象称为盐溶(salting in),这是由于蛋白质颗粒上吸附某种无机盐离子后，使蛋白质颗粒 带同种电荷而相互排斥，并且与水分子的作用加强，从而溶解度增加。 (一)调H至等由占 当蛋白质溶液处于等电点pH时，蛋白质分子主要以两性离子形式存在，净电荷为零。 此时蛋白质分子失去同种电荷的排斥不作用，极易聚集而发生沉淀： (三)有机溶剂 有些与水互溶的有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮等可使蛋白质产生沉淀，这是由于这 些有机溶剂和水的亲和力大，能夺取蛋白质表面的水化膜，从而使蛋白质的溶解度降低 并产生沉淀 可用于蛋白质的分离、纯化 以上方法分离制备得到的蛋白质一般仍保持天然蛋白质的生物活性，将其重新溶解 于水仍然能成为稳定的胶体溶液。但用有机溶剂来沉淀分离蛋白质时，需在低温下进行， 在较高温度下进行会破坏蛋白质的天然构象。 (四)垂金属盐 省低白质意的出合不白质布负电有、可与重金据窝子（如 Hg、Pb2 (五)生物碱试剂 生物碱是植物组织中具有显著生理作用的一类含氮的碱性物质。能够沉淀生物碱的 试剂称为生物碱试剂。生物碱试剂都能沉淀蛋白质，如单宁酸、苦味酸、三氯乙酸等都 三、蛋白质的变性与复性 蛋白质因其些物理或化学因素的居影响，分子的空间物象梦破坏，从而导致其理化 性质发生改变并失去原有的生物学活性的现 象称为蛋白 质的变性作用 aturation)。 性作用并不引起蛋白质一级结构的破坏，而是二级结构以上的高级结构的破坏，变性后 的蛋白质称为变性蛋白。 引起蛋白质变性的因素很多，物理因素有高温、紫外线、X射线、超声波、高压、 剧烈的搅拌、震荡等。化学因素有强酸、强碱、尿素、胍盐、去污剂、重金属盐（如Hg Ag、Pb2等)三氯乙酸，浓乙醇等 同蛋白质对各种因素的敏感程度不同 蛋白质变性后许多性质都发生了改变，主要有以下几个方面： (一)生物活性丧失 蛋白质的生物活性是指蛋白质所具有的酶、激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的 载氧能力等生物学功能。生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。有时蛋白质的空间结 构只有轻微变化即可引起生物活性的丧失。 某些理化性质的改变 蛋白质变性后理化性质发生改变，如溶解度降低而产生沉淀，因为有些原来在分子 5352 象称为盐溶（salting in），这是由于蛋白质颗粒上吸附某种无机盐离子后，使蛋白质颗粒 带同种电荷而相互排斥，并且与水分子的作用加强，从而溶解度增加。 （二）调 pH至等电点 当蛋白质溶液处于等电点 pH 时，蛋白质分子主要以两性离子形式存在，净电荷为零。 此时蛋白质分子失去同种电荷的排斥作用，极易聚集而发生沉淀。 （三）有机溶剂 有些与水互溶的有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮等可使蛋白质产生沉淀，这是由于这 些有机溶剂和水的亲和力大，能夺取蛋白质表面的水化膜，从而使蛋白质的溶解度降低 并产生沉淀。此法也可用于蛋白质的分离、纯化。 以上方法分离制备得到的蛋白质一般仍保持天然蛋白质的生物活性，将其重新溶解 于水仍然能成为稳定的胶体溶液。但用有机溶剂来沉淀分离蛋白质时，需在低温下进行， 在较高温度下进行会破坏蛋白质的天然构象。 （四）重金属盐 当蛋白质溶液的 pH 大于其等电点时，蛋白质带负电荷，可与重金属离子（如 Cu 2+、 Hg 2+、Pb 2+、Ag +等）结合形成不溶性的蛋白盐而沉淀。 （五）生物碱试剂 生物碱是植物组织中具有显著生理作用的一类含氮的碱性物质。能够沉淀生物碱的 试剂称为生物碱试剂。生物碱试剂都能沉淀蛋白质，如单宁酸、苦味酸、三氯乙酸等都 能沉淀生物碱。因为一般生物碱试剂都为酸性物质，而蛋白质在酸性溶液中带正电荷， 所以能和生物碱试剂的酸根离子结合形成溶解度较小的盐类而沉淀。 三、蛋白质的变性与复性 蛋白质因受某些物理或化学因素的影响，分子的空间构象被破坏，从而导致其理化 性质发生改变并失去原有的生物学活性的现象称为蛋白质的变性作用（denaturation）。变 性作用并不引起蛋白质一级结构的破坏，而是二级结构以上的高级结构的破坏，变性后 的蛋白质称为变性蛋白。 引起蛋白质变性的因素很多，物理因素有高温、紫外线、X-射线、超声波、高压、 剧烈的搅拌、震荡等。化学因素有强酸、强碱、尿素、胍盐、去污剂、重金属盐（如 Hg 2+、 Ag +、Pb 2+等）三氯乙酸，浓乙醇等。不同蛋白质对各种因素的敏感程度不同。 蛋白质变性后许多性质都发生了改变，主要有以下几个方面： （一）生物活性丧失 蛋白质的生物活性是指蛋白质所具有的酶、激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的 载氧能力等生物学功能。生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。有时蛋白质的空间结 构只有轻微变化即可引起生物活性的丧失。 （二）某些理化性质的改变 蛋白质变性后理化性质发生改变，如溶解度降低而产生沉淀，因为有些原来在分子