D0:CNK:23-1480/S20110701.1325.008网络出版时间：2011G7-d1125 植物研究201,315)：558-562 Bulletin of Botanical Research 网络出版地址：httpp///wwwrikniet6 losdisfdi(a/2Q.803.20UWD1025.D885h0n8.html 大花蕙兰多倍体的高效诱导 季必霞陈达伟张晨晨1闵笛黄文静王钰23· (1.安徽大学生命科学学院，合肥230039：2.安徽大学资源与环境工程学院，合肥230039：3.安徽省中药材产业研发中心，合肥230039) 摘要以大花蕙兰“红瀑布'无菌苗丛芽为材料、秋水仙素为诱变剂，采用不同的处理浓度、时间诱导大花蕙兰体 细胞加倍。通过形态学和细胞学观察、统计等方法对其进行倍性鉴定。结果表明：秋水仙素浓度0.05%，处理时间 24h的条件下，诱导率高达28.2%：多倍体苗外部形态、叶绿体数目、气孔数目和大小与二倍体差异大，加倍后的细 胞核明显变大，染色体倍数增加。 关键词大花蕙兰：秋水仙素：化学诱变：多倍体 中图分类号：S682.29文献标识码：A文章编号：1673-5102(2011)05-0558-05 High Efficient Polyploid Induction of Cymbidium hybridium JI Bi-Xia'CHEN Da-Wei ZHANG Chen-Chen'MIN Di'HUANG Wen-Jing'WANG Yu2.3* (1.College of Life Science,Anhui University,Hefei 230039:2.College of Resources and Environmental Engineering,Anhui University,Hefei 230039:3.Anhui Research Centre of Chinese Medicinal Materials industry,Hefei 230039) Abstract The shoots of Cymbidium hybridium were soaked in colchicine solutions at different concentrations and treatment times to induce doubling of body cell chromosome.Ploidy levels were identified by morphological and cytological traits.The results showed that the treated shoots of C.hybridium with 0.05%colchicine for 24 h had a higher inducing rate which was up to 28.2%.The external morphology,the number of chloroplast as well as the number and size of stomata were obviously different between the diploid and polyploid.The nucleus of pol- yploid cell was obviously bigger and the number of chromosome was increased. Key words Cymbidium hybridium:colchicine:chemical induction:polyploid 大花蕙兰(Cymbidium hybridium)是兰科(Or- 性强、株型奇特等特征，更有观赏价值。近年来很 chidaceae)兰属(Cymbidium)中的一部分大花附生 多研究机构先后对春兰[s)、三色董6]、菊花脑]及 种类及其杂交种，是世界上栽培较为普及的“祥 地锦]等观赏植物进行了染色体加倍与新品种选 兰”之一，具有重要的观赏价值、经济价值和广阔 育的研究，并取得了一定进展。 的市场前景。 目前对大花蕙兰组培快繁进行了研究，一些品 目前国内大花蕙兰的育种研究仍是以杂交方法 种已建立了脱毒快繁体系91]，但在多倍体育种 为主。使用传统的育种技术所需周期较长，同时受到 方面研究较少。杨丽娟等山对大花蕙兰‘红宝石' 自然、季节等环境因素限制。常规的杂交方法难以打 进行了秋水仙素处理，获得了大量变异植株。王木 破生物物种的限制，某些优良性状难以得以利用】。 桂等]对大花蕙兰新品种日出'进行了秋水仙素 应用组织培养技术结合秋水仙素诱变处理，是 处理，建立了该品种的多倍体诱导和倍性鉴定技术 植物新品种选育的一条重要的育种途径，具独特的 体系。本试验以大花蕙兰无菌苗丛芽为材料，采用 优势和发展潜力2-1。秋水仙素在诱导植物产生 秋水仙素浸泡法，以获取大花蕙兰多倍体，旨在探 多倍体方面的研究成果较多，将加倍技术应用于靠 索大花蕙兰多倍体高效诱导和鉴定的方法，为大花 无性繁殖的花卉所产生的多倍体具有器官巨大、抗 蕙兰多倍体育种提供科学依据和技术基础。 基金项目：安徽省外专局项目(S20093400190) 第一作者简介：季必霞(1984一)，女，硕士研究生，主要从事细胞工程研究。 ·通讯作者 收稿日期：2011-04-17书 !"#$ "#$$，%$（&）：&&’ ( &)" !"##$%&’ () !(%*’&+*# ,$-$*.+/ %&’(：)*+,-.’(（*"##+%,##$+#） /01234：567（$+’,—），8，9:#$;，<=>?