64 制显色的时间和温度一致。一般显色时间为 10－30min，温度 10－25℃ 显色比较稳定，高于 30℃结果偏低。 实训六、小麦粉中过氧化苯甲酰的测定（气相色谱法） 一、目的 熟练掌握气相色谱操作技术。 二、原理 小麦粉中的过氧化苯甲酰被还原铁粉和盐酸反应产生的原子态氢还原，生 成苯甲酸，经提取净化后用气相色谱仪测定，然后与标准系列比较定量。 三、试剂 1．乙醚、丙酮、石油醚（沸程 60－90℃） 2．盐酸（1＋1）溶液 3．50g/L 氯化钠溶液 4．还原铁粉 5．10g/L 碳酸钠的 50g/L 氯化钠水溶液：称取 1g 碳酸氢钠溶于 100ml50g/L 氯化钠溶液中。 6．石油醚：乙醚（3＋1）混合溶液 7．苯甲酸标准贮备液：准确称取苯甲酸（基准试剂）0.1000g，用丙酮溶 解并转移至 100ml 容量瓶中后定容，此溶液浓度为 1mg/ml。 8．苯甲酸标准使用液：准确吸取苯甲酸标准贮备溶液 10.00ml 于 100ml 容 量瓶中，用丙酮稀释定容，此溶液浓度为 100μg/ml。 四、仪器和用具 1．气相色谱仪，附有氢火焰离子化检测器。 2．微量注射器：10μl。 2．150ml 具塞三角瓶 150m 分液漏斗 50ml 具塞比色管 五、操作方法 1．样品处理 准确称取试样 5.00g 置于具塞三角瓶中，加入 0.01g 还原铁粉，约 20 粒玻 璃珠（φ6mm 左右）和 20ml 乙醚，混合均匀。逐滴加入 0.5ml 盐酸，回旋摇动， 用少量乙醚冲洗三角瓶内壁后放置过夜（至少 12h），摇匀，静置片刻，将上清 液用快速滤纸滤入 150ml 分液漏斗中。用乙醚洗涤三角瓶内的残渣，每次用 15ml （标准曲线溶液每次用 10ml），共洗涤三次。最后用少量乙醚冲洗过滤漏斗和 滤纸，滤液合并于分液漏斗中。 取 50g/L 氯化钠溶液 30ml 倒入分液漏斗中，回旋摇动 30S，防止气体顶塞， 并适当放气。静止分层后弃去下层水溶液。再用氯化钠溶液重复洗涤一次，弃 去下层水溶液。加入 10g/L 碳酸氢钠的 50g/L 氯化钠水溶液 15ml，回旋摇动 2min （切勿剧烈振荡，以免乳化，并适当放气）。静止分层后，将下层碱液放入 50ml 具塞比色管（预先放置 3－4 药勺固体氯化钠）中。分液漏斗中的醚层再用碱性64 制显色的时间和温度一致。一般显色时间为 10－30min，温度 10－25℃ 显色比较稳定，高于 30℃结果偏低。 实训六、小麦粉中过氧化苯甲酰的测定（气相色谱法） 一、目的 熟练掌握气相色谱操作技术。 二、原理 小麦粉中的过氧化苯甲酰被还原铁粉和盐酸反应产生的原子态氢还原，生 成苯甲酸，经提取净化后用气相色谱仪测定，然后与标准系列比较定量。 三、试剂 1．乙醚、丙酮、石油醚（沸程 60－90℃） 2．盐酸（1＋1）溶液 3．50g/L 氯化钠溶液 4．还原铁粉 5．10g/L 碳酸钠的 50g/L 氯化钠水溶液：称取 1g 碳酸氢钠溶于 100ml50g/L 氯化钠溶液中。 6．石油醚：乙醚（3＋1）混合溶液 7．苯甲酸标准贮备液：准确称取苯甲酸（基准试剂）0.1000g，用丙酮溶 解并转移至 100ml 容量瓶中后定容，此溶液浓度为 1mg/ml。 8．苯甲酸标准使用液：准确吸取苯甲酸标准贮备溶液 10.00ml 于 100ml 容 量瓶中，用丙酮稀释定容，此溶液浓度为 100μg/ml。 四、仪器和用具 1．气相色谱仪，附有氢火焰离子化检测器。 2．微量注射器：10μl。 2．150ml 具塞三角瓶 150m 分液漏斗 50ml 具塞比色管 五、操作方法 1．样品处理 准确称取试样 5.00g 置于具塞三角瓶中，加入 0.01g 还原铁粉，约 20 粒玻 璃珠（φ6mm 左右）和 20ml 乙醚，混合均匀。逐滴加入 0.5ml 盐酸，回旋摇动， 用少量乙醚冲洗三角瓶内壁后放置过夜（至少 12h），摇匀，静置片刻，将上清 液用快速滤纸滤入 150ml 分液漏斗中。用乙醚洗涤三角瓶内的残渣，每次用 15ml （标准曲线溶液每次用 10ml），共洗涤三次。最后用少量乙醚冲洗过滤漏斗和 滤纸，滤液合并于分液漏斗中。 取 50g/L 氯化钠溶液 30ml 倒入分液漏斗中，回旋摇动 30S，防止气体顶塞， 并适当放气。静止分层后弃去下层水溶液。再用氯化钠溶液重复洗涤一次，弃 去下层水溶液。加入 10g/L 碳酸氢钠的 50g/L 氯化钠水溶液 15ml，回旋摇动 2min （切勿剧烈振荡，以免乳化，并适当放气）。静止分层后，将下层碱液放入 50ml 具塞比色管（预先放置 3－4 药勺固体氯化钠）中。分液漏斗中的醚层再用碱性