堆积时要留有空隙，物品不要摆放得太挤，以免妨碍空气流通，灭茵物品不要接触电热 干燥箱内壁的铁板、温度探头，以防包装纸烤焦起火。 2. 老通电源 ,打开开关，适当打开电热干燥箱顶部的排气孔，旋动恒温调节器。 温度逐步上升 当温度升至100℃时，关闭排气孔。在升温过程中， 如果红灯炮灭， 灯亮，表示电热干燥箱内停止加温，此时如果还未达到所需的160℃~170℃，则需要转 动温度调节器使红打亮，如此反复调节，直至达到所需的温度。 3相温：当温度升到160℃10C时，借助相温调节器的自动梯制，保持出温度h。于热 灭菌过程中，严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故 4. 降温：切断电源， 自然降温 5.开箱取物：待电热干操箱内温度峰到60℃以下后，才能打开箱门，取出灭菌物品。同时 应将温度调节旋钮调到零点，并打开排气孔。电热干燥箱内温度未降到60℃以前，切勿 自行打开箱门，以免骤然降温导致玻璃器皿炸裂 (二)高压蒸汽灭菌 高压恭汽灭菌 是将物品放在密闭的高压蒸汽灭菌锅内，在 一定的压力下保持15~30分钟 进行灭菌。此法适用于培养基、无菌水、工作服等物品的灭菌，也可用于玻璃器皿的灭菌， 将待灭菌的物品放在 一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭茵锅夹套间的水沸腾而 产生蒸汽。待水蒸汽急刷地将锅内的冷空气从排气阀中排尽，然后关闭排气阀，继续加热， 此时由干蒸汽不能出，而增加了灭菌锅内的压力，从而伸沸点增高，获得高于100℃的温 度，导致茵体蛋白质凝固变性 达到灭菌的日的 在相同的温度下 ,湿热灭菌的效果好于干热灭菌。有三点原因：在湿热灭菌中菌体吸收 水分，蛋白质容易凝固变性，蛋白质随着含水量的增加，所需凝固温度降低：湿热灭菌中燕 汽的穿透力比干燥空气大：蒸汽在被灭菌物体表面凝结，释放出大量的汽化潜热，能迅速提 高灭菌物体表面的温度，从而增加灭菌效力。 实验室常用的灭菌锅有非自控手提式高压蒸汽灭菌锅和自控式灭菌锅，其结构和工作原 理是相同的。本实验介绍的是非自控手提式高压蒸汽灭菌锅，自控式灭菌锅的使用可参考 家说明书。具体操作步骤如下： 1加水：首先将内层锅取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面没过加热蛇管，与三角 搁架相平为宜。切勿忘记检查水位，加水量过少，灭菌锅会发生烧干引起炸裂事故 装料：放回内层锅，并装入待灭菌的物品。注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影 响灭菌效果。装有培养基的容器放置时要防止液体溢出，三角瓶与试管口端均不要与桶 壁接触，以免冷凝水淋湿包扎的纸而透入棉塞。 3. 加盖：将盖上与排气孔相连的排气软管插入内层锅的排气槽内，摆正锅盖，对齐螺口， 然后以对称方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气，并打开排气阀。 4. 排气：打开电源加热灭菌锅，将水煮沸，使锅内的冷空气和水蒸汽一起从排气孔中排出。 般认为当排出的气流很强并有嘘声时，表明锅内的空气已排尽，沸腾后约需5分钟 升压：冷空气完全排尽后，关闭排气阀，继续加热， 锅内压力开始上升 6. 保压：当压力表指针达到所需压力时，控制电源，开始计时并维持压力至所需的时间。 如本实验中采用0.1Mpa,121.5℃，20分钟灭菌。 灭菌的主要因素是温度而不是压力，因此锅内的冷空气必须完全排尽后，才能关闭排气 阀，维持所需压力 7 降压：达到灭菌所需的时间后 切断电源，让灭茵锅温度自然下降，当压力表的压力 至“0”后，方可打开排气阀，排尽余下的蒸汽，旋松螺栓，打开锅盖，取出灭菌物品 倒掉锅内剩水。压力一定要降到“0”后，才能打开样气阀，开盖取物。否则就会因锅 内压力突然下降，使容器内的培养基或试剂由于内外压力不平衡而冲出容器口，造成瓶 堆积时要留有空隙，物品不要摆放得太挤，以免妨碍空气流通，灭菌物品不要接触电热 干燥箱内壁的铁板、温度探头，以防包装纸烤焦起火。 