三、 Southern杂交的实验步骤 (一)材料与设备 1. PBS: 0.137 mol/L NaCI 2.68 mmol/L KCl 7.89 mmol/L Na2HPO4 1.47 mmol/L KH2PO4(pH7.2) 2.STEL缓冲液:0.2%SDS 10 mmol/L Tris-HCI (pH7.5) 10 mmol/L EDta 100 mmol/L LiCl 3. 5 mol/L LiCI T缓冲液:10 mmol/L Tris-HCI(80) I mmolL EDTA(8.0) 5.限制酶高盐缓冲液(1×):100 mmol/L NaCl 50 mmol/L Tris-HCI(7.5) O mmolL MgCl 1 mmol/L DTT 6.限制酶中盐缓冲液(1×):50 mmol/L NaCI 10 mmol/L Tris-HCI (7.5) 10 mmol/L MgClz I mmol/L Dtt 限制酶低盐缓冲液(1×):10mmo/ L Tris-HCI(75) 10 mmol/L MgCl2 1 mmol/L dtt 8.牛血清白蛋白:1 mg/ml 9.限制性内切酶 10.上样液(6×):0.25%溴酚蓝 0.25%二甲苯氰FF三、Southern 杂交的实验步骤： （一）材料与设备 1．PBS：0.137 mol/L NaCl 2.68 mmol/L KCl 7.89 mmol/L Na2HPO4 1.47 mmol/L KH2PO4 (pH 7.2) 2．STEL 缓冲液：0.2% SDS 10 mmol/L Tris-HCl (pH7.5) 10 mmol/L EDTA 100 mmol/L LiCl 3．5 mol/L LiCl 4．TE 缓冲液：10 mmol/L Tris-HCl (8.0) 1 mmol/L EDTA (8.0) 5．限制酶高盐缓冲液（1×）：100 mmol/L NaCl 50 mmol/L Tris-HCl (7.5) 10 mmol/L MgCl2 1 mmol/L DTT 6．限制酶中盐缓冲液（1×）：50 mmol/L NaCl 10 mmol/L Tris-HCl (7.5) 10 mmol/L MgCl2 1 mmol/L DTT 7．限制酶低盐缓冲液（1×）：10 mmol/L Tris-HCl (7.5) 10 mmol/L MgCl2 1 mmol/L DTT 8．牛血清白蛋白：1 mg/ml 9．限制性内切酶 10．上样液（6×）：0.25% 溴酚蓝 0.25% 二甲苯氰 FF