65 溶液重复提取一次，合并下层溶液于比色管中。加入 0.8ml（1＋1）盐酸溶液， 适当摇动，充分驱除残留的乙醚和反应产生的 CO2 气体（若室温较低时可将比 色管置于 50℃水浴中加热），至管内无乙醚的气味为止。再加入 5.00ml 石油醚 －乙醚（3＋1）混合溶液，充分振摇 1min 后静止分层，弃去下层溶液。 2．绘制标准曲线 准确吸取苯甲酸标准使用液 0.0、1.0、2.0、3.0、4.0 和 5.0ml 分别置于 150ml 具塞三角瓶中，除不加还原铁粉外，其它操作按 1 中“加入约 20 粒玻璃 珠.弃去下层溶液”方法操作。其制备液的最终浓度分别为 0、20、40、60、 80、和 100μg/ml。然后用微量注射器分别取不同浓度的苯甲酸溶液 2.0μl 注 入气相色谱仪中。以其苯甲酸峰面积为纵坐标，苯甲酸浓度为横坐标，绘制标 准曲线。 3．测定 色谱条件：内径 3mm、长 2m 的玻璃柱，填装涂布 5%（m/m）DEGS＋1%磷酸 固定液的（60－80 目）Chromosorb W/AW DMCS。调节载气（氮气）流速，使苯 甲酸于（5－10）min 内出峰。柱温为 180℃，检测器和进样口温度为 250℃。 不同型号仪器调整为最佳工作条件。 进样测定：用 10μl 微量注射器取 2.0μl 测定液，注入气相色谱仪中，取 试样的苯甲酸峰面积与标准曲线比较定量。 4．结果计算 X＝ 1000 5   m C ×0.992 （3－9） 式中：X――试样中的过氧化苯甲酰含量，g/kg； C――由标准曲线上查出的试样被测液中相当于苯甲酸溶液的浓,μ g/ml； m――样品的质量，g； 0.992――苯甲酸换算成过氧化苯甲酰的换算系数。 实训七、饮料中苯甲酸钠、糖精钠含量的测定（高效液相色谱法） 一、目的 1、学习及了解高效液相色谱仪的工作原理及操作要点。 2、掌握高效液相色谱法测定糖精钠、苯甲酸钠的原理及方法。 3、学会使用高效液相色谱仪、学会以识别色谱图。 二、原理 样品加热除去二氧化碳和乙醇，调节 PH 至近中性后，过滤，然后经高效液 相色谱仪反相色谱分离，根据保留时间和峰面积进行定性定量。 三、试剂65 溶液重复提取一次，合并下层溶液于比色管中。加入 0.8ml（1＋1）盐酸溶液， 适当摇动，充分驱除残留的乙醚和反应产生的 CO2 气体（若室温较低时可将比 色管置于 50℃水浴中加热），至管内无乙醚的气味为止。再加入 5.00ml 石油醚 －乙醚（3＋1）混合溶液，充分振摇 1min 后静止分层，弃去下层溶液。 2．绘制标准曲线 准确吸取苯甲酸标准使用液 0.0、1.0、2.0、3.0、4.0 和 5.0ml 分别置于 150ml 具塞三角瓶中，除不加还原铁粉外，其它操作按 1 中“加入约 20 粒玻璃 珠.弃去下层溶液”方法操作。其制备液的最终浓度分别为 0、20、40、60、 80、和 100μg/ml。然后用微量注射器分别取不同浓度的苯甲酸溶液 2.0μl 注 入气相色谱仪中。以其苯甲酸峰面积为纵坐标，苯甲酸浓度为横坐标，绘制标 准曲线。 3．测定 色谱条件：内径 3mm、长 2m 的玻璃柱，填装涂布 5%（m/m）DEGS＋1%磷酸 固定液的（60－80 目）Chromosorb W/AW DMCS。调节载气（氮气）流速，使苯 甲酸于（5－10）min 内出峰。柱温为 180℃，检测器和进样口温度为 250℃。 不同型号仪器调整为最佳工作条件。 进样测定：用 10μl 微量注射器取 2.0μl 测定液，注入气相色谱仪中，取 试样的苯甲酸峰面积与标准曲线比较定量。 4．结果计算 X＝ 1000 5   m C ×0.992 （3－9） 式中：X――试样中的过氧化苯甲酰含量，g/kg； C――由标准曲线上查出的试样被测液中相当于苯甲酸溶液的浓,μ g/ml； m――样品的质量，g； 0.992――苯甲酸换算成过氧化苯甲酰的换算系数。 实训七、饮料中苯甲酸钠、糖精钠含量的测定（高效液相色谱法） 一、目的 1、学习及了解高效液相色谱仪的工作原理及操作要点。 2、掌握高效液相色谱法测定糖精钠、苯甲酸钠的原理及方法。 3、学会使用高效液相色谱仪、学会以识别色谱图。 二、原理 样品加热除去二氧化碳和乙醇，调节 PH 至近中性后，过滤，然后经高效液 相色谱仪反相色谱分离，根据保留时间和峰面积进行定性定量。 三、试剂