(14)半固体琼脂 ①成分：牛肉音0.3g,蛋白陈1.0g氯化钠0.5g,琼脂0.35g~0.4g,蒸馏水100 L ②制法：按以上成分配好，煮沸溶解，调节pH7.440.2。分装小试管。121℃高压灭菌 15min。直立凝個备用。 注：供动力观察、菌种保存、H抗原位相变异试验等用。 (15)丙二酸钠培养基 ①成分：酵母浸音1.0g,硫酸铵20g,磷酸氢二钾0.6g,磷酸二氢钾04g,氯化钠 20股码债秀年莱农人际.分状 管，121℃高压灭茵15minm。 ③试验方法：用新鲜的琼脂培养物接种，于36℃±1℃培养48h,观察结果。阳性者由 绿色变为蓝色。 (16)沙门氏茵0和诊断血清 (17)生化鉴定试剂盒。 3.检验程序沙门氏菌检验程序见图1-3-1。 (1)前增菌：称取25g(mL)样品放入盛有225 mLBPW的无菌均质杯中，以8000 tmin一10Oo0rmin均质1min一2min,或置于盛有225 mLBPW的无菌均质袋中，用拍击 式均质器拍打1m ~2min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH,用1 0 mL无菌 或HCI调pH至6.802。无菌操作将样品转至500mL维形瓶中 如使用均 质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培养8h一18。如为冷冻产品，应在45℃以下不超过 15min,或2℃~5℃不超过18h解冻。 (2)增菌：轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL,转种于10 mLTTB内，于 42℃±1℃培养18h~24h。同时，另取1mL,转种于10mLSC内，于36℃±1℃培养18h 24h (3)分离：分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD 琼脂平板（或HE琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板）。于36℃1℃分别培养18h 24h(XLD琼脂平板、HE琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板)或40h~48h(BS 琼脂平板)，观察各个平板上生长的菌落，各个平板上的菌落特征见表131。 ①自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，分别接种三糖铁琼脂，先 在斜面划线，再于底层穿刺：接种针不要灭菌，直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养 琼脂平板，于36C±1℃培养18h~24h,必要时可延长至48h。在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧 酶试验培养基内，沙门氏菌属的反应结果见表1-3-2。 （14）半固体琼脂 ① 成分：牛肉膏0.3 g，蛋白胨1.0 g，氯化钠0.5 g，琼脂0.35g～0.4 g，蒸馏水100 mL。 ② 制法：按以上成分配好，煮沸溶解，调节pH 7.4±0.2。分装小试管。121℃高压灭菌 15 min。直立凝固备用。 注：供动力观察、菌种保存、H 抗原位相变异试验等用。 （15）丙二酸钠培养基 ① 成分：酵母浸膏1.0 g，硫酸铵2.0 g，磷酸氢二钾0.6 g，磷酸二氢钾0.4 g，氯化钠 2.0 g，丙二酸钠3.0 g，0.2％溴麝香草酚蓝溶液12.0 mL，蒸馏水1 000 mL。 ② 制法：除指示剂以外的成分溶解于水，调节pH 6.8±0.2，再加入指示剂，分装试 管，121℃高压灭菌15 min。 ③ 试验方法：用新鲜的琼脂培养物接种，于36℃±1℃培养48 h，观察结果。阳性者由 绿色变为蓝色。 （16）沙门氏菌O和H诊断血清。 （17）生化鉴定试剂盒。 3. 检验程序 沙门氏菌检验程序见图1-3-1。 （1）前增菌：称取25 g（mL）样品放入盛有225 mL BPW 的无菌均质杯中，以8 000 r/min～10 000 r/min 均质1 min～2 min，或置于盛有225 mL BPW 的无菌均质袋中，用拍击 式均质器拍打1 min～2 min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH，用1 mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2。无菌操作将样品转至500 mL锥形瓶中，如使用均 质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培养8 h～18h。如为冷冻产品，应在45℃以下不超过 15 min，或2℃～5℃不超过18 h 解冻。 （2）增菌：轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1 mL，转种于10 mL TTB 内，于 42℃±1℃培养18 h～24h。同时，另取1 mL，转种于10 mL SC 内，于36℃±1 ℃培养18 h～ 24 h。 （3）分离：分别用接种环取增菌液1 环，划线接种于一个BS 琼脂平板和一个XLD 琼脂平板（或HE 琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板）。于36℃±1℃分别培养18 h～ 24 h（XLD 琼脂平板、HE 琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板） 或40 h～48 h（BS 琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落，各个平板上的菌落特征见表1-3-1。 （4）生化试验 ① 自选择性琼脂平板上分别挑取2 个以上典型或可疑菌落，分别接种三糖铁琼脂，先 在斜面划线，再于底层穿刺；接种针不要灭菌，直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养 琼脂平板，于36℃±1℃培养18 h～24 h，必要时可延长至48 h。在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧 酶试验培养基内，沙门氏菌属的反应结果见表1-3-2