即 © s 将ES代入V=kES中，则有： k2[E]I[S] V=k地+S) 设K。=k-业，并设Vm=kE 则 v-长 V≈ S=KS,放V与S成直线关系。 K 底物浓度足够大时候，即S]>10OK时，则K+母≈[S],代入米氏方程式后： vv IS] V达到极限值V.如果底物浓度为中等数值，V不内，表现为曲线的弯曲 部分（见图42中的AB段）· 将保氏宽避行整理后，可得 K=S号-D 当酶促反应处于V=)V时，则 由此得知，K值是反v)达到最大反应速度心 ·半时的底物浓度（单 位为molL或nmol/L),这便是米氏常数的物理意义，这种关系可参看图4-2的OA段。米 氏常数是酶的特征常数，只与酶的性质有关，不受底物浓度和酶浓度的影响。不同酶K 值不同。可从手册中查得作用于不同底物时各种酶的K值，也可以根据测得的K来鉴别 酶.如脲酶的Km=25mmol/L,苹果酸酶K.=0.05mmol/L。各种酶的Km值在110-$~1molL 或更高一些的区间，大多数在103~105molL之间。Km值作为常数只是对一定的底物 定H值和一定温度条件而言。Km的大小近似地反映了醇与底物结合成中间产物的难易 上时所需店 物浓度也 这意 气底物 可的养 以催化几 发生 化物儿是的适底物 有 萄萄糖 知里 K值分别为1510molL和1.510mo 由此知，萄萄糖是糖溢的适底物】 111111 即 [ES] = k1[Et][S] k―l +k2+k1[S] = [Et][S] k―l +k2 k1 +[S] 将[ES]代入V = k2[ES]中，则有： V = k2 [Et][S] k- ―l +k2 k1 +[S] 设Km = k -1+k2 k1 ，并设Vmax = k2[Et] 则 V = Vmax[S] Km+[S] 这就是著名的米氏方程，Km为米氏常数，它是酶的重要参数，是酶的特征性常数。 应用米氏方程可以圆满地说明图4-2中的V-[S]变化曲线。 底物浓度很低时，即[S]＜0.01Km时，则Km ＋[S] ≈ Km，代入米氏公式后： V ≈ Vmax[S] Km = K[S]，故V与[S]成直线关系。 底物浓度足够大时候，即[S] > 100Km时，则 Km + [S] ≈ [S]，代入米氏方程式后： V ≈ Vmax[S] [S] ≈ Vmax V 达到极限值Vmax。如果底物浓度为中等数值，V∝ [S] Km + [S] ，表现为曲线的弯曲 部分（见图4-2中的AB段）。 （三）米氏常数 将米氏方程式进行整理后，可得： Km = [S]（ Vmax V －1） 当酶促反应处于V= 1 2 Vmax时，则 Km = [S] 由此得知，Km值是反应速度（V）达到最大反应速度（Vmax）一半时的底物浓度（单 位为mol/L或mmol/L），这便是米氏常数的物理意义，这种关系可参看图4-2的OA段。米 氏常数是酶的特征常数，只与酶的性质有关，不受底物浓度和酶浓度的影响。不同酶Km 值不同。可从手册中查得作用于不同底物时各种酶的Km值，也可以根据测得的Km来鉴别 酶。如脲酶的Km=25mmol/L，苹果酸酶Km=0.05mmol/L。各种酶的Km值在1 10 －8～1mol/L 或更高一些的区间，大多数在10 －3～10 －5 mol/L之间。Km值作为常数只是对一定的底物、 一定pH值和一定温度条件而言。Km的大小近似地反映了酶与底物结合成中间产物的难易 程度。Km值大，表明达到Vmax的一半时所需底物浓度也大，这意味着酶与底物之间的亲 和力弱；反之，Km值小，则表明酶与底物的亲和力强。显然，最适底物与酶的亲和力最 大。如果一种酶可以催化几种底物发生反应，就必然对每一种底物，各有一个特定的Km 值，其中Km值最小的底物是该酶的最适底物。如葡萄糖和果糖都是己糖激酶的底物，其 Km值分别为1.5 10 －4 mol/L和1.5 10 －3 mol/L，由此可知，葡萄糖是己糖激酶的最适底物