2. 升温：接通电源，打开开关，适当打开电热干燥箱顶部的排气孔，旋动恒温调节器，使 温度逐步上升。当温度升至 100℃时，关闭排气孔。在升温过程中，如果红灯熄灭，绿 灯亮，表示电热干燥箱内停止加温，此时如果还未达到所需的 160℃~170℃，则需要转 动温度调节器使红灯亮，如此反复调节，直至达到所需的温度。 3. 恒温：当温度升到 160℃~170℃时，借助恒温调节器的自动控制，保持此温度 2h。干热 灭菌过程中，严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故。 4. 降温：切断电源，自然降温。 5. 开箱取物：待电热干燥箱内温度降到 60℃以下后，才能打开箱门，取出灭菌物品。同时， 应将温度调节旋钮调到零点，并打开排气孔。电热干燥箱内温度未降到 60℃以前，切勿 自行打开箱门，以免骤然降温导致玻璃器皿炸裂。 （二）高压蒸汽灭菌 高压蒸汽灭菌是将物品放在密闭的高压蒸汽灭菌锅内，在一定的压力下保持 15~30 分钟 进行灭菌。此法适用于培养基、无菌水、工作服等物品的灭菌，也可用于玻璃器皿的灭菌。 将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅夹套间的水沸腾而 产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中排尽，然后关闭排气阀，继续加热， 此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，获得高于 100℃的温 度，导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 在相同的温度下，湿热灭菌的效果好于干热灭菌。有三点原因：在湿热灭菌中菌体吸收 水分，蛋白质容易凝固变性，蛋白质随着含水量的增加，所需凝固温度降低；湿热灭菌中蒸 汽的穿透力比干燥空气大；蒸汽在被灭菌物体表面凝结，释放出大量的汽化潜热，能迅速提 高灭菌物体表面的温度，从而增加灭菌效力。 实验室常用的灭菌锅有非自控手提式高压蒸汽灭菌锅和自控式灭菌锅，其结构和工作原 理是相同的。本实验介绍的是非自控手提式高压蒸汽灭菌锅，自控式灭菌锅的使用可参考厂 家说明书。具体操作步骤如下： 1. 加水：首先将内层锅取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面没过加热蛇管，与三角 搁架相平为宜。切勿忘记检查水位，加水量过少，灭菌锅会发生烧干引起炸裂事故。 2. 装料：放回内层锅，并装入待灭菌的物品。注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影 响灭菌效果。装有培养基的容器放置时要防止液体溢出，三角瓶与试管口端均不要与桶 壁接触，以免冷凝水淋湿包扎的纸而透入棉塞。 3. 加盖：将盖上与排气孔相连的排气软管插入内层锅的排气槽内，摆正锅盖，对齐螺口， 然后以对称方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气，并打开排气阀。 4. 排气：打开电源加热灭菌锅，将水煮沸，使锅内的冷空气和水蒸汽一起从排气孔中排出。 一般认为当排出的气流很强并有嘘声时，表明锅内的空气已排尽，沸腾后约需 5 分钟。 5. 升压：冷空气完全排尽后，关闭排气阀，继续加热，锅内压力开始上升。 6. 保压：当压力表指针达到所需压力时，控制电源，开始计时并维持压力至所需的时间。 如本实验中采用 0.1Mpa，121.5℃，20 分钟灭菌。 灭菌的主要因素是温度而不是压力，因此锅内的冷空气必须完全排尽后，才能关闭排气 阀，维持所需压力。 7. 降压：达到灭菌所需的时间后，切断电源，让灭菌锅温度自然下降，当压力表的压力降 至“0”后，方可打开排气阀，排尽余下的蒸汽，旋松螺栓，打开锅盖，取出灭菌物品， 倒掉锅内剩水。压力一定要降到“0”后，才能打开排气阀，开盖取物。否则就会因锅 内压力突然下降，使容器内的培养基或试剂由于内外压力不平衡而冲出容器口，造成瓶