路图比较电子显微镜的基本构造 2.主要电镜制样技术⑴负染色技术 负染色技术（Negative staining）与金属投影染色背景，衬托出样品的 精细结构⑵冰冻蚀刻技术 冰冻蚀刻技术（Freeze etching）（技术示意图）冰冻断裂与蚀刻复型： 主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒 和膜表面结构。 快速冷冻深度蚀刻技术（quick freeze deep etching）⑶超薄切片技术 超薄切片技术 用于电镜观察的样本制备示意图 ⑷电镜三维重构技术 电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的具有重要应 用前景的一门新技术。电镜三维重构技术与 X-射线晶体衍射技术及核磁 共振分析技术相结合，是当前结构生物学（Structural Biology）——主 要研究生物大分子空间结构及其相互关系——的主要实验手段。 3.扫描电镜（Scanning electron microscope，SEM） 原理与应用： 电子“探针”扫描，激发样品表面放出二次电子，探测器收集二次电子成象。 CO2 临界点干燥法防止引起样品变形的表面张力问题。 三、扫描探针显微镜（Scanning Probe Microscope）扫描遂道显微镜(scanning tunneling microscope ) Scanning Probe Microscope,SPM(80 年代发展起来的检测样品微观结构的 仪器)包括：STM、AFM、磁力显微镜、摩擦力显微镜等。 ⒈原理：扫描探针与样品接触或达到很近距离时，即产生彼此间相互作用力， 如量子力学中的隧道效应（隧道电流）、原子间作用力、磁力、摩擦 力等，并在计算机显示出来，从而反映出样品表面形貌信息、电特性 或磁特性等。 ⒉装置：扫描的压电陶瓷，逼近装置，电子学反馈控制系统和数据采集、处理、 显示系统。 ⒊特点：（1）可对晶体或非晶体成像，无需复杂计算，且分辨本领高。（侧分 辨率为 0.1～0.2nm，纵分辨率可达 0.01nm）； （2）可实时得到样品表面三维图象，可测量厚度信息； （3）可在真空、大气、液体等多种条件下工作；非破坏性测量。 （4）可连续成像，进行动态观察 ⒋用途：纳米生物学研究领域中的重要工具,在原子水平上揭示样本表面的结 构。 第二节 细胞组分的分析方法 6