离心法所要求的那样大的沉降系数差)。在一定的离心力作用下,颗粒各自以一定的 速度沉降,在密度梯度介质的不同区域上形成区带的方法称为差速区带离心法。此法 仅用于分离有一定沉降系数差的颗粒(20%的沉降系数差或更少)或分子量相差3倍 的蛋白质,与颗粒的密度无关,大小相同,密度不同的颗粒(如线粒体,溶酶体等) 不能用此法分离 Sample zone 828 离心管先装好密度梯度介质溶液,样品液加在梯度介质的液面上,离心时,由 于离心力的作用,颗粒离开原样品层,按不同沉降速度向管底沉降,离心一定时间 后,沉降的颗粒逐渐分开,最后形成一系列界面清楚的不连续区带,沉降系数越大, 往下沉降越快,所呈现的区带也越低,离心必须在沉降最快的大颗粒到达管底前结 東,样品颗粒的密度要大于梯度介质的密度。梯度介质通常用蔗糖溶液,其最大密度 和浓度可达1.28kg/cm3和60%。 此离心法的关键是选择合适的离心转速和时间 (2)等密度区带离心法:离心管中预先放置好梯度介质,样品加在梯度液面 上,或样品预先与梯度介质溶液混合后装入离心管,通过离心形成梯度,这就是预形 成梯度和离心形成梯度的等密度区带离心产生梯度的二种方式 离心时,样品的不同颗粒向上浮起,一直移动到与它们的密度相等的等密度点 的特定梯度位置上,形成几条不同的区带,这就是等密度离心法。体系到达平衡状态130 离心法所要求的那样大的沉降系数差）。在一定的离心力作用下，颗粒各自以一定的 速度沉降，在密度梯度介质的不同区域上形成区带的方法称为差速区带离心法。此法 仅用于分离有一定沉降系数差的颗粒（20% 的沉降系数差或更少）或分子量相差 3 倍 的蛋白质，与颗粒的密度无关，大小相同，密度不同的颗粒（如线粒体，溶酶体等） 不能用此法分离。 离心管先装好密度梯度介质溶液，样品液加在梯度介质的液面上，离心时，由 于离心力的作用，颗粒离开原样品层，按不同沉降速度向管底沉降，离心一定时间 后，沉降的颗粒逐渐分开，最后形成一系列界面清楚的不连续区带，沉降系数越大， 往下沉降越快，所呈现的区带也越低，离心必须在沉降最快的大颗粒到达管底前结 束，样品颗粒的密度要大于梯度介质的密度。梯度介质通常用蔗糖溶液，其最大密度 和浓度可达 1.28 kg/cm3 和 60％。 此离心法的关键是选择合适的离心转速和时间 （2）等密度区带离心法：离心管中预先放置好梯度介质，样品加在梯度液面 上，或样品预先与梯度介质溶液混合后装入离心管，通过离心形成梯度，这就是预形 成梯度和离心形成梯度的等密度区带离心产生梯度的二种方式。 离心时，样品的不同颗粒向上浮起，一直移动到与它们的密度相等的等密度点 的特定梯度位置上，形成几条不同的区带，这就是等密度离心法。体系到达平衡状态