13.胎儿血红蛋白与2,3-二磷酸甘油(2,3-DPG)的结合力较弱。 14血红蛋白与氧的结合能力随pH降低而增高 15由于一级结构可以决定空间结构,基因工程表达的肽链一定可以自然地形成天然构 象。 16测定别构酶的相对分子质量可以用SDS-PAGE。 17.当溶液的pH小于某蛋白质的pl时,该蛋白质在电场中向阳极移动 18用凝胶过滤分离蛋白质,小分子蛋白由于所受的阻力小首先被洗脱出来。 19.若蛋白质与阴离子交换剂结合较牢,可用增加NaCI浓度或降低pH的方法将其从层 析柱洗脱出来。 20糖蛋白的N-糖肽键是指与天冬酰胺的γ-酰胺N原子与寡糖链形成糖苷链。 23糖蛋白的O糖肽键是指氨基酸残基的羧基O原子与寡糖链形成的糖苷键。 (五)分析和计算题 1判断氨基酸所带的净电荷,用plpH比ph-pl更好,为什么? 2.分别计算谷氨酸、精氨酸和丙氨酸的等电点 3在下面指出的pH条件下,下列蛋白质在电场中向哪个方向移动?A表示向阳极,B 表示向阴极,C表示不移动。人血清蛋白:pH5.5,pHB3.5;血红蛋白:pH7.07,pH9.0;胸 腺组蛋白:pH5.0,pH80,pH1l5;已知:人血清蛋白的pl=464血红蛋白的pl=7.07胸 腺组蛋白的pl=10.8 4简述蛋白质溶液的稳定因素,和实验室沉淀蛋白质的常用方法。 5简要叙述蛋白质形成寡聚体的生物学意义。 6在体外,用下列方法处理,对血红蛋白与氧的亲和力有何影响?(1)pH值从70增 加到74;(2)CO2分压从1000Pa增加到4000Pa:(3)O2分压从6000Pa下降到2000Pa (4)2,3-二磷酸甘油酸的浓度从8×10moL下降到2×10oL:(5)a2B2解聚成单个亚基 7胎儿血红蛋白(HbF)在相当于成年人血红蛋白(HbA)B链143残基位置含有Ser, 而成年人B链的这个位置是具阳离子的His残基。残基143面向B亚基之间的中央空隙。(1) 为什么2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)同脱氧HbA的结合比同脱氧HbF更牢固?(2) HbF对2,3-BPG低亲和力如何影响到HbF对氧的亲和力?这种差别对于氧从母体血液向 胎儿血液的运输有何意义。 8试述蛋白质二级结构的三种基本类型。 9蛋白质变性后,其性质有哪些变化? 10.为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。(1)在低pH值时沉淀。(2)当离 子强度从零逐渐増加时,其溶解度开始増加,然后下降,最后出现沉淀。(3)在一定的离子 强度下,达到等电点pH值时,表现出最小的溶解度。(4)加热时沉淀。(5)加入一种可和 水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数,导致溶解度的减小。(6)如果加入一种非极性 强的溶剂。使介电常数大大地下降会导致变性。 1l凝胶过滤和SDS-PAGE均是利用凝胶,按照分子大小分离蛋白质的,为什么凝胶过 滤时,蛋白质分子越小,洗脱速度越慢,而在SDS-PAGE中,蛋白质分子越小,迁移速度 越快? 12.已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%(按质量计),色氨酸相对分子质量为204。(1) 计算牛血清白蛋白的最低相对分子质量(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白相对分子质量大 约为7万,问牛血清白蛋白分子中含几个色氨酸残基? 参考答案13.胎儿血红蛋白与 2,3-二磷酸甘油(2,3—DPG)的结合力较弱。 14.血红蛋白与氧的结合能力随 pH 降低而增高。 15.由于一级结构可以决定空间结构,基因工程表达的肽链一定可以自然地形成天然构 象。 16.测定别构酶的相对分子质量可以用 SDS-PAGE。 17.当溶液的 pH 小于某蛋白质的 pI 时,该蛋白质在电场中向阳极移动。 18.用凝胶过滤分离蛋白质,小分子蛋白由于所受的阻力小首先被洗脱出来。 19.若蛋白质与阴离子交换剂结合较牢,可用增加 NaCI 浓度或降低 pH 的方法将其从层 析柱洗脱出来。 20.糖蛋白的 N-糖肽键是指与天冬酰胺的 γ-酰胺 N 原子与寡糖链形成糖苷链。 23.糖蛋白的 O-糖肽键是指氨基酸残基的羧基 O 原子与寡糖链形成的糖苷键。 (五)分析和计算题 1.判断氨基酸所带的净电荷,用 pI-pH 比 pH-pI 更好,为什么? 2.分别计算谷氨酸、精氨酸和丙氨酸的等电点。 3.在下面指出的 pH 条件下,下列蛋白质在电场中向哪个方向移动?A 表示向阳极,B 表示向阴极,C 表示不移动。人血清蛋白:pH5.5,pH3.5;血红蛋白:pH7.07,pH9.0;胸 腺组蛋白:pH5.0,pH8.0,pH11.5;已知:人血清蛋白的 pI=4.64 血红蛋白的 pI=7.07 胸 腺组蛋白的 pI=10.8。 4.简述蛋白质溶液的稳定因素,和实验室沉淀蛋白质的常用方法。 5.简要叙述蛋白质形成寡聚体的生物学意义。 6.在体外,用下列方法处理,对血红蛋白与氧的亲和力有何影响?(1)pH 值从 7.0 增 加到 7.4;(2) CO2 分压从 1000 Pa 增加到 4 000 Pa;(3) O2 分压从 6000 Pa 下降到 2000 Pa; (4)2,3-二磷酸甘油酸的浓度从 8×10-4mol/L 下降到 2×10-4 ol/L;(5)α2β2 解聚成单个亚基。 7.胎儿血红蛋白(Hb F)在相当于成年人血红蛋白(Hb A) 链 143 残基位置含有 Ser, 而成年人 链的这个位置是具阳离子的 His 残基。残基 143 面向 亚基之间的中央空隙。(1) 为什么 2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)同脱氧 Hb A 的结合比同脱氧 Hb F 更牢固?(2) Hb F 对 2,3-BPG 低亲和力如何影响到 Hb F 对氧的亲和力?这种差别对于氧从母体血液向 胎儿血液的运输有何意义。 8.试述蛋白质二级结构的三种基本类型。 9.蛋白质变性后,其性质有哪些变化? 10.为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。(1)在低 pH 值时沉淀。(2)当离 子强度从零逐渐增加时,其溶解度开始增加,然后下降,最后出现沉淀。(3)在一定的离子 强度下,达到等电点 pH 值时,表现出最小的溶解度。(4)加热时沉淀。(5)加入一种可和 水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数,导致溶解度的减小。(6)如果加入一种非极性 强的溶剂。使介电常数大大地下降会导致变性。 11.凝胶过滤和 SDS-PAGE 均是利用凝胶,按照分子大小分离蛋白质的,为什么凝胶过 滤时,蛋白质分子越小,洗脱速度越慢,而在 SDS-PAGE 中,蛋白质分子越小,迁移速度 越快? 12.已知牛血清白蛋白含色氨酸 0.58%(按质量计),色氨酸相对分子质量为 204。(1) 计算牛血清白蛋白的最低相对分子质量(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白相对分子质量大 约为 7 万,问牛血清白蛋白分子中含几个色氨酸残基? 参考答案