@ABC#$。 ! DE12 FGHI："#$$ - #, - $. !"#$%&’()*+, !"#$ $%&$ ’(($ ) *$ +,-$ . /"，%! （!/ )*JK;LMKKN，OP "%##%+；"/ )*JKQRSTUBCKN，OP "%##%+；#/ )*+VWXYZ#[V\，OP "%##%+） - . ]J^_‘‘abc’defghiXj、klmniopq，rstuvwxyz、{|o}J^_‘~ @A€。D‚ƒK„@AK…†、‡ˆ‰Š‹ŒŽ€‘’。•：klmnyz #/ #&0 ，wx{| ", 1 v™，o}š›œ "’/ "0 ；€~f,ž‚ƒ、Ÿ ~¡(、¢£¡(„J¤S¥€~¦§J，€¨v@ A©ªpJ，«¬~€¡­。 /01 J^_‘；klmn；®Kop；€~ 23456：*)’"/ " 2 + 789:;：3 7<=6：$).% - &$#"（"#$$）#& - #&&’ - #& $%&’ ())%*%+,- ./0120/%3 4,35*-%/, /) 0123&4&"2 /13.&4&"2 45 67897: $ ;<=> ?:8@A7 $ B<3>C ;1AD8;1AD$ E5> ?7 $ <F3>C @AD847DG $ @3>C HI"，%! （!/ ;JKKAGA JL M7LA *N7ADNA，3D1I7 FD7OAPQ7RS，<ALA7 "%##%+；"/ ;JKKAGA JL TAQJIPNAQ :DU =DO7PJDVADR:K =DG7DAAP7DG，3D1I7 FD7OAPQ7RS，<ALA7 "%##%+；#/ 3D1I7 TAQA:PN1 ;ADRPA JL ;17DAQA EAU7N7D:K E:RAP7:KQ 7DUIQRPS，<ALA7 "%##%+） 678-9:*- W1A Q1JJRQ JL !"#$%&%’# ("$)%&%’# XAPA QJ:YAU 7D NJKN17N7DA QJKIR7JDQ :R U7LLAPADR NJDNADRP:R7JDQ :DU RPA:RVADR R7VAQ RJ 7DUINA UJIZK7DG JL ZJUS NAKK N1PJVJQJVA/ [KJ7US KAOAKQ XAPA 7UADR7L7AU ZS VJP\1JKJG7N:K :DU NSRJKJG7N:K RP:7RQ/ W1A PAQIKRQ Q1JXAU R1:R R1A RPA:RAU Q1JJRQ JL !* ("$)%&%’# X7R1 #/ #&0 NJKN17N7DA LJP ", 1 1:U : 17G1AP 7DUIN7DG P:RA X17N1 X:Q I\ RJ "’/ "0 / W1A A]RAPD:K VJP\1JKJGS，R1A DIVZAP JL N1KJPJ\K:QR :Q XAKK :Q R1A DIVZAP :DU Q7^A JL QRJV:R: XAPA JZO7JIQKS U7LLAPADR ZARXAAD R1A U7\KJ7U :DU \JKS\KJ7U/ W1A DINKAIQ JL \JK8 S\KJ7U NAKK X:Q JZO7JIQKS Z7GGAP :DU R1A DIVZAP JL N1PJVJQJVA X:Q 7DNPA:QAU/ ;+1 </938 !"#$%&%’# ("$)%&%’#；NJKN17N7DA；N1AV7N:K 7DUINR7JD；\JKS\KJ7U J^_‘（!"#$%&%’# ("$)%&%’#）¯‘M（_P8 N17U:NA:A）‘°（!"#$%&%’#）Vv0ž±J^²; ³´µ¶·³，¯¸¹º»¼½i¾µv“¿ ‘”À0，ÁÂÃ=v…ÄÅÆ、ÇÈÅƄÉÊ vËÌÍÎ。 (ÍÏÐJ^_‘vѳ#$Ò¯]¶·Š‹ i<。ÓsԇvѳÕÖ×ØÙI½Ú，u{ÛÜ ÝÞ、5߉TUànáâ。ãäv¶·Š‹å]æ ç;""³váâ，èéêëìå]í]îs［$］ 。 ïsðñ¼òÕÖOklmnopwx，¯ !"óô³õÑv0Ã=vѳö÷，Áøùv êú„[ûüý［" ( ,］ 。klmnþo}!"Y; €~Šÿv#$!½，"€ÕÖïs#$ d%&v^’×Y;v€~ÁÂ()*J、+ ,、-./ù‰ù0，1…ÄÅÆ。2345 #$678¨Œ9‘［&］ 、:¬;［)］ 、<^=［.］ µ >?［’］ ‰…Ä!"Ž@«¬~€Sóô³õ Ñv#$，ABí@0’Žû。 (͌J^_‘ð¼C%Ž@#$，0éô ³DEF@GHC%~I［+ ( $#］ ，Jþ€~ѳ Šÿ#$½K。LMN‰［$$］ ŒJ^_‘‘aOP’ Ž@klmnwx，Qí@JRp§!-。ST U‰［$"］ ŒJ^_‘óô³‘HV’Ž@klmn wx，EF@Wô³v€~o}„€‘’ÕÖ ~I。XYZ]J^_‘defghiXj，rs klmn[\‹，]QBJ^_‘€~，]þ^ _J^_‘€~›‘o}„‘’vŠ‹，iJ^ _‘€~ѳabMKcd„ÕÖ%e。 DOI：CNKI:23-1480/S.20110701.1325.008 网络出版时间：2011-07-01 13:25 网络出版地址： http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1480.S.20110701.1325.008.html 2011-7-1 13:25 http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1480.s.20110701.1325.008.html