薄层涂布，一般可分为无粘合剂和含粘合剂两种，前者系将吸附剂或载体直接涂布于玻璃板上，后 者系在吸附剂或载体中加入一定量的粘合剂， 般常用10%~15%煅石膏(CaS042H20在140C烘 4小时) 混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.2%~0.5%)适量调成糊状，均匀涂布 于玻璃上。也有含一定改性剂如荧光剂或缓冲液等的薄层。 (3)涂布器：应能使吸附剂或载体在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层 (4)点样器：一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材 (⑤)展开室：可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平坦或有双槽，盖子须密闭。 2.操作方法 (1薄层板制备 一般将一份吸附剂和三份水在研钵中向一方向研磨混合 ,去除表面的气泡后，倒 入涂布器中 在玻板上平 急地移动涂 器进行涂布（厚度为0,25~0.5 m),取涂好薄层 的玻板， 于室 温下，置水平台上晾干，在透射光和反射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破 及亏染，于110C洪30分钟，冷知后即使用或置干@箱中备用。也可用商品预制板. (2)点样 用点样器点样于薄层板上， 般为圆点，点样基线距底边1.0~1.5cm,样点直径一般不 大于3m,点样距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必需注意勿损伤薄层表面。 (3)展开 将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，切 勿将样点浸入展开剂中，密封，待展开至规定距离， -般为815cm,取出薄层板，晾干，进行检 测 展开缸如需预先用展开剂预平衡，可在缸中加入适量的展开剂，必要时在壁上贴二条与缸一样 高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，盖严，使展开缸平衡。 3. 薄层扫描法指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱有吸收紫外光或可见光的斑点， 或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、杂质检 查或含量测定。 薄层扫描方法可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明，结合具体情况，选择反射方式，采 用吸收法或荧光法，用双波长或单波长扫描。测定方法有内标法及外标法，由于影响薄层扫描结果 的因素很多，故薄层扫描定量测定应在保证供试品斑点的量在校正曲线的线性范围内的情况下，与 对照品同板点样，展开，扫描， 测量和计算 用外标法视侧定时，苦对照品客数据点在校正曲线上早一涌讨原点的直线村，可用一点法校正，如 不通过原点，通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正。含量测定时，供试品溶液和对照品溶液 应交叉点于同 薄层扳上 供试品点样不得少于4个，对照品每一浓度不得影 于2个 薄层扫描定量 用的对照品纯度应符合含量则足用对照品的要求。 4.影响薄层色谱分析的因素薄层色谱法是目前中药鉴别应用最广的一种鉴别方法，但影响薄层 色谱法分析效果的因素很多。 (1)样品的预处理及供试液的制备 般认为薄层色谱所用固定相（薄层板）可即用即弃，不怕供试 液中杂质的污染，因而样品无需净化精制，在实践中，由于中药的成分复杂，未知成分多，供试液 中溶出的物质较多，其中既有欲测成分也有其他"杂质” 常由于相互干扰或背景污染而难以得到满意 的分离效果，甚至难以辨认，尤其成方制剂更是如此。为了得到 个较为青析的色谱，样品提取物 经预冰理体仕式随得】鱼火体往是 个重要的有时甚至是关键的步骤。 制备样品供试液所用的 溶剂一般要求溶解度不宜 太大 粘度不宜太高 沸点适中， 而对于中药材又常常希望将成分尽可 多的被提取出来，所以常被选用的是甲醇或乙醇，因此欲测成分和许多其他"杂质”均被提取出来，供 试液的净化就显得更为必要。例如一捻金中人参二醇及人参三醇的鉴别，若是用稀酸水解后直接用 氯仿萃取，点样层析，色谱因大黄成分的干扰，致使人参二醇及人参三醇的斑点很难辨认，经碱性 氧化铝小柱吸附净化后，除去了大部分干扰， 结里鱼谱清浙 人参 二醇及人参三醇很容易辨认。 样品供试液净化的方法：①单一溶剂萃取法如浙贝母、洋金花等含生物碱类成分的中药材可利用 在碱性介质下用氯仿或苯将其所含的生物碱有选择地萃取出而舍弃其他成分。 