复习与思考题 1.根据你所掌握的知识，如何理解“细胞是生命活动的基本单位”这一概念？ 2.病毒是非细胞形态的生命体，又是最简单的生命体，请论证一下它与细胞不 可分割的关系。 3.为什么说支原体可能是最小最简单的细胞存在形式？ 第三章细胞生物学研究方法 (the research method in the cell biology) 第一节细胞形态结构的观察方法 (study method for cell morphology and structure) 一、光学显微镜技术(light microscopy) 1.普通复式光学显微镜技术 (①)光镜样本制作2)分辨率是指区分开两个质点间的最小距离 2.荧光5D= 0.617 cence Microscopy) ◆原卫 N.Sina/2 ①)直接荧光标记技术(2间接免疫荧光标记技术 (③)在光镜水平用于特异蛋白质等生物大分子的定性定位：如绿色荧光蛋白 (GFP)的应用 3.激光共焦扫描显微镜技术(Laser Confocal Microscopy) ◆原理◆应用： 排除焦平面以外光的干扰，增强图像反差和提高分辨率(1.4一1.7)，可重 构样品的三维结构。 4.相差显微镜(phase-contrast microscope) 将光程差或相位差转换成振幅差，可用于观察活细胞5.微分干涉显微镜 (differential interference contrast microscope,DIC) 明暗区别，增加了样品反差且具有立体感。适于研究活细胞中较大的细胞 器6.录像增第品微锫技术(video 计算机辅助的DIC显微镜可在高分辨率下研究活细胞中的颗粒及细胞器的 运动 二、电子显微镜技术(Electro microscopy) 1.电子显微镜的基本知识 由镜与光镜的出较 显微 分辨本领 光源 透镜 真空 成像原 培 LM 200nm 可见光 玻璃透镜 要求真空 利用样品对光的吸收形成 (400-700 明暗反差和颜色变化 FM 紫外光 玻璃透镜 不要求真空 (约200nm) EM 100nn 电子束 电磁透镜 要求真空 利用样品对电子的散射和 (0.01-0.9) 1.33x10 透射形成明暗反差 复习与思考题 1．根据你所掌握的知识，如何理解“细胞是生命活动的基本单位”这一概念？ 2．病毒是非细胞形态的生命体，又是最简单的生命体，请论证一下它与细胞不 可分割的关系。 3．为什么说支原体可能是最小最简单的细胞存在形式？ 第三章 细胞生物学研究方法 (the research method in the cell biology) 第一节 细胞形态结构的观察方法 （study method for cell morphology and structure） 一、光学显微镜技术（light microscopy） 1.普通复式光学显微镜技术 ⑴光镜样本制作⑵分辨率是指区分开两个质点间的最小距离 2.荧光显微镜技术（Fluorescence Microscopy） ◆原理◆应用： ⑴直接荧光标记技术⑵间接免疫荧光标记技术 ⑶在光镜水平用于特异蛋白质等生物大分子的定性定位：如绿色荧光蛋白 (GFP)的应用 3.激光共焦扫描显微镜技术（Laser Confocal Microscopy） ◆原理◆应用： 排除焦平面以外光的干扰，增强图像反差和提高分辨率(1.4—1.7)，可重 构样品的三维结构。 4.相差显微镜（phase-contrast microscope） 将光程差或相位差转换成振幅差，可用于观察活细胞 5.微分干涉显微镜 （differential interference contrast microscope, DIC） 明暗区别，增加了样品反差且具有立体感。适于研究活细胞中较大的细胞 器 6.录像增差显微镜技术（video-enhance microscopy） 计算机辅助的 DIC 显微镜可在高分辨率下研究活细胞中的颗粒及细胞器的 运动 二、电子显微镜技术(Electro microscopy) 1.电子显微镜的基本知识 电镜与光镜的比较 5 利用样品对光的吸收形成 明暗反差和颜色变化 利用样品对电子的散射和 透射形成明暗反差 要求真空 不要求真空 要求真空 1.33x10P -5P～ 玻璃透镜 玻璃透镜 电磁透镜 可见光 （400-700） 紫外光 （约200nm) 电子束 （0.01-0.9） 200nm 100nm LM FM EM 显微 分辨本领 光源 透镜 真空 成像原理 镜