配制培养枯草杆菌的培养基,进行培养并收集对数生长期的细胞。配制海藻酸钙凝胶,用其包 埋固定化枯草杆菌细胞,观察细胞及凝珠直径和重量的变化。 (四)实验教学建议 要求学生提前预习,了解实验原理,熟悉实验流程。学生需提前学习仪器使用方法及注意事 项,尤其是注意细胞培养过程中各环节易受到杂菌污染。在固定化过程中,细胞包埋量、海藻酸钠 浓度、小珠的直径大小对固定化细胞的作用影响较大,因此需把握好包埋的各主要因素。 《发酵工程》部分: 实验一、发酵菌种的筛选 (一)实验目的 掌握无菌操作,学习从自然环境中分离工业微生物的方法,了解各种工业生产菌分离的原理, 掌握从混合菌群中筛选抗生素生产菌的方法。 (二)实验仪器与材料 高压蒸汽灭菌锅、超净工作台,恒温培养箱:土壤、河流水:琼脂培养基、高氏一号培养基、 马铃薯培养基、细菌、霉菌基本培养基和指示培养基。 (三)实验内容 以土壤及河流水为样品,制备稀释液:分别配制细菌、放线菌、真菌培养基:样品分别涂布于 不同培养基,培养并观察,挑取具有代表性的菌落进行纯培养:配制指示菌培养基、指示菌菌悬液, 用琼脂块法和滤纸片法分别进行抑菌实验。 (四)实验教学建议 本实验实验时间长且环节多,应要求学生提前了解不同环境中微生物分布,典型的工业生产菌 分离的方法及原理,熟悉各环节之间的关系以及前后顺序。建议实验的过程中重点对灭菌锅和超净 工作台的使用进行指导。 实验二、乳酸菌的分离及酸乳的发酵 (一)实验目的 熟练掌握无菌操作,学习从发酵制品中分离工业微生物的原理和方法,掌握菌种保藏的原理和 方法,学习从酸奶中分离乳酸菌的方法及酸乳的发酵。 (二)实验内容 取市售酸奶,用无菌生理盐水制备稀释液:制备BCG牛乳培养基和乳酸菌分离培养基:将稀释 液涂布于牛乳培养基并培养:用脱脂乳鉴定乳酸菌发酵能力,保藏发酵能力强的菌株。分离纯化后 的乳酸菌扩大培养备用,取市售鲜牛乳进行巴氏杀菌后冷却备用,接种乳酸菌,分装,发酵。 (三)实验仪器与材料 高压蒸汽灭菌锅、超净工作台,恒温培养箱,水浴锅:市售酸乳,鲜牛乳,脱脂乳粉:一次性 塑料杯:BCG牛乳培养基,乳酸菌分离培养基等。 (四)实验教学建议 33 配制培养枯草杆菌的培养基,进行培养并收集对数生长期的细胞。配制海藻酸钙凝胶,用其包 埋固定化枯草杆菌细胞,观察细胞及凝珠直径和重量的变化。 (四)实验教学建议 要求学生提前预习,了解实验原理,熟悉实验流程。学生需提前学习仪器使用方法及注意事 项,尤其是注意细胞培养过程中各环节易受到杂菌污染。在固定化过程中,细胞包埋量、海藻酸钠 浓度、小珠的直径大小对固定化细胞的作用影响较大,因此需把握好包埋的各主要因素。 《发酵工程》部分: 实验一、发酵菌种的筛选 (一) 实验目的 掌握无菌操作,学习从自然环境中分离工业微生物的方法,了解各种工业生产菌分离的原理, 掌握从混合菌群中筛选抗生素生产菌的方法。 (二)实验仪器与材料 高压蒸汽灭菌锅、超净工作台,恒温培养箱;土壤、河流水;琼脂培养基、高氏一号培养基、 马铃薯培养基、细菌、霉菌基本培养基和指示培养基。 (三)实验内容 以土壤及河流水为样品,制备稀释液;分别配制细菌、放线菌、真菌培养基;样品分别涂布于 不同培养基,培养并观察,挑取具有代表性的菌落进行纯培养;配制指示菌培养基、指示菌菌悬液, 用琼脂块法和滤纸片法分别进行抑菌实验。 (四)实验教学建议 本实验实验时间长且环节多,应要求学生提前了解不同环境中微生物分布,典型的工业生产菌 分离的方法及原理,熟悉各环节之间的关系以及前后顺序。建议实验的过程中重点对灭菌锅和超净 工作台的使用进行指导。 实验二、乳酸菌的分离及酸乳的发酵 (一) 实验目的 熟练掌握无菌操作,学习从发酵制品中分离工业微生物的原理和方法,掌握菌种保藏的原理和 方法,学习从酸奶中分离乳酸菌的方法及酸乳的发酵。 (二)实验内容 取市售酸奶,用无菌生理盐水制备稀释液;制备 BCG 牛乳培养基和乳酸菌分离培养基;将稀释 液涂布于牛乳培养基并培养;用脱脂乳鉴定乳酸菌发酵能力,保藏发酵能力强的菌株。分离纯化后 的乳酸菌扩大培养备用,取市售鲜牛乳进行巴氏杀菌后冷却备用,接种乳酸菌,分装,发酵。 (三)实验仪器与材料 高压蒸汽灭菌锅、超净工作台,恒温培养箱,水浴锅;市售酸乳,鲜牛乳,脱脂乳粉;一次性 塑料杯;BCG 牛乳培养基,乳酸菌分离培养基等。 (四)实验教学建议