a表示,式(28)变为 A=uci 215) a的单位为dm3·g1·cm!.当c以mol·dm3为单位时,k称为摩尔吸光系数;用e表示,单 位为dm3mol·cm-,s比a更常用,因为有时吸收光谱的纵坐标用或1g表示,并以最 大摩尔吸光系数(επ)表示吸光强度。摩尔吸光系数在特定波长和溶剂的情况下是吸光质点 的一个特征常数,在数值上等于吸光物质的浓度为lol·dm-3、液层厚度为lcm时溶液的吸 光度。它是物质吸光能力的量度,可作为定性分析的参考和佔量定量分析方法的灵敏度 值越大,方法的灵敏度越高。如ε为104数量级时,测定该物质的浓度范围可以达到 106~10-3mol·dm;当ε<103时,其测定范围在10-4~10mol·dm-3左右 E一般是由较稀浓度溶液的吸光度计算求得,由于g值与人射光波长有关,因此在表示某 物质溶液的ε时,常用下胸标注明入射光的波长 在化合物的组成成分不明的情况下,物质的摩尔质量也不知道,因而物质的量浓度无法确 定,就无法使用摩尔吸光系数。在这种情况下可采用比吸光系数这一概念,比吸光系数是指 质量分数为1%为1cm时的吸光度值,用4表示。A与c间的关系为 E=0.1M,A 式中M,为吸光物质的相对摩尔质量。 四)偏离 Lambert-Ber定律的因素 在一均匀休系中,当物质浓度固定肘,吸光度A与样品的光程长l之间的线性关系 ( Lambert定律)总是普遍成立而无一例外。但在l恒定时,吸光度A与浓度c之间的正比关系 有时可能失效也就是说会偏离 Lambert-Ber定律。一般以负偏离的情况居多,因而影响了测 定的准确度.引起偏离 Lambert-Ber定律的因素很多,通常可归成两类,一类与样品有关,另 类则与仪器有关,分别叙述如下 与测定样品溶液有关的因素 通常只有当溶液浓度小于001mol·dm-3的稀溶液中 Lambert-Ber定律才能成立,在 髙浓度时,由于吸光质点间的平均距离缩小,邻近质点彼此的电荷分布会产生相互影响,以致 改变它们对特定辐射的吸收能力,即吸光系数发生改变,导致对Ber定律的偏离 推导 Lambert-Ber定律时隐含着测定试液屮各组分之间没有相互作用的假设但随着溶液 浓度增加,各组分之间的相互作用则是不可避免的。例如,可以发生离解、締合、光化反应、互变 异构及配合物配位数变化等作用,会使被测组分的吸收曲线发生明显改变,吸收峰的位置、高度以 及光谱精细结构等都会不同,从而破坏了原来的吸光度与浓度的函数关系,偏离了Ber定律 溶剂对吸收光谱的影响也很重要。在分光光度法中广泛使用各种溶剂,它会对生色团的 吸收峰高度、波长位置产生影响。溶剂还会影响待测物质的物理性质和组成,从而影响其光 谱特性包括谱带的电子跃迁类型等 当试样为胶体乳状液或有悬浮物质存在时,入射光通过溶液后,有一部分光会因散射而 损失,使吸光度增大,对Beer定律产生正偏差.质点的散射强度是与入射光波长的四次方成反 比的,所以散射对紫外区的测定影响更大 2.与仪器有关的因素 严格讲 Lambert-Ber定律只适用于单色光,但在紫外可见分光光度法中从光源发出的光 经单色器分光,为满足实际测定中需有足够光强的要求狭缝必须有一定的宽度。因此,由出射 2