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6.胞内产物的选择性释放 问题关能:丁解标产物的性质及其所在位 ⑧原则: 朵整架晚不究金成碎、选择性导效,共他的质 透:利用两种以上的不同阶的分高过 END 88 6. 胞内产物的选择性释放 细胞完全破碎的缺点:所有胞内的蛋白质全部 释放出来,粘度增加,杂质增加,给后面分离 纯化带来困难。 目标:细胞不完全破碎,选择性释放,其他物质 尽量少释放,粗分。 生化分离工程 第三章 第三章 | 生化集成:利用两种以上的不同阶段的分离过程 同时进行。 原因:例如利用珠磨法破碎酵母细胞时,各种酶 的释放速度不同,靠近细胞膜和细胞壁的酶先释 放,细胞内部或细胞器内后释放。 问题关键:了解目标产物的性质及其所在位置 (1)破坏或破碎存在目标产物的位置。 如:存在于膜附近时,可采用温和的方法,如酶溶法,渗 透压冲击法和冻结—融化法; 存在于细胞质内时,只能采用强烈的机械破碎法。 原则: 生化分离工程 第三章 第三章 | 存在于细胞质内时,只能采用强烈的机械破碎法。 (2)选择性溶解目标产物 当目标物处于与细胞膜或细胞壁结合的状态时,调节pH 值,离子强度或添加与目标产物具有亲和力的试剂使目标 物易于释放,其他杂质不易溶出。同时可采用生化集成 生化分离工程 第三章 |
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