使世试液得净化 先用 己烷萃取 供鉴别当 继用丙酮萃取 共鉴别马兜铃酸（关木 以鉴别龙胆苦苷，是利用了各自不同的溶解度，用 薄层涂布，—般可分为无粘合剂和含粘合剂两种，前者系将吸附剂或载体直接涂布于玻璃板上，后 者系在吸附剂或载体中加入一定量的粘合剂，一般常用10％～15％煅石膏(CaSO4·2H2O在140℃烘 4小时)，混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.2％～0.5％)适量调成糊状，均匀涂布 于玻璃上。也有含一定改性剂如荧光剂或缓冲液等的薄层。 (3)涂布器：应能使吸附剂或载体在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。 (4)点样器：一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。 (5)展开室：可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平坦或有双槽，盖子须密闭。 2．操作方法 (1)薄层板制备：一般将一份吸附剂和三份水在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒 入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为0.25～0.5mm)，取涂好薄层的玻板，于室 温下，置水平台上晾干，在透射光和反射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损 及污染，于110℃烘30分钟，冷却后即使用或置干燥箱中备用。也可用商品预制板。 (2)点样： 用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不 大于3mm，点样距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必需注意勿损伤薄层表面。 (3)展开：将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，切 勿将样点浸入展开剂中，密封，待展开至规定距离，一般为8～15cm，取出薄层板，晾干，进行检 测。 展开缸如需预先用展开剂预平衡，可在缸中加入适量的展开剂，必要时在壁上贴二条与缸一样 高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，盖严，使展开缸平衡。 3．薄层扫描法 指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱有吸收紫外光或可见光的斑点， 或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、杂质检 查或含量测定。 薄层扫描方法可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明，结合具体情况，选择反射方式，采 用吸收法或荧光法，用双波长或单波长扫描。测定方法有内标法及外标法，由于影响薄层扫描结果 的因素很多，故薄层扫描定量测定应在保证供试品斑点的量在校正曲线的线性范围内的情况下，与 对照品同板点样，展开，扫描，测量和计算。 用外标法测定时，若对照品各数据点在校正曲线上呈一通过原点的直线时，可用一点法校正，如 不通过原点，通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正。含量测定时,供试品溶液和对照品溶液 应交叉点于同一薄层扳上，供试品点样不得少于4个，对照品每一浓度不得少于2个，薄层扫描定量 用的对照品纯度应符合含量测定用对照品的要求。 4．影响薄层色谱分析的因素 薄层色谱法是目前中药鉴别应用最广的一种鉴别方法，但影响薄层 色谱法分析效果的因素很多。 (1)样品的预处理及供试液的制备：一般认为薄层色谱所用固定相(薄层板)可即用即弃，不怕供试 液中杂质的污染，因而样品无需净化精制，在实践中，由于中药的成分复杂，未知成分多，供试液 中溶出的物质较多，其中既有欲测成分也有其他"杂质"，常由于相互干扰或背景污染而难以得到满意 的分离效果，甚至难以辨认，尤其成方制剂更是如此。为了得到一个较为清晰的色谱，样品提取物 经预处理，使供试液得以净化，往往是一个重要的有时甚至是关键的步骤。制备样品供试液所用的 溶剂一般要求溶解度不宜太大，粘度不宜太高，沸点适中，而对于中药材又常常希望将成分尽可能 多的被提取出来，所以常被选用的是甲醇或乙醇，因此欲测成分和许多其他"杂质"均被提取出来，供 试液的净化就显得更为必要。例如一捻金中人参二醇及人参三醇的鉴别，若是用稀酸水解后直接用 氯仿萃取，点样层析，色谱因大黄成分的干扰，致使人参二醇及人参三醇的斑点很难辨认，经碱性 氧化铝小柱吸附净化后，除去了大部分干扰，结果色谱清晰，人参二醇及人参三醇很容易辨认。 样品供试液净化的方法：①单一溶剂萃取法 如浙贝母、洋金花等含生物碱类成分的中药材可利用 在碱性介质下用氯仿或苯将其所含的生物碱有选择地萃取出而舍弃其他成分。使供试液得以净化。 ②分段萃取法 如龙胆泻肝丸先用正己烷萃取，供鉴别当归用；继用丙酮萃取，供鉴别马兜铃酸(关木 通)：最后用甲醇萃取再经氧化铝小柱甲醇洗脱，以鉴别龙胆苦苷，是利用了各自不同的溶解